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Do Microtubule humano do MAPA do jogo de MARK4 ELISA jogo deregulamento personalizado do ensaio da quinase 4 ELISA
Cat.No E6736Hu
Escala padro da curva: 20ng/L - 6000ng/L
Sensibilidade: 14.22ng/L
Precauções
o produto dos *This é para o uso da pesquisa somente, no para o uso em procedimentos do diagnóstico. É recomenda altamente ler inteiramente antes de usar esta instruço.
Preparaço do reagente
Todos os reagentes devem ser trazidos temperatura ambiente antes de usar.
O padro reconstitui o 120μl do padro (6400ng/L) com o 120μl do diluente padro para gerar uma soluço 3200ng/L conservada em estoque padro. Permita que o padro sente-se por 15 minutos com agitaço delicada antes de fazer diluições. Prepare pontos padro duplicados em série diluindo a soluço conservada em estoque padro (3200ng/L) 1:2 com o diluente padro para produzir as soluções 1600ng/L, 800ng/L, 400ng/L e 200ng/L. O diluente padro serve como o padro zero (0 ng/L). Toda a soluço restante deve ser congelada em -20°C e ser usada dentro de um mês. A diluiço das soluções padro sugeridas é como segue:
3200ng/L | Padro No.5 | diluente original do padro 120μl + do padro 120μl |
1600ng/L | Padro No.4 | padro 120μl diluente do padro No.5 + 120μl |
800ng/L | Padro No.3 | padro 120μl diluente do padro No.4 + 120μl |
400ng/L | Padro No.2 | padro 120μl diluente do padro No.3 + 120μl |
200ng/L | Padro No.1 | padro 120μl diluente do padro No.2 + 120μl |
Concentraço padro | Padro No.5 | Padro No.4 | Padro No.3 | Padro No.2 | Padro No.1 |
6400ng/L | 3200ng/L | 1600ng/L | 800ng/L | 400ng/L | 200ng/L |
Amortecedor 20ml diluído da lavagem do concentrado 25x do amortecedor da lavagem no deionized ou água destilada para render 500 ml do amortecedor da lavagem 1x. Se os cristais formaram no concentrado, mistura delicadamente até que os cristais se dissolverem completamente.
Uso pretendido
Este jogo do sanduíche é para a detecço quantitativa exata da quinase deregulamento humana 4 de MAP/Microtubule (igualmente conhecida como MARK4) no soro, plasma, supernates da cultura celular, lysates da pilha, homogenates do tecido.
Princípio do ensaio
Este jogo do teste do elisa é um ensaio Enzima-ligado da imunoabsorço (ELISA). A placa foi pré-revestida com o anticorpo MARK4 humano. MARK4 apresentam na amostra so adicionados e ligam aos anticorpos revestidos nos poços. E o anticorpo MARK4 humano ento biotinylated é adicionado e liga a MARK4 na amostra. Ento Streptavidin-HRP é adicionado e liga ao anticorpo de Biotinylated MARK4. Após a incubaço Streptavidin-HRP desatado é lavado afastado durante uma etapa de lavagem. A soluço da carcaça é adicionada ento e a cor torna-se em proporço quantidade de MARK4 humano. A reaço é terminada pela adiço de ácido para a soluço e a absorvência é medida em 450 nanômetro.
Sumário
1. Prepare todos os reagentes, amostras e padrões.
2. Adicione a amostra e o reagente de ELISA em cada um bem. Incube para 1 hora em 37°C.
3. Lave a placa 5 vezes.
4. Adicione a soluço A e B. Incubaço da carcaça por 10 minutos em 37°C.
5. Adicione param a soluço e a cor torna-se.
6. Leia o valor do OD dentro de 10 minutos.
Cálculo de resultado
Construa uma curva padro traçando o OD médio para cada padro no vertical (Y) linha central contra a concentraço no horizontal (X) a linha central e tira uma melhor curva do ajuste através dos pontos no gráfico. Estes cálculos podem melhor ser executados com o software por computador do curva-encaixe e a melhor linha do ajuste pode ser determinada pela análise de regresso.