Jogos de teste rápidos de pouco peso do jogo do teste/diagnóstico para a detecção do ácido nucleico

[Nome do produto] jogo da detecção do ácido nucleico do vírus COVID-2019 (duplo-RTPCR) [artigo NÃO] A001

[Tipos de produto] 50 testes/jogo

[Uso previsto]

Este jogo é usado para a detecção do ácido nucleico do coronavirus novo (2019-ncov) em todos os tipos de amostras das vias respiratórias, tais como o cotonete pharyngeal, o escarro, o líquido de lavage alveolar, etc. Os resultados podem ser usados para o diagnóstico auxiliar dos pacientes com infecção nova do coronavirus ou ser suspeitados da infecção nova do coronavirus, fornecendo a base diagnóstica molecular para pacientes a infecção.

[Princípio dos testes]

O grupo dois de primeiras demão do PCR e as pontas de prova foram projetados basearam na sequência conservadora do gene do quadro da codificação da leitura Open (ORF1ab) e do gene da proteína do núcleo (gene de N) do coronavirus novo (2019-nCoV), e o jogo da detecção conseguiu simultaneamente a detecção dos alvos acima mencionados com especificidade alta. Com a reação do PCR que vai, o sinal da fluorescência gerado pela ponta de prova podia ser detectado pelo detector automático do PCR da fluorescência e pela monitoração de tempo real realizada de RT-PCR. [Composição]

Nota: O controle positivo da qualidade e o controle negativo da qualidade serão ajustados para que cada teste monitore o ambiente do corpo e da operação de teste; os produtos negativos e positivos do controle da qualidade foram embalados no kitand podem ser usados diretamente sem extração.

[Condições de armazenamento e data de expiração]

1. Mantenha longe da luz e de at-20±5℃.Transport selado no ℃ 2~8 ou no tipo ambientes do gelo seco por 7 dias no máximo. Tem uma vida útil de 6 meses.

2. Avoid repetiu ciclos da gelo-aproximação amigável. Cinco ciclos da gelo-aproximação amigável não afetarão os resultados da detecção.

[Instrumentos aplicáveis]

Pode ser adaptada ao instrumento quantitativo fluorescente do PCR do tempo real com FAM e encantar (VIC/Joe) os canais dos vários fabricantes.

[Exigência da amostra]

1. Tipo aplicável da amostra: líquido de lavage alveolar, cotonete da garganta, escarro.

2. Coleção da amostra: recolha amostras em uns recipientes estéreis com um volume de amostra de nenhum menos do que 1ml.

• Prove o armazenamento e o transporte: as amostras a ser testadas podem ser colocadas no ℃ 2 ~ o ℃ 8 por 72 horas, e no armazenamento a longo prazo será colocado no ≤ - ℃ 20 para evitar a congelação repetida e thawing. Os espécimes foram transportados em umas garrafas de ondulação seladas com gelo ou em umas caixas da espuma seladas com gelo.

[Etapas]

1. processamento da amostra (sala de processamento da amostra)

Tipo do espécime: espécime superior das vias respiratórias (URT): incluindo o cotonete pharyngeal, o cotonete nasal, o extrato do nasopharynx e a lavagem pharyngeal.

2 S-A001A1

Abaixe o espécime das vias respiratórias (LRT): incluindo o extrato das vias respiratórias, líquido do broncholavage, espécime da biópsia do tecido de pulmão.

Os métodos de processamento da amostra são mostrados na seguinte tabela:

2. extração do RNA viral

O auto preparou o reagente da extração, ou de acordo com as instruções do jogo viral da extração do ácido nucleico do RNA (método da centrifugação) da biotecnologia Co. de Guangzhou DEAOU, Ltd

3. preparação do reagente (sala da preparação do reagente)

3.1. Remova os componentes na caixa de embalagem e coloque-os na temperatura ambiente. Depois que a temperatura é equilibrada à temperatura ambiente, misture os uniformemente e o centrifugate eles para uso posterior.

3.2. Prepare a solução da reação de acordo com o número exigido de tubos da reação. Ajuste o número exigido de tubos da reação como n (n = número de amostras + 1 controle positivo do tubo + 1 controle negativo do tubo). O método da preparação é como segue:

Após ter misturado o sistema de reação preparado, cada tubo da reação obtém a 20 o μ L solução da reação e 20 o μ l líquido de selagem é adicionado a cada tubo. Transferência à área de processamento da amostra.

