Antígeno diagnóstico veterinário Microplate revestido dos jogos da gripe das aves H9N1 para pessoal

Jogo do teste do anticorpo ELISA da gripe das aves H9N1 da preciso alta, 96wells/kit, uso profissional

1. resumo

A gripe das aves (gripe das aves, AI) é uma doença infecciosa da toxicidade venéreo aguda do contato contra a indústria doméstica das aves domésticas presentemente. A vacinaço é a maioria de modo eficaz impedi-lo e controlar, o nível do anticorpo depois que imune reflete o efeito vacinal, que se relacionou diretamente resistência imune ao vírus de gripe das aves em rebanhos da galinha.

Este produto é aplicável espécie diferente, idade diferente na detecço específica do anticorpo do soro da galinha de H9N1. Pode ser usado pelo tempo imune vacinal do vírus H9N1 da análise, avaliaço do efeito imune, galinhas com o H9N1 no estado imune.

2. princípio

O jogo é baseado em um immunoassay enzimático indireto (ELISA indireto). O antígeno é revestido em placas. Quando um soro da amostra contém anticorpos específicos contra o vírus, ligaro ao antígeno em placas. Lave os anticorpos desatados e outros componentes. Adicione ento um conjugado específico da enzima. Após a incubaço e a lavagem, adicione a carcaça de TMB. Uma reaço colorimetric aparecerá, medido por um espectrofotômetro (450 nanômetro).

3. componentes

4. Preparaço da amostra

1) Tome o sangue inteiro animal, obtenha o soro pelo método regular, a necessidade do soro de ser claro, nenhuma hemólise, nenhuma poluiço. Para o armazenamento a curto prazo, a amostra pode armazenar em 2~8℃, para o armazenamento a longo prazo, em -20℃.

2) Soro diluído com diluente da amostra em 100 vezes (como adicione o soro 2μl no diluente, na agitaço da amostra 198μl uniformemente). O controle positivo e o controle negativo no precisam diluído.

3) Retorne a soluço de lavagem concentrada 20x na temperatura ambiente (aproximadamente 25℃) antes de usar, agite-a para dissolver o sal precipitado, a seguir dilua-o com a água destilada ou água deionized em 20 vezes.

5. Procedimento de teste

1) Retorne o jogo temperatura ambiente para 30mins antes de usar.

2) Tome o microplate necessário da quantidade bem, ajuste 1 bem do controle vazio bem, 2 poços do controle negativo bem, 2 poços do controle positivo bem, sele a placa no utilizada, armazene-a em 2~8℃.

3) Adicione o diluente da amostra 100ul no controle vazio bem. Adicione o controle negativo ao controle negativo bem, 100μl/well, controle positivo ao controle positivo bem, 100μl/well; para a amostra bem, adicione o soro diluído 100μl/well;

4) Misture uniformemente, incubaço no ℃ 37 por 30 minutos.

5) Rejeite o líquido dos poços e encha todos os poços com a soluço de lavagem, incube-os para 30s e rejeite-os. Repita o procedimento de lavagem 5 vezes to acima, pancadinha secar.

6) Adicione o conjugado da enzima ao cada bem, 100μl/well. (Exceto o poço do controle vazio)

7) Incubaço no ℃ 37 por 30 minutos.

8) Lavagem como a etapa 5).

9) Adicione a carcaça A 50μl/well, a seguir a carcaça B 50μl/well, mistura uniformemente, incubaço no ℃ 37 na obscuridade por 10 minutos.

10) Adicione param a soluço 50μl/well, misturam-na uniformemente, usam-nos o leitor de ELISA para medir o valor de A em 450nm (630nm como a referência) de cada um bem.

6. Resultados

1) Poço negativo do controle: No normal, valor de A do poço negativo ≤0.20 do controle;

2) Poço positivo do controle: No normal, valor de A do poço positivo ≥0.60 do controle;

3) Cálculo de valor de C.O: C.O= 0,13 + meio do poço negativo do controle (calcule como 0,07 quando o meio do poço negativo do controle é mais baixo de 0,07)

4) Juiz do resultado:

Quando a amostra A₄₅₀ ≥C.O, o resultado for positiva;

Quando A450

7. Limitaço

O jogo pode somente detectar o anticorpo de H9N1 IgG no soro ou no plasma da galinha qualitativamente. Faça a avaliaço bruta forte, média e fraca do nível do anticorpo baseado no valor de A.

8. Notas

1) Vista luvas e roupa de trabalho quando opere, restritamente soe e execute o sistema da desinfecço e do isolamento.

2) A soluço da parada é corrosiva, evita a pele do toque e a roupa, lavagem com água da torneira se tocada.

3) Microplate removeu do ambiente refrigerado deve ser equilíbrio a secar na temperatura ambiente, e sela o microplate no utilizado com dessecativo.

4) A soluço da lavagem é cristalizada facilmente na baixa temperatura, para ser retornada temperatura ambiente quando usada para dissolver-se.

5) Adicione a soluço de lavagem a cada um poço inteiramente, para impedir livre a enzima do orifício, que no pode ser lavada

6) A amostra do teste deve ser fresca.

7) A determinaço dos resultados da análise deve ser baseada no leitor de ELISA.

8) Nunca misture reagentes dos grupos diferentes.

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