Este jogo é usado para detectar o anticorpo de Gallisepticum do Mycoplasma (MG) no soro da galinha, para avaliar a condição do anticorpo pela vacina de Gallisepticum do Mycoplasma (MG) na exploração agrícola de galinha e para ajudar ao diagnóstico da galinha contaminada serological.

2. Princípio

O jogo do anticorpo ELISA de Gallisepticum do Mycoplasma (MG) é baseado em um immunoassay enzimático indireto (ELISA indireto). O antígeno é revestido em placas. Quando um soro da amostra contém anticorpos específicos contra o vírus, ligarão ao antígeno em placas. Lave os anticorpos desatados e outros componentes. Adicione então um conjugado específico da enzima. Após a incubação e a lavagem, adicione a carcaça de TMB. Uma reação colorimetric aparecerá, medido por um espectrofotômetro (450 nanômetro).

3. Reagentes

1	O antígeno de MG revestiu o microplate	1 placa de 96 poços	7	Controle negativo	2 ml
2	Conjugado da enzima	11 ml	8	Positivecontrol	1,6 ml
3	amortecedor da lavagem 10×concentrated	100 ml	9	Placa da diluição do soro	1 parte
4	Solução da carcaça	11 ml	10	Filme esparadrapo	2 partes
5	Diluição da amostra	100 ml	11	Instrução	1 parte
6	Pare a solução	15 ml

4. Materiais exigidos mas não fornecidos

1) Micropipettors e pontas descartáveis: 0.5μL~10μL, 10μL~100μL, 100μL~1000μL
2) Pontas descartáveis
3) incubadora de 37 ℃
4) Cilindro de medição: 500 ml
5) leitor do microplate de 96 poços
6) Água destilada ou água deionied
7) Garrafa ou máquina de lavar do microplate

5. Preparação da amostra

Tome o sangue inteiro animal, faça o soro de acordo com métodos regulares, o soro deve ser claro, não têm nenhuma hemólise.

6. Preparação do amortecedor de lavagem

O amortecedor de lavagem do retorno à temperatura ambiente antes de usar, se há cristais salgados, agita para fazer os cristais dissolver-se, usa então a água destilada ou a água deionized para dilui-la em 10 vezes. O amortecedor de lavagem diluído pode armazenar para 1 semana no ℃ 4.

7. Diluição da amostra

Na placa da diluição do soro, soro diluído no 1:99 com diluição da amostra (por exemplo: diluição da amostra 495μL + soro 5μL)
Observação: O controle negativo e o controle positivo não precisam diluído. Ponta da troca após ter tomado a amostra todas as vezes, registro a situação da amostra na placa exatamente. Agite a amostra uniformemente antes de adicioná-la.

8. Notas

1) Todos os reagentes devem ser trazidos à temperatura ambiente e ser agitados bem antes de usar, e ser armazenados no depois de uso 2-8°C
2) Não substitua os reagentes nos jogos com os números de grupo diferentes. Evite a contaminação do reagente durante o uso.
3) A solução da carcaça e da parada pode irritar a pele e os olhos, assim para ser cuidadosa ao usá-la.
4) Não expõe a carcaça para iluminar e evitar o contato com antioxidantes.
5) Após a abertura, os poços devem ser protegidos da umidade ou do contato com água (para pôr para trás o microplate não utilizado no saco e para usar um desidratador em 2~8℃)
6) Dispõe corretamente de todo o desperdício antes de despejar para evitar a contaminação.
7) Siga os sentidos exatamente para os melhores resultados. Todos os procedimentos que incluem introduzir com pipeta, sincronismo e lavagem devem ser exatos.
8) A placa da diluição do soro é para o único uso, por favor não o usa duas vezes; seu volume máximo é 300μL/well.

9. Procedimento de ELISA

1) Tome o microplate pré-revestido (pode unseal para diversos o uso do tempo conforme a quantidade da amostra), adicionam o soro diluído 100μL para provar poços, entrementes ajustam 1 bem para o controle negativo, 2 poços para o controle positivo separadamente. Adicione o negativo 100μL/controle positivo a seus poços. Agite levemente, não transborde, não cubra e não incube em 37℃ para 30 mínimos.
2) Derrame o líquido fora dos poços, adicione o amortecedor de lavagem diluído 250 μL a cada poço, derrame-o para fora. Repita 4-6 vezes, enfim pancadinha secar no papel absorvente.
3) Adicione o conjugado da enzima 100μL a cada poço, agite-o levemente, andincubate da tampa em 37℃ para 30 mínimos.
4) Repita etapa 2 (lavagem). Recorde a pancadinha secar enfim no papel absorvente.
5) Adicione a carcaça 100μL a cada poço, misture-a corretamente, reaja-a para 10 o atdark mínimo at37℃ na obscuridade.
6) Adicione 50μl da solução da parada em cada poço, e meça o resultado dentro de 10 mínimos.

10. Resultados

Leia o valor do OD pelo microplate-leitor no comprimento de onda de 450nm (630nm como a referência).
Para que o teste seja válido:
Valor do OD do controle negativo (N) <0> entrementes valor do OD do controle positivo (P)>0.5.
Método do cálculo:
O valor do OD das amostras calcula a média do valor do OD do controle positivo = do valor de S/P
Juiz do resultado:
≥ < 0=""> 0,2 de S/P S/P, positivo.

Especificações: 96 poços/jogo.
Data de expiração: 12 meses.
Armazenamento: Armazenando em 2-8℃, na obscuridade.

Q1: Quanto tempo tomará para que você envie?
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orientação linear através do telefone, do vídeo e dos outros formulários.

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A6: Pode ser enviado por expresso (FEDEX, UPS, DHL, EMS, etc.) ou pelo ar e pela terra. Confirme por favor connosco antes de colocar uma ordem.

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