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Anticorpo ELISA Kit do vírus da doença de Marek aviário para aves domésticas 96 Wells/jogo
1. Uso
Este jogo é usado para detectar o anticorpo do vírus da doença de Marek aviário (MDV) no soro da galinha, avalia o estado do anticorpo da vacina da doença de Marek aviário em explorações agrícolas de galinha, e a assistência no diagnóstico de galinhas soro-contaminadas.
2. Princípio
O anticorpo ELISA Kit da doença do Marek aviário é baseado em um immunoassay indireto da enzima (ELISA indireto). O antígeno refinado de MDV é revestido na placa. Para a detecção, uma amostra diluída do soro é adicionada, e após a incubação, se a amostra do soro contém anticorpos específicos contra o vírus da DM, ligarão ao antígeno revestido na placa. Anticorpo desatado lavagem e outros componentes. Um conjugado específico da enzima é adicionado então, que ligue a combinação do antígeno-anticorpo na placa. Após a incubação e a lavagem, descarte conjugado desatado da enzima; adicione a carcaça de TMB. Uma reação colorimetric ocorre, para a solução é adicionada, e o valor do OD é medido com um espectrofotômetro (450 nanômetro).
3. Reagentes
1 | O antígeno da DM revestiu tiras do microtiter | partes de 1/2 | 7 | Pare a solução | 6/11 de mL |
2 | EnzymeConjugate | 11/21 de mL | 8 | Controle negativo | 0.8/1.6 mL |
3 | solução da lavagem 10× | 50/100 de mL | 9 | Positivecontrol | 0.8/1.6 mL |
4 | Solução da carcaça A | 6/11 de mL | 10 | Placa da diluição do soro | partes de 1/2 |
5 | SubstrateBsolution | 6/11 de mL | 11 | Filme esparadrapo | 2/4 de parte |
6 | Diluição da amostra | 50/100 de mL | 12 | Instrução | 1 parte |
4. Materiais exigidos mas não fornecidos
1) Micropipettors e pontas descartáveis: 0.5μL~10μL, 10μL~100μL, 100μL~1000μL
2) incubadora de 37 ℃
3) Cilindro de medição: 500 ml
4) leitor do microplate de 96 poços
5) Água destilada ou água deionied
6) Garrafa ou máquina de lavar do microplate
5. Preparação da amostra
Tome o sangue inteiro animal, faça o soro de acordo com métodos regulares, o soro deve ser claro, não têm nenhuma hemólise.
6. Preparação do amortecedor de lavagem
A solução de lavagem do retorno à temperatura ambiente antes de usar, se há cristais salgados, agita para fazer os cristais dissolver-se, usa então a água destilada ou a água deionized para dilui-la em 10 vezes. A solução de lavagem diluída pode armazenar para 1 semana no ℃ 4.
7. Diluição da amostra
Na placa da diluição do soro, soro diluído no 1:99 com diluição da amostra (por exemplo: diluente da amostra 495μL + soro 5μL)
Observação: O controle negativo e o controle positivo não precisam diluído. Ponta da troca após ter tomado a amostra todas as vezes, registro a situação da amostra na placa exatamente. Agite a amostra uniformemente antes de adicioná-la.
8. Notas
1) Todos os reagentes devem ser retornados à temperatura ambiente e ser agitados bem antes de usar, e ser armazenados no depois de uso 2-8°C
2) Não substitua reagentes nos jogos com os números de lote diferentes. Evite a contaminação do reagente durante o uso.
3) As carcaças e as soluções da parada podem irritar a pele e os olhos, assim cuidado do uso.
4) Não expõe TMB (carcaça B) para iluminar e evitar o contato com antioxidantes.
5) Após ter aberto o furo, deve ser tomado para impedir o furo da obtenção molhado ou em contato com a água (para pôr para trás o microplate não utilizado no saco e para usar um desidratador em 2~8°C)
6) Dispõe corretamente de todo o desperdício antes de despejar para evitar a contaminação.
7) Siga as instruções exatamente para os melhores resultados. Todos os procedimentos que incluem introduzir com pipeta, sincronismo e lavagem devem ser exatos.
8) A placa da diluição do soro é para o único uso, por favor não reutiliza; seu volume máximo é 300μL/well.
9. Procedimento de ELISA
1) Tome um microplate pré-revestido (que pode ser aberto e épocas múltiplas usadas de acordo com o volume de amostra), adicione o μL 100 do soro diluído a cada poço, e ajuste um bem para o controle negativo, o controle positivo e o controle vazio. Adicione o µL 100 o µL controles negativos/positivos a seus poços e 100 do diluente da amostra somente aos poços do controle vazio. Agite delicadamente (não derrame) e para incubar em 37°C por 30 minutos.
2) Derrame para fora o líquido nos poços, adicione o μL 300 da solução de lavagem diluída a cada poço, deixe o suporte para 1 minuto, e derrame-o para fora. Repita 3 vezes, a seguir pancadinha seca no papel absorvente.
3) Adicione o μL 100 do conjugado da enzima a cada poço e incube-o em 37°C para 30 mínimos.
4) Repita etapa 2 (lavagem). Recorde finalmente à pancadinha seca no papel absorvente.
5) Adicione o μL 50 da carcaça à cada um bem, adicione então a carcaça B (μL 50), a mistura bem, e reaja em 37°C para o minuto 10 na obscuridade.
6) Adicione o μL 50 da solução da parada a cada poço, e meça o resultado dentro de 10 minutos.
10. Resultados
Ajuste zero para o poço vazio, e teste o valor de A450nm (630 nanômetro como uma referência) no microplate-leitor. As condições para que o teste seja sustentável são que o valor do A450nm dos poços positivos do controle é superior ou igual a 0,6, e o valor do A450nm dos poços negativos do controle é menos de 0,15. Se o teste é inválido, a operação está na dúvida, contraprova e observa todos os reagentes com cuidado.
Se o valor do A450 da amostra é maior das 0,2+ absorvências do meio negativo do controle, está julgado para ser positivo; e se as menos de 0,2+ absorvências do meio negativo do controle, negativas. Se a absorvência do meio negativo do controle é menos de 0,05, calcule como 0,05
Especificações: 96 poços jogo ou 96*2/jogo dos poços/.
Data de expiração: 12 meses.
Armazenamento: Armazenando em 2-8℃, na obscuridade.
Q1: Quanto tempo tomará para que você envie?
A1: Geralmente navios dentro de 7 dias de trabalho.
Q2: Você apoia OEM/ODM?
A2: pode ser apoiado. Nós podemos personalizar de acordo com suas necessidades específicas e quantidades específicas.
Q3: Como sua fábrica está fazendo em termos do controle da qualidade?
A3: Nós temos a certificação ISO9001 e ISO13485 a certificação, até agora todo o processo de produção, nós temos regras padrão, nós cumprimos com o comportamento e as leis relevantes do governo.
Q4: O serviço pós-venda é garantido?
A4: Nós proporcionamos o serviço pós-venda técnico em linha profissional. Se o produto falha durante a experiência, nós podemos fornecer
orientação linear através do telefone, do vídeo e dos outros formulários.
Q5: Que é sua quantidade de ordem mínima?
A5: 1Kit.
Q6: Que é o método de envio?
A6: Pode ser enviado por expresso (FEDEX, UPS, DHL, EMS, etc.) ou pelo ar e pela terra. Confirme por favor connosco antes de colocar uma ordem.