Amostra diagnóstica do plasma dos jogos do Thyroxine T4 Elisa com 2 escalas padrão da curva

Teste do Thyroxine T4 ELISA, precisão alta, método do sanduíche de Elisa, para a medida quantitativa

Nome do produto: Teste do Thyroxine T4 ELISA

Uso pretendido:

O jogo de (T4) do Thyroxine é projetado medir quantitativamente o presente T4 no soro, no plasma (o EDTA e heparina), na urina, em amostras fecais secadas extraídas, e em culturemedia do tecido. Este jogo mede totalT4 no soro, no plasma, e em amostras fecais extraídas. T4 é independente da espécie.

Sumário:

O Thyroxine é a hormona principal produzida pela glândula de tiroide. As hormonas de tiroide, o triiodothyronine (T3) e o thyroxine (T4), são as hormonas tirosina-baseadas produzidas pela glândula de tiroide que são principal responsável para o regulamento do metabolismo. O iodo é necessário para a produção de T3 e de T4. Uma deficiência do iodo conduz à produção diminuída de T3 e de T4, amplia o tecido do tiroide e causará a doença conhecida como o bócio. O formulário principal da hormona de tiroide no sangue é o thyroxine (T4), que tem uma meia-vida mais longa do que o T3. A relação de T4 ao T3 liberado no sangue é aproximadamente 20 a 1. T4 é convertida ao T3 ativo (três a quatro vezes mais poderoso do que T4) dentro das pilhas pelos deiodinases (5' - iodinase). Estes são processados mais pelo decarboxylation e pelo deiodination para produzir o iodothyronamine (T1a) e o thyronamine (T0a). Todos os três isoforms dos deiodinases selênio-estão contendo enzimas, assim o selênio dietético é essencial para a produção T3. O hipotiroidismo é a circunstância que resulta da sob-produção de thyroxine pela glândula de tiroide qualquer um porque a glândula é naturalmente underactive ou porque a terapia ou a cirurgia do radioiodine para uma glândula overactive conduziram à hipoactividade. O Thyroxine é tomado para substituir a deficiência que existe em tais situações e consequentemente para restaurar a atividade metabólica normal. A produção da hormona de tiroide é regulada através da modulação pituitária de (TSH) do thyrotropin da secreção do prohormone de (T4) do thyroxine pela glândula de tiroide e pelo regulamento da produção ativa de (T3) do triiodothyronine em tecidos periféricos através dos eventos metabólicos que influenciam a enzima.

Princípio de teste:

O jogo oferece 2 escalas padrão da curva. Para amostras do soro e do plasma, nós recomendamos usar o µL 10 dos padrões ou das amostras. A escala de concentração do ensaio para T4 será 50 ng/ml a 0,781 ng/ml. Para amostras de urina, nós recomendamos alternativamente usar o µL 100 dos padrões ou provamos concentrações de T4 que variam de 4 ng/ml a 0,0625 ng/ml.

Uma solução T4 conservada em estoque é fornecida para gerar curvas padrão para o ensaio e todas as amostras devem ser lidas fora da curva padrão. Os padrões ou as amostras diluídas são introduzidos com pipeta em uma placa de microtiter clara revestida com um anticorpo para capturar anticorpos do rato. Um conjugado de T4-peroxidase é adicionado aos padrões e às amostras nos poços. A reação obrigatória é iniciada pela adição de um anticorpo monoclonal toT4 a cada um bem. Depois que uma incubação da hora a placa é lavada e a carcaça está adicionada. A carcaça reage com o conjugado encadernado de T4-peroxidase. Após uma incubação curto, a reação é parada e a intensidade da cor gerada é detectada em um leitor da placa de microtiter capaz de medir o comprimento de onda 450nm. A concentração do T4 na amostra é calculada, após ter feito a correção apropriada para a diluição da amostra, usando o software disponível com a maioria de leitores da placa.

Componentes do jogo

1. Microtiterwells, 12 x 8 (quebre distante) tiras, 96 poços; Wells revestiu com o ON treponema - antígeno pallidum. (incluindo 1 suporte da tira e 1 folha da tampa)
2. *** De Posição Controle, 1 tubo de ensaio, 1,0 mL, pronto para uso; colorido tampão amarelo, vermelho.
3. Negativo. Controle o ***, 1 tubo de ensaio, 2,0 mL, pronto para uso; colorido tampão amarelo, amarelo.
4. *** Do controle da interrupção, 1 tubo de ensaio, 1,0 mL, pronto para uso; colorido tampão amarelo, preto.
5. Conjugado da enzima **, 1 tubo de ensaio, 13 mL, pronto para uso,
6. Solução da carcaça, 1 tubo de ensaio, 14 mL, pronto para uso, Tetramethylbenzidine (TMB).
7. Pare a solução, 1 tubo de ensaio, 14 mL, pronto para uso, contenha 0,2 mol/l H2SO4, evitem o contato com a solução da parada. Pode causar irritações e queimaduras de pele.
8. Solução da lavagem *, 1 tubo de ensaio, 30 mL (20X concentrado para 600 mL), ± 0,2 do pH 7,2 vê a preparação do „dos reagentes “.

* contém 0.03% ProClin 300

** contém 0.03% ProClin sulfato da gentamicina de 300 + de 0.01%

o *** contém 0.03% ProClin 300 + 0.015% 5 bromo-5-nitro-1,3-dioxane (BND) + 0.010% 2 methyl-2H-isothiazol-3-one (o MIT)

PROCEDIMENTO DE ENSAIO

Cada um corrido deve incluir uma curva padrão.

1. Fixe o número desejado de poços do Microtiter no suporte do quadro.

2. Dispense o µL 10 de cada padrão, controle e amostras com pontas descartáveis novas em poços apropriados.

3. Incube por 5 minutos na temperatura ambiente (18 °C – °C) 25.

4. Dispense o conjugado da enzima de 100 µL em cada um bem.

Misture completamente por 10 segundos. É importante ter uma mistura completa nesta etapa.

5. Incube por 80 minutos na temperatura ambiente (18 °C – °C) 25.

6. Agite vivamente para fora os índices dos poços.

Enxágüe os poços 5 vezes com solução diluída da lavagem (µL 400 pelo poço). Golpeie os poços agudamente no papel absorvente para remover as gotas residuais.

Nota importante:

A sensibilidade e a precisão deste ensaio são influenciadas marcadamente pelo desempenho correto do procedimento de lavagem!

1. Adicione o µL 100 da solução da carcaça a cada um bem.

2. Incube por 10 minutos na temperatura ambiente (18 o °C – °C) 25 incube por 7 minutos na temperatura ambiente (°C 26 – o °C) 29 incuba por 5 minutos na temperatura ambiente (mais °C) de 29

3. Pare a reação enzimático adicionando 100 que o µL de para a solução a cada um bem.

4. Determine a absorvência (OD) de cada um bem 450 no ± 10 nanômetro com um leitor da placa de microtiter.

Recomenda-se que os poços estejam lidos dentro de 10 minutos após ter adicionado a solução da parada.