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Interleukin bovino 1 beta (IL-1 beta) jogo de ELISA
Cat.No E0197Bo
Escala padro da curva: 0.5ng/L - 200ng/L
Sensibilidade: 0.25ng/L
Tamanho: 96 poços
Armazenamento: Armazene os reagentes em 2-8°C. para um armazenamento de mais de
6 meses referem a data de validade mantêm-no em ciclos repetidos
Avoid da aproximaço amigável de -20°C. Se os reagentes individuais
so abertos recomenda-se que o jogo esteja usado dentro de 1 mês.
* este produto é para o uso da pesquisa somente, no para o uso em
procedimentos do diagnóstico. É recomenda altamente ler
inteiramente antes de usar esta instruço.
Uso pretendido
Este jogo do sanduíche é para a detecço quantitativa exata do
Interleukin bovino 1 beta (igualmente sabido como IL-1B) no soro,
plasma, supernates da cultura celular, lysates da pilha,
homogenates do tecido.
Princípio do ensaio
Este jogo é um ensaio Enzima-ligado da imunoabsorço (ELISA). A
placa foi pré-revestida com o anticorpo bovino de IL-1B. IL-1B
apresentam na amostra so adicionados e ligam aos anticorpos
revestidos nos poços. E o anticorpo bovino ento biotinylated de
IL-1B é adicionado e liga a IL-1B na amostra. Ento Streptavidin-HRP
é adicionado e liga ao Biotinylated IL-1Bantibody. Após a incubaço
Streptavidin-HRP desatado é lavado afastado durante uma etapa de
lavagem. A soluço da carcaça é adicionada ento e a cor torna-se em
proporço quantidade de IL-1B bovino. A reaço é terminada pela adiço
de ácido para a soluço e a absorvência é medida em 450 nanômetro.
Reagente fornecido
Componentes | Quantidade |
Soluço padro (240ng/L) | 0.5ml x1 |
Placa pré-revestida de ELISA | 12 * 8 tiras boas x1 |
Diluente padro | 3ml x1 |
Streptavidin-HRP | 6ml x1 |
Pare a soluço | 6ml x1 |
Soluço A da carcaça | 6ml x1 |
Soluço B da carcaça | 6ml x1 |
Concentrado do amortecedor da lavagem (30x) | 20ml x1 |
Anticorpo bovino de Biotinylated IL-1B | 1ml x1 |
Instruço do usuário | 1 |
Aferidor da placa | pics 2 |
Saco do zíper | 1 PIC |
Coleço de espécime
O soro permite que o soro coagule por 10-20 minutos na temperatura
ambiente. Centrifugador em 2000-3000 RPM por 20 minutos.
O plasma recolhe o plasma usando o EDTA ou a heparina como um
anticoagulante. Centrifugue amostras por 15 minutos em 2000-3000
RPM em 2 - 8°C dentro de 30 minutos da coleço.
A urina recolhe pelo tubo estéril. Centrifugador em 2000-3000 RPM por
aproximadamente 20 minutos. Ao recolher o líquido fluido e
cerebrospinal pleuroperitoneal, siga por favor os procedimentos
acima mencionados.
O Supernatant da cultura celular recolhe pelos tubos estéreis ao examinar segregue componentes.
Centrifugue em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.
Recolha os supernatants com cuidado. Ao examinar os componentes
dentro da pilha, use PBS (pH 7.2-7.4) para diluir a suspenso da
pilha concentraço da pilha de aproximadamente 1 million/ml.
Danifique pilhas através dos ciclos repetidos da gelo-aproximaço
amigável para deixar para fora os componentes internos. Centrifugue
em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.
Tecidos da lavagem do tecido em PBS (pH 7,4) para remover completamente o sangue adicional e a
pesá-lo antes da homogeneizaço. Triture tecidos e homogeneize-os em
PBS (pH7.4) com um homogenizador de vidro no gelo. Aproximaço
amigável em 2-8°C ou gelo no centrifugador de -20°C. em 2000-3000
RPM por aproximadamente 20 minutos.
Preparaço do reagente
Todos os reagentes devem ser trazidos temperatura ambiente antes de
usar.
O padro reconstitui o 120μl do padro (240ng/L) com o 120μl do diluente
padro para gerar uma soluço 120ng/L conservada em estoque padro.
Permita que o padro sente-se por 15 minutos com agitaço delicada
antes de fazer diluições. Prepare pontos padro duplicados em série
diluindo a soluço conservada em estoque padro (120ng/L) 1:2 com o
diluente padro para produzir as soluções 60ng/L, 30ng/L, 15ng/L e
7.5ng/L. O diluente padro serve como o padro zero (0 ng/L). Toda a
soluço restante deve ser congelada em -20°C e ser usada dentro de
um mês. A diluiço das soluções padro sugeridas é como segue:
120ng/L | Padro No.5 | diluente original do padro 120μl + do padro 120μl |
60ng/L | Padro No.4 | padro 120μl diluente do padro No.5 + 120μl |
30ng/L | Padro No.3 | padro 120μl diluente do padro No.4 + 120μl |
15ng/L | Padro No.2 | padro 120μl diluente do padro No.3 + 120μl |
7.5ng/L | Padro No.1 | padro 120μl diluente do padro No.2 + 120μl |
Concentraço padro | Padro No.5 | Padro No.4 | Padro No.3 | Padro No.2 | Padro No.1 |
240ng/L | 120ng/L | 60ng/L | 30ng/L | 15ng/L | 7.5ng/L |
Amortecedor 20ml diluído da lavagem do concentrado 30x do amortecedor da lavagem no deionized ou água
destilada para render 500 ml do amortecedor da lavagem 1x. Se os
cristais formaram no concentrado, mistura delicadamente até que os
cristais se dissolverem completamente.
Referências
Dos “rede imune veterinária do reagente E.U.: sequências bovinas
expressadas do gene.”
U.S. Rede imune veterinária Hudgens T. do reagente, Tompkins D., Baldwin C.L.
Submetido (NOV-2007) aos bases de dados de EMBL/GenBank/DDBJ