Antígeno diagnóstico veterinário Microplate revestido dos jogos da gripe das aves H9N1 para pessoal

Jogo do teste do anticorpo ELISA da gripe das aves H9N1 da precisão alta, 96wells/kit, uso profissional

1. resumo

A gripe das aves (gripe das aves, AI) é uma doença infecciosa da toxicidade venéreo aguda do contato contra a indústria doméstica das aves domésticas presentemente. A vacinação é a maioria de modo eficaz impedi-lo e controlar, o nível do anticorpo depois que imune reflete o efeito vacinal, que se relacionou diretamente à resistência imune ao vírus de gripe das aves em rebanhos da galinha.

Este produto é aplicável à espécie diferente, idade diferente na detecção específica do anticorpo do soro da galinha de H9N1. Pode ser usado pelo tempo imune vacinal do vírus H9N1 da análise, avaliação do efeito imune, galinhas com o H9N1 no estado imune.

2. princípio

O jogo é baseado em um immunoassay enzimático indireto (ELISA indireto). O antígeno é revestido em placas. Quando um soro da amostra contém anticorpos específicos contra o vírus, ligarão ao antígeno em placas. Lave os anticorpos desatados e outros componentes. Adicione então um conjugado específico da enzima. Após a incubação e a lavagem, adicione a carcaça de TMB. Uma reação colorimetric aparecerá, medido por um espectrofotômetro (450 nanômetro).

3. componentes

4. Preparação da amostra

1) Tome o sangue inteiro animal, obtenha o soro pelo método regular, a necessidade do soro de ser claro, nenhuma hemólise, nenhuma poluição. Para o armazenamento a curto prazo, a amostra pode armazenar em 2~8℃, para o armazenamento a longo prazo, em -20℃.

2) Soro diluído com diluente da amostra em 100 vezes (como adicione o soro 2μl no diluente, na agitação da amostra 198μl uniformemente). O controle positivo e o controle negativo não precisam diluído.

3) Retorne a solução de lavagem concentrada 20x na temperatura ambiente (aproximadamente 25℃) antes de usar, agite-a para dissolver o sal precipitado, a seguir dilua-o com a água destilada ou água deionized em 20 vezes.

5. Procedimento de teste

1) Retorne o jogo à temperatura ambiente para 30mins antes de usar.

2) Tome o microplate necessário da quantidade bem, ajuste 1 bem do controle vazio bem, 2 poços do controle negativo bem, 2 poços do controle positivo bem, sele a placa não utilizada, armazene-a em 2~8℃.

3) Adicione o diluente da amostra 100ul no controle vazio bem. Adicione o controle negativo ao controle negativo bem, 100μl/well, controle positivo ao controle positivo bem, 100μl/well; para a amostra bem, adicione o soro diluído 100μl/well;

4) Misture uniformemente, incubação no ℃ 37 por 30 minutos.

5) Rejeite o líquido dos poços e encha todos os poços com a solução de lavagem, incube-os para 30s e rejeite-os. Repita o procedimento de lavagem 5 vezes tão acima, pancadinha secar.

6) Adicione o conjugado da enzima ao cada bem, 100μl/well. (Exceto o poço do controle vazio)

7) Incubação no ℃ 37 por 30 minutos.

8) Lavagem como a etapa 5).

9) Adicione a carcaça A 50μl/well, a seguir a carcaça B 50μl/well, mistura uniformemente, incubação no ℃ 37 na obscuridade por 10 minutos.

10) Adicione param a solução 50μl/well, misturam-na uniformemente, usam-nos o leitor de ELISA para medir o valor de A em 450nm (630nm como a referência) de cada um bem.

6. Resultados

1) Poço negativo do controle: No normal, valor de A do poço negativo ≤0.20 do controle;

2) Poço positivo do controle: No normal, valor de A do poço positivo ≥0.60 do controle;

3) Cálculo de valor de C.O: C.O= 0,13 + meio do poço negativo do controle (calcule como 0,07 quando o meio do poço negativo do controle é mais baixo de 0,07)

4) Juiz do resultado:

Quando a amostra A₄₅₀ ≥C.O, o resultado for positiva;

Quando A450

7. Limitação

O jogo pode somente detectar o anticorpo de H9N1 IgG no soro ou no plasma da galinha qualitativamente. Faça a avaliação bruta forte, média e fraca do nível do anticorpo baseado no valor de A.

8. Notas

1) Vista luvas e roupa de trabalho quando opere, restritamente soe e execute o sistema da desinfecção e do isolamento.

2) A solução da parada é corrosiva, evita a pele do toque e a roupa, lavagem com água da torneira se tocada.

3) Microplate removeu do ambiente refrigerado deve ser equilíbrio a secar na temperatura ambiente, e sela o microplate não utilizado com dessecativo.

4) A solução da lavagem é cristalizada facilmente na baixa temperatura, para ser retornada à temperatura ambiente quando usada para dissolver-se.

5) Adicione a solução de lavagem a cada um poço inteiramente, para impedir livre a enzima do orifício, que não pode ser lavada

6) A amostra do teste deve ser fresca.

7) A determinação dos resultados da análise deve ser baseada no leitor de ELISA.

8) Nunca misture reagentes dos grupos diferentes.