Cabra do teste do jogo de TriiodothyronineT3 Elisa - anti - Microtiter revestido Wells do anticorpo do rato

Teste de TriiodothyronineT3 ELISA, preciso alta, método do sanduíche de Elisa, para a medida quantitativa

Nome do produto: Teste de TriiodothyronineT3 ELISA

Uso pretendido:

Este T3 total a AIA é pretendido para a determinaço quantitativa da concentraço de (T3) do triiodothyronine no soro humano. Este teste é útil no diagnóstico e no tratamento de doenças de tiroide tais como o hipertireoidismo.

Sumário:

A medida da concentraço do triiodthyronine do soro é considerada geralmente como uma ferramenta valiosa no diagnóstico da deficiência orgnica do tiroide. Esta importncia forneceu o ímpeto para a melhoria significativa na metodologia do ensaio que ocorreu nas últimas duas décadas. O advento do antissoro monospecific e da descoberta de agentes de obstruço s proteínas de soro T3 obrigatórias permitiu o desenvolvimento de radioimmunoassays processualmente simples

Princípio de teste:

O jogo total de Triiodthyronine (T3) ELISA é um ensaio enzima-ligado da imunoabsorço da fase contínua (ELISA) baseado no princípio de emperramento competitivo. Os poços do microtiter so revestidos com um anticorpo polyclonal do cabra-anti-rato. Os padrões, os controles e o soro paciente incubam junto com o reagente do ensaio que contém os anticorpos anti-T3 monoclonais. Na seguinte incubaço com conjugado o T3 endógeno de uma amostra paciente compete com o conjugado da peroxidase de T3-horseradish para um número limitado de locais obrigatórios insolubilized. Após a incubaço o conjugado desatado é lavado fora. A quantidade de conjugado encadernado da peroxidase é inversamente proporcional concentraço de T3 na amostra. Após a adiço da soluço da carcaça, a intensidade da cor desenvolvida é inversamente proporcional concentraço de T3 na amostra paciente.

Componentes do jogo

1. Microtiterwells, 12 x 8 (quebre distante) tiras, 96 poços; Wells revestiu com o ON treponema - antígeno pallidum. (incluindo 1 suporte da tira e 1 folha da tampa)
2. *** De Posiço Controle, 1 tubo de ensaio, 1,0 mL, pronto para uso; colorido tampo amarelo, vermelho.
3. Negativo. Controle o ***, 1 tubo de ensaio, 2,0 mL, pronto para uso; colorido tampo amarelo, amarelo.
4. *** Do controle da interrupço, 1 tubo de ensaio, 1,0 mL, pronto para uso; colorido tampo amarelo, preto.
5. Conjugado da enzima **, 1 tubo de ensaio, 13 mL, pronto para uso,
6. Soluço da carcaça, 1 tubo de ensaio, 14 mL, pronto para uso, Tetramethylbenzidine (TMB).
7. Pare a soluço, 1 tubo de ensaio, 14 mL, pronto para uso, contenha 0,2 mol/l H2SO4, evitem o contato com a soluço da parada. Pode causar irritações e queimaduras de pele.
8. Soluço da lavagem *, 1 tubo de ensaio, 30 mL (20X concentrado para 600 mL), ± 0,2 do pH 7,2 vê a preparaço do „dos reagentes “.

* contém 0.03% ProClin 300

** contém 0.03% ProClin sulfato da gentamicina de 300 + de 0.01%

o *** contém 0.03% ProClin 300 + 0.015% 5 bromo-5-nitro-1,3-dioxane (BND) + 0.010% 2 methyl-2H-isothiazol-3-one (o MIT)

PROCEDIMENTO DE ENSAIO

1. Fixe o número desejado de poços do Microtiter no suporte do quadro.

2. Dispense o µL 10 de cada padro, controle e amostras com pontas descartáveis novas em poços apropriados.

3. Incube por 5 minutos na temperatura ambiente (18 °C – °C) 25.

4. Dispense o conjugado da enzima de 100 µL em cada um bem.

Misture completamente por 10 segundos. É importante ter uma mistura completa nesta etapa.

5. Incube por 80 minutos na temperatura ambiente (18 °C – °C) 25.

6. Agite vivamente para fora os índices dos poços.

Enxáge os poços 5 vezes com soluço diluída da lavagem (µL 400 pelo poço). Golpeie os poços agudamente no papel absorvente para remover as gotas residuais.

CARACTERÍSTICAS DE DESEMPENHO

1. sensibilidade

A sensibilidade deste teste total do T3 a AIA é definida como a mais baixa concentraço de T3 que pode ser distinta de 0 ng/mL como calculado dos limites de confiança de 95% das 0 absorvências do padro de ng/mL. Este método detectará confiantemente as concentrações T3 to baixas quanto 0,2 ng/ml.

2. preciso

a. Preciso do Intra-ensaio

a preciso da Dentro-corrida foi determinada por determinações replicate de três soros diferentes do controle em 1 ensaio.

b. Preciso do Inter-ensaio

a preciso da Entre-corrida foi determinada por medidas replicate de três amostras diferentes do soro sobre uma série de ensaios individualmente calibrados.

3. estudos da recuperaço e das linearidades

a. Recuperaço

As várias amostras pacientes do soro dos níveis T3 conhecidos foram combinadas e analisadas em duplicado. A recuperaço média era 106%.

Recuperaço média #2 = 111%

1. Linearidades

Duas amostras foram diluídas em série com o padro T3 zero para determinar linearidades. A recuperaço média era 99%.

Média = 101%

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