REAGEN LLC
REAGEN INC, com foco em kits de teste ELISA, PCR e Lateral Flow, incluindo kits de detecção de doenças clínicas, kits de teste de segurança de alimentos e alimentos para animais,e kits de detecção de
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REAGENTMO kit de ensaio ELISA da estreptomicina é um ensaio imunológico enzimático competitivo para a análise quantitativa da estreptomicina e da diidrostreptomicina nos alimentos para animais, no mel, nos rins, no fígado, na carne (carne de bovino, de frango e de suíno),leite, soro e urina.
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Tipo de amostra |
Limite de detecção(ng/g ou ppb) |
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Alimentos para animais |
5 |
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Querida. |
2 |
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Carne/Fígado/Rins |
5 |
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Leite |
1 |
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Leite em pó |
1 |
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Sério/Urinos |
0.5 |
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Analíticos |
Reatividade cruzada (%) |
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Streptomicina |
100 |
Métodos de extracção rápidos (10 a 30 minutos) e sem reagente orgânico para várias amostras com recuperação elevada (75 a 115%).
Alta sensibilidade (0,05 ng/g ou ppb) e baixo limite de detecção (1 ng/g ou ppb para carne e leite).
Alta reprodutibilidade.
Um ensaio ELISA rápido (menos de 2 horas, independentemente do número de amostras).
O método baseia-se num ensaio ELISA colorimétrico competitivo. O anticorpo da estreptomicina foi revestido nos poços da placa.A amostra é adicionada juntamente com o conjugado de peroxidase estreptomicina-rabaneteSe o resíduo de estreptomicina estiver presente na amostra, ele competirá pelo anticorpo de estreptomicina, impedindo assim que a estreptomicina-HRP se ligue ao anticorpo ligado ao poço.A intensidade de cor resultante, após adição do substrato de HRP (TMB), tem uma relação inversa com a concentração de resíduos de estreptomicina na amostra.
Marcar as tiras individuais que serão utilizadas e os reagentes aliquotados como exemplo:
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Componente |
Volume por reação |
24 Reacções |
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Anticorpo da estreptomicina #1 |
50 ml |
1.2 ml |
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Anticorpo conjugado HRP #2 |
50 ml |
1.2 ml |
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1X Solução de lavagem |
20,0 ml |
48 ml |
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Parar tampão |
100 ml |
2.4 ml |
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Substrato TMB |
100 ml |
2.4 ml |
Adicionar 50 uL de cada Streptomycin Standards em duplicado em poços diferentes (FAdicionar padrões à placa apenas na ordem de baixa concentração a alta concentração).
Adicionar 50 litros de cada amostra em duplicado em poços de amostragem diferentes.
Adicionar 50 I.U. de anticorpos HRP-conjugados #2 e 50 ml de anticorpos #1 a cada poço, misturar bem balançando suavemente a placa manualmente durante 1 minuto.
Incube o prato durante 30 minutos a temperatura ambiente (20 ‡ 25°C / 68 ‡ 77°F) (- O quê? FEvitar a luz solar direta e bancos frios durante a incubação (recomenda-se cobrir a placa de microtiter durante a incubação).
Lavar a placa 5 vezes com 250 I.L. de 1 X Solução de Lavagem.FRealizar a próxima etapa imediatamente após a lavagem dos pratos.
Adicionar 100 I.L. de substrato de TMB. Tempo da reação imediatamente após a adição do substrato. Misturar a solução agitando suavemente a placa manualmente durante 1 minuto enquanto incuba (- O quê? FQualquer solução de substrato que apresente coloração indica deterioração e deve ser descartada.Recomenda-se cobrir a placa de microtiter durante a incubação).
Após a incubação durante 15 minutos a temperatura ambiente (20°C / 68°F), adicionar 100 L de Stop Buffer para parar a reacção enzimática.
Leia a placa o mais rapidamente possível após a adição do tampão de parada num leitor de placas com comprimento de onda de 450 nm (FAntes da leitura, utilizar uma toalha sem pêlos no fundo da placa para garantir que a humidade ou as impressões digitais não interferem com as leituras).