Rato 8-Hydroxy-desoxyguanosine; 8-OHdG ELISA Kit
- Nosso jogo do rato 8-Hydroxy-desoxyguanosine (8-OHdG) ELISA é analisar os níveis 8-OHdG no soro do rato, no plasma, nos meios de cultura ou em todo o líquido biológico.
Princípio
Este jogo de ELISA usa o sanduíche-ELISA como o método. O stripplate de Microelisa fornecido neste jogo foi pré-revestido com um anticorpo específico a 8-OHdG. Os padrões ou as amostras são adicionados aos poços apropriados do stripplate de Microelisa e combinaram ao anticorpo específico. Então uma peroxidase do armorácio (HRP) - anticorpo conjugado específico para 8-OHdG é adicionada a cada stripplate de Microelisa bem e incubada. Os componentes livres são lavados afastado. A solução da carcaça de TMB é adicionada a cada poço. Somente aqueles poços que contêm 8-OHdG e o anticorpo 8-OHdG conjugado HRP parecerão azuis na cor e girarão então amarelo após a adição da solução da parada. A densidade ótica (OD) é medida spectrophotometrically em um comprimento de onda de 450 nanômetro. O valor do OD é proporcional à concentração de 8-OHdG. Você pode calcular a concentração de 8-OHdG nas amostras comparando o OD das amostras à curva padrão.
Materiais fornecidos com o jogo
| |
Materiais fornecidos com o jogo |
48 determinações |
96 determinações |
Armazenamento |
| 1 |
Manual do usuário |
1 |
1 |
R.T. |
| 2 |
Membrana da placa de fechamento |
2 |
2 |
R.T. |
| 3 |
Sacos selados |
1 |
1 |
R.T. |
| 4 |
Stripplate de Microelisa |
1 |
1 |
2-8℃ |
| 5 |
Padrão 1350 pg/ml |
garrafa 0.5ml×1 |
garrafa 0.5ml×1 |
2-8℃ |
| 6 |
Diluente padrão |
garrafa 1.5ml×1 |
garrafa 1.5ml×1 |
2-8℃ |
| 7 |
Reagente do HRP-conjugado |
garrafa 3ml×1 |
garrafa 6ml×1 |
2-8℃ |
| 8 |
Diluente da amostra |
garrafa 3ml×1 |
garrafa 6ml×1 |
2-8℃ |
| 9 |
Solução A do cromogêneo |
garrafa 3ml×1 |
garrafa 6ml×1 |
2-8℃ |
| 10 |
Solução B do cromogêneo |
garrafa 3ml×1 |
garrafa 6ml×1 |
2-8℃ |
| 11 |
Pare a solução |
garrafa 3ml×1 |
garrafa 6ml×1 |
2-8℃ |
| 12 |
Solução da lavagem |
20ml (20X) ×1bottle |
20ml (30X) ×1bottle |
2-8℃ |
Dez poços são ajustados para padrões em um stripplate de Microelisa. Em bem 1 e bem em 2, a solução 100μl padrão e o amortecedor padrão da diluição 50μl são adicionados e misturados bem. Em bem 3 e bem em 4, a solução 100μl de bem 1 e 2 é adicionada bem respectivamente. Então o amortecedor padrão da diluição 50μl é adicionado e misturado bem. a solução 50μl é rejeitada do poço 3 e bem 4. Em bem 5 e bem em 6, a solução 50μl de bem 3 e 4 é adicionada bem respectivamente. Então o amortecedor padrão da diluição 50μl é adicionado e misturado bem. Em bem 7 e bem em 8, a solução 50μl de bem 5 e 6 é adicionada bem respectivamente. Então o amortecedor padrão da diluição 50μl é adicionado e misturado bem. Em bem 9 e bem em 10, a solução 50μl de bem 7 e 8 é adicionada bem respectivamente. Então o amortecedor padrão da diluição 50μl é adicionado e misturado bem. a solução 50μl é rejeitada do poço 9 e bem 10. Após a diluição, o volume total em todos os poços é 50μl e as concentrações são 900 pg/ml, 600 pg/ml, 300 pg/ml, 150 pg/ml e 75pg/ml, respectivamente.
Cálculo de resultados
As concentrações conhecidas do padrão do rato 8-OHdG e de sua leitura correspondente OD são traçadas na escala do log (x-linha central) e na escala do log (y-linha central) respectivamente. A concentração do rato 8-OHdG na amostra é determinada pelo traço o O.D. da amostra na Y-linha central. A concentração original é calculada multiplicando o fator da diluição.
Precisão
precisão do Intra-ensaio (precisão dentro de um ensaio): 3 amostras com o baixo, rato médio e de nível elevado 8-OHdG foram testadas 20 vezes em uma placa, respectivamente.
precisão do Inter-ensaio (precisão entre ensaios): 3 amostras com o baixo, rato médio e de nível elevado 8-OHdG foram testadas em 3 placas diferentes, 8 replicates em cada placa.
CV (%) = SD/meanX100
Intra-ensaio: CV<10>
Inter-ensaio: CV<12>
Escala do ensaio
15 pg/ml- 1000 pg/ml
Sensibilidade:
4.5pg/ml