4. adição da amostra (sala de processamento da amostra)

Tome 5μL das amostras acima processadas, do controle positivo e do controle negativo respectivamente e adicione-os no tubo correspondente da reação do PCR 0.2ml, feche-o o tubo e transfira-os à área da detecção.

Nota: em processo da amostra que adiciona, é necessário evitar usar a pipeta para fundir repetidamente, de modo a para não causar um grande número bolhas que afetarão os resultados experimentais. Além, é necessário centrifugar por um curto período de tempo antes de usar a máquina para a amplificação, para remover tanto quanto possível as bolhas. amplificação 5.PCR (sala da amplificação do PCR)

5,1 ajuste do instrumento (tome o instrumento ABI7500 como um exemplo)

Põe o tubo da reação do PCR no instrumento do PCR, e ajuste as amostras negativas, positivas e desconhecidas de acordo com a sequência correspondente das amostras. Desde que este jogo precisa a detecção dobro, contém duas pontas de prova com etiquetas fluorescentes diferentes. FAM e os canais de Vic devem ser selecionados simultaneamente relatando grupos fluorescentes.

5.2. Procedimento da amplificação

A coleção do sinal da fluorescência é ajustada no ℃ 60, e o sistema de reação é ajustado 25 no μ L.

[Padrão do controle da qualidade]

6. análise do resultado

A linha de base é ajustada com 3-10 ou 6-15 ciclos de sinais da fluorescência. O princípio do ajuste do ponto inicial é que a linha do ponto inicial apenas excede o ponto o mais alto da curva negativa da amplificação do controle, e pode igualmente ser ajustada de acordo com a condição de ruído.

Julgamento do resultado

[índice do desempenho de produto]

1. Especificidade

A ponta de prova da primeira demão usada neste jogo é projetada de acordo com a sequência conservada do coronavirus novo (2019-ncov), que tem uma taxa alta da detecção para o fragmento do gene do alvo. Este jogo não tem nenhuma reação transversal com as amostras do coronavirus (NL63, HKU1, 229 e229e OC43, SARS SARS), gripe um vírus,

vírus da hepatite b, vírus syncytial respiratório, vírus adenoide, virus da gripe, bacilo do klebsiella da pneumonia, estreptococo pneumoniae, hemophilus - influenzae, pseudomonas - aeruginosa, legionella eosinophilic do pulmão, gritar - tussa o bacili, estafilococo - mycoplasma áureo e da pneumonia e clamídia da pneumonia. A taxa da coincidência de materiais de referência positivos e negativos em empresas dos testes is100%.

2. precisão

O coeficiente de variação (CV%) do valor do CT nos resultados da análise é inferior ou igual a 5%.

3. Limite de detecção mínimo

O limite de detecção mínimo deste jogo é 1000 cópias/ml.

4. Escala linear

2×10 ~2×10 copies/mL

[Notas]

1. Este produto é usado somente para o diagnóstico externo.

2. A detecção de ácido nucleico viral depende do processamento correto da amostra, do transporte, da preparação, da coleção ilógica da amostra etc., processando, transporte e a baixa concentração da amostra pode conduzir aos resultados do falso negativo.

3. O teste do PCR ou o teste relativo serão operados pela pessoa qualificada ou familiar.

4. A substância negativa e positiva do controle será ajustada para cada teste.

5. Opere por favor a experiência restritamente em áreas diferentes. Os artigos em cada área são para o objetivo especial. Não cruze usam-nos para evitar a poluição. Limpe a bancada imediatamente depois da experiência.

6. Todas as amostras do teste serão consideradas como substâncias infecciosas. Durante a experiência, as luvas descartáveis do clothesand do trabalho serão vestidas e as luvas serão substituídas frequentemente para evitar a contaminação transversal entre amostras. A operação e a eliminação de resíduos da amostra cumprirão as exigências de leis relevantes e de regulamentos: “As orientações para a seguridade biológica de laboratórios microbiológicos e biomedicáveis “e de “regulamentos na gestão de resíduos clínica” emitiram pelo Ministério da Saúde.

7. o hypochlorite de 10% ou o álcool de 75%, a lâmpada ultravioleta ou o ozônio serão usados para desinfetar instrumento a plataforma da operação, a pipeta, o centrifugador, da amplificação do PCR e outros equipamentos.