Interleukin 1 do laboratório beta/jogo do IL 1 beta ELISA CE/aprovação do ISO/MSDS

Número de modelo:Cat.No E0197Bo
Lugar de origem:Xangai, China.
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Interleukin bovino 1 beta (IL-1 beta) jogo de ELISA
Cat.No E0197Bo
Escala padro da curva: 0.5ng/L - 200ng/L
Sensibilidade: 0.25ng/L
Tamanho: 96 poços
Armazenamento: Armazene os reagentes em 2-8°C. para um armazenamento de mais de 6 meses referem a data de validade mantêm-no em ciclos repetidos Avoid da aproximaço amigável de -20°C. Se os reagentes individuais so abertos recomenda-se que o jogo esteja usado dentro de 1 mês.
* este produto é para o uso da pesquisa somente, no para o uso em procedimentos do diagnóstico. É recomenda altamente ler inteiramente antes de usar esta instruço.
 
Uso pretendido
Este jogo do sanduíche é para a detecço quantitativa exata do Interleukin bovino 1 beta (igualmente sabido como IL-1B) no soro, plasma, supernates da cultura celular, lysates da pilha, homogenates do tecido.
 
Princípio do ensaio
Este jogo é um ensaio Enzima-ligado da imunoabsorço (ELISA). A placa foi pré-revestida com o anticorpo bovino de IL-1B. IL-1B apresentam na amostra so adicionados e ligam aos anticorpos revestidos nos poços. E o anticorpo bovino ento biotinylated de IL-1B é adicionado e liga a IL-1B na amostra. Ento Streptavidin-HRP é adicionado e liga ao Biotinylated IL-1Bantibody. Após a incubaço Streptavidin-HRP desatado é lavado afastado durante uma etapa de lavagem. A soluço da carcaça é adicionada ento e a cor torna-se em proporço quantidade de IL-1B bovino. A reaço é terminada pela adiço de ácido para a soluço e a absorvência é medida em 450 nanômetro.
 
Reagente fornecido

ComponentesQuantidade
Soluço padro (240ng/L)0.5ml x1
Placa pré-revestida de ELISA12 * 8 tiras boas x1
Diluente padro3ml x1
Streptavidin-HRP6ml x1
Pare a soluço6ml x1
Soluço A da carcaça6ml x1
Soluço B da carcaça6ml x1
Concentrado do amortecedor da lavagem (30x)20ml x1
Anticorpo bovino de Biotinylated IL-1B1ml x1
Instruço do usuário1
Aferidor da placapics 2
Saco do zíper1 PIC

 
Coleço de espécime
O soro permite que o soro coagule por 10-20 minutos na temperatura ambiente. Centrifugador em 2000-3000 RPM por 20 minutos.
 
O plasma recolhe o plasma usando o EDTA ou a heparina como um anticoagulante. Centrifugue amostras por 15 minutos em 2000-3000 RPM em 2 - 8°C dentro de 30 minutos da coleço.
 
A urina recolhe pelo tubo estéril. Centrifugador em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Ao recolher o líquido fluido e cerebrospinal pleuroperitoneal, siga por favor os procedimentos acima mencionados.
 
O Supernatant da cultura celular recolhe pelos tubos estéreis ao examinar segregue componentes. Centrifugue em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Recolha os supernatants com cuidado. Ao examinar os componentes dentro da pilha, use PBS (pH 7.2-7.4) para diluir a suspenso da pilha concentraço da pilha de aproximadamente 1 million/ml. Danifique pilhas através dos ciclos repetidos da gelo-aproximaço amigável para deixar para fora os componentes internos. Centrifugue em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.
 
Tecidos da lavagem do tecido em PBS (pH 7,4) para remover completamente o sangue adicional e a pesá-lo antes da homogeneizaço. Triture tecidos e homogeneize-os em PBS (pH7.4) com um homogenizador de vidro no gelo. Aproximaço amigável em 2-8°C ou gelo no centrifugador de -20°C. em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.
 
Preparaço do reagente
Todos os reagentes devem ser trazidos temperatura ambiente antes de usar.
O padro reconstitui o 120μl do padro (240ng/L) com o 120μl do diluente padro para gerar uma soluço 120ng/L conservada em estoque padro. Permita que o padro sente-se por 15 minutos com agitaço delicada antes de fazer diluições. Prepare pontos padro duplicados em série diluindo a soluço conservada em estoque padro (120ng/L) 1:2 com o diluente padro para produzir as soluções 60ng/L, 30ng/L, 15ng/L e 7.5ng/L. O diluente padro serve como o padro zero (0 ng/L). Toda a soluço restante deve ser congelada em -20°C e ser usada dentro de um mês. A diluiço das soluções padro sugeridas é como segue:
 

120ng/LPadro No.5diluente original do padro 120μl + do padro 120μl
60ng/LPadro No.4padro 120μl diluente do padro No.5 + 120μl
30ng/LPadro No.3padro 120μl diluente do padro No.4 + 120μl
15ng/LPadro No.2padro 120μl diluente do padro No.3 + 120μl
7.5ng/LPadro No.1padro 120μl diluente do padro No.2 + 120μl

 

Concentraço padroPadro No.5Padro No.4Padro No.3Padro No.2Padro No.1
240ng/L120ng/L60ng/L30ng/L15ng/L7.5ng/L

 
Amortecedor 20ml diluído da lavagem do concentrado 30x do amortecedor da lavagem no deionized ou água destilada para render 500 ml do amortecedor da lavagem 1x. Se os cristais formaram no concentrado, mistura delicadamente até que os cristais se dissolverem completamente.
 
Referências
Dos “rede imune veterinária do reagente E.U.: sequências bovinas expressadas do gene.”
U.S. Rede imune veterinária Hudgens T. do reagenteTompkins D.Baldwin C.L.
Submetido (NOV-2007) aos bases de dados de EMBL/GenBank/DDBJ
 
 

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Interleukin 1 do laboratório beta/jogo do IL 1 beta ELISA CE/aprovação do ISO/MSDS

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