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Jogo do teste do anticorpo ELISA da gripe das aves da preciso alta (H5N1), 96wells/kit, uso profissional
1. Sumário
Este antígeno da fase contínua do uso AIV H5N1 do jogo para detectar o anticorpo específico contra o antígeno de AIV H5N1, tem a sensibilidade alta, especificidade, reprodutibilidade, e é fácil de operar rapidamente e pode ser usado dividually em épocas múltiplas.
2. Reagentes e índices
1 | Placa revestida do antígeno H5N1 | 96T×1 |
2 | H5N1-Ab conjugado enzima (soluço No.1) | 6 ml×1 |
3 | Soluço de lavagem (soluço No.2) | 50ml×1 |
4 | Carcaça A (soluço No.3) | 6 ml×1 |
5 | Carcaça B (soluço No.4) | 6 ml×1 |
6 | Diluente da amostra (soluço No.5) | 50 ml×1 |
7 | Pare a soluço (a soluço No.6) da reaço | 6 ml×1 |
8 | Controle positivo H5N1-Ab | 0,8 ml×1 |
9 | Controle negativo H5N1-Ab | 0,8 ml×1 |
10 | Folha adesiva | 2 partes |
11 | Saco selado | 1 parte |
12 | Instruço | 1 parte |
3. materiais exigidos mas no fornecidos
1 leitor de Microplate (que inclui o comprimento de onda 450nm/630 nanômetro).
caixa da temperatura 2 37℃ constante
3 Micropipettes, ajustáveis.
4. exigência da amostra
1. As amostras so soro, tempo de armazenamento devem realizar-se por 7 dias no ℃ 2-8, se para o prazo, deve ser mantido em -20℃ ou abaixo dele. Avoid repetiu a congelaço e thawing.
2. Evite para usar as amostras que contêm o azotureto do sódio, elevaço - colesterol, com bactérias e o hemolytic severo
5. procedimento de teste
1. Preparaço de lavagem da soluço
A soluço de lavagem (soluço No.2) Dilute com água destilada ou água deionized no 1:10, por exemplo adiciona a água destilada 900ml ou a água deionized na soluço de lavagem de 100 ml, e mistura-os completamente.
2. Diluente da amostra:
Dilua a amostra do soro com o diluente da amostra (soluço No.5) no 1:100, por exemplo o soro de 5 μl + diluente da amostra de 495 μl, mistura completamente.
3. Adicionando amostras e controles
Para cada teste, ajuste 2 poços para o controle negativo, 2 poços para o controle positivo. Adicione o controle negativo, controle positivo respectivamente, 100μl/well. Ajuste um controle vazio bem, no adicione nada. Para a amostra bem, adicione a amostra diluída do soro, 100μl/well. Incubaço no ℃ 37 na obscuridade por 30 minutos. Rejeite o líquido dos poços e encha todos os poços com a soluço de lavagem diluída, incube-os para 1 minuto e descarte. Repita o procedimento de lavagem 3 vezes to acima. No fim da etapa de lavagem, remova com cuidado permanecer fluido batendo as tiras no lenço de papel antes do passo seguinte.
4. Adicionando o conjugado da enzima
Independentemente do controle vazio bem, adicione o conjugado da enzima 100ul (soluço No.1) em todos os poços e incube-o no ℃ 37 na obscuridade por 30 minutos. Rejeite o líquido dos poços e lave 3 vezes como descrito em etapa 3.
5. Adicionando carcaças
A carcaça A da mistura (soluço No.3) e a carcaça B (soluço No.4) em volumes iguais, adicionam no cada bem, 100μl/well, incubam em uma obscuridade de 37 ℃ por 10 minutos.
6. Adicione uma gota de param a soluço (soluço No.6) da reaço em todos os poços. Antes de ler resulta com o leitor da placa de microtiter de ELISA, ajustam o poço A1 da placa do reagente a zero. Meça o valor do OD de todos os poços em 450 nanômetro (comprimento de onda da referência: 630 nanômetro).
6. Referência
Juiz da validaço
Valor do OD do poço negativo ≤0.15 do controle (inválido se > 0,15);
Valor do OD do poço positivo ≥0.30 do controle (inválido se <
0="">
7. Interpretaço dos resultados
Valor do OD do valor do OD do ≥ da amostra do meio positivo X 1,1 do controle: Positivo do anticorpo H5N1;
Valor do OD do valor da amostra <OD do meio positivo X 0,9 do controle: Negativo do anticorpo H5N1;
Valor do OD do meio positivo X 0,9 do controle < OD="" value="" of="" sample="">
Valor do OD do valor da reviso ≤OD da amostra do meio positivo X 1,1 do controle: Negativo do anticorpo H5N1
8. Limitaço
Este jogo é somente apropriado para o soro de teste da galinha.
9. Notas
1) Microwell deve ser selado e umidade-prova. A placa de MicroWell removida do ambiente refrigerado deve ser umidade equilibrada a secar na temperatura ambiente, a seguir pode ser aberta. Placa no utilizada para trás posta de MicroWell no saco seco da folha e selada no ℃ 4.
2) Antes de deixar cair o reagente, a garrafa deixando cair da agitaço delicadamente a mesmo, rejeita a primeira gota; Mantenha a verticalidade da garrafa deixando cair ao adicionar reagentes.
3) Cubra a diferença firmemente após a utilizaço todas as vezes. No misture usando o tampo. No use reagentes do lote diferente.
4) Trate os jogos e os reagentes usados como o material da poluiço. A soluço da parada é corrosiva, seja cuidadosa usar-se.
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