

Add to Cart
Jogo encalhado Anti-dobro do ADN DS-DNA ELISA do rato da elevada
preciso e da especificidade de 96 Wells
Cat.No E0139Mo
Escala padro da curva: 0.5ng/ml - 200ng/ml
Sensibilidade: 0.25ng/ml
Tamanho: 96 poços
o produto dos *This é para o uso da pesquisa somente, no para o uso
em procedimentos do diagnóstico. Itis recomenda altamente ler
inteiramente esta instruço antes do uso.
Preciso
A preciso do Intra-ensaio (preciso dentro de um ensaio) três
amostras de concentraço conhecida foi testada em uma placa para
avaliar a preciso do intra-ensaio.
A preciso do Inter-ensaio (preciso entre ensaios) três amostras de
concentraço conhecida foi testada em ensaios separados para avaliar
a preciso do inter-ensaio.
CV (%) = SD/mean x 100
Intra-ensaio: CV<8>
Inter-ensaio: CV<10>
Princípio do ensaio
Este jogo é um ensaio Enzima-ligado da imunoabsorço (ELISA). A
placa foi pré-revestida com o anticorpo do rato DS-DNA. DS-DNA
apresentam na amostra so adicionados e ligam aos anticorpos
revestidos nos poços. E o anticorpo ento biotinylated do rato
DS-DNA é adicionado e liga a DS-DNA na amostra. Ento
Streptavidin-HRP é adicionado e liga ao Biotinylated
DS-DNAantibody. Após a incubaço Streptavidin-HRP desatado é lavado
afastado durante uma etapa de lavagem. A soluço da carcaça é
adicionada ento e a cor torna-se em proporço quantidade do rato
DS-DNA. A reaço é terminada pela adiço de ácido para a soluço e a
absorvência é medida em 450 nanômetro.
Reagente fornecido
Componentes | Quantidade |
Soluço padro (240ng/ml) | 0.5ml x1 |
Placa pré-revestida de ELISA | 12 * 8 tiras boas x1 |
Diluente padro | 3ml x1 |
Streptavidin-HRP | 6ml x1 |
Pare a soluço | 6ml x1 |
Soluço A da carcaça | 6ml x1 |
Soluço B da carcaça | 6ml x1 |
Concentrado do amortecedor da lavagem (30x) | 20ml x1 |
Anticorpo do rato DS-DNA de Biotinylated | 1ml x1 |
Instruço do usuário | 1 |
Aferidor da placa | pics 2 |
Saco do zíper | 1 PIC |
Material exigido mas no fornecido
Coleço de espécime
O soro permite que o soro coagule por 10-20 minutos na temperatura
ambiente. Centrifugador em 2000-3000 RPM por 20 minutos.
O plasma recolhe o plasma usando o EDTA ou a heparina como um
anticoagulante. Centrifugue amostras por 15 minutos em 2000-3000
RPM em 2 - 8°C dentro de 30 minutos da coleço.
A urina recolhe pelo tubo estéril. Centrifugador em 2000-3000 RPM por
aproximadamente 20 minutos. Ao recolher o líquido fluido e
cerebrospinal pleuroperitoneal, siga por favor os procedimentos
acima mencionados.
O Supernatant da cultura celular recolhe pelos tubos estéreis ao examinar segregue componentes.
Centrifugue em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.
Recolha os supernatants com cuidado. Ao examinar os componentes
dentro da pilha, use PBS (pH 7.2-7.4) para diluir a suspenso da
pilha concentraço da pilha de aproximadamente 1 million/ml.
Danifique pilhas através dos ciclos repetidos da gelo-aproximaço
amigável para deixar para fora os componentes internos. Centrifugue
em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.
Tecidos da lavagem do tecido em PBS (pH 7,4) para remover completamente o sangue adicional e a
pesá-lo antes da homogeneizaço. Triture tecidos e homogeneize-os em
PBS (pH7.4) com um homogenizador de vidro no gelo. Aproximaço
amigável em 2-8°C ou gelo no centrifugador de -20°C. em 2000-3000
RPM por aproximadamente 20 minutos.
o *Sample no pode ser diluído com este jogo. Devido o ao material
nós usamo-nos para preparar o jogo, a interferência de matriz da
amostra pode falsamente comprimir a especificidade e a preciso do
ensaio.
Procedimento de ensaio
1. Prepare todos os reagentes, soluções padro e amostras como
instruídas. Traga todos os reagentes temperatura ambiente antes de
usar. O ensaio é executado na temperatura ambiente.
2. Determine o número de tiras exigidas para o ensaio. Introduza as
tiras nos quadros para o uso. As tiras no utilizadas devem ser
armazenadas em 2-8°C.
3. Adicione o padro 50μl ao padro bem. Nota: No adicione o anticorpo ao padro bem porque a soluço padro
contém o anticorpo biotinylated.
4. Adicione a amostra 40μl aos poços da amostra e ento adicione o
anticorpo do anti-DS-ADN 10μl aos poços da amostra, a seguir adicione o streptavidin-HRP
50μl aos poços da amostra e aos poços padro (poço do controle no
vazio). Misture bem. Cubra a placa com um aferidor. Incube 60
minutos em 37°C.
5. Remova o aferidor e lave a placa 5 vezes com amortecedor da
lavagem. Embeba poços com pelo menos o amortecedor da lavagem de
0,35 ml para 30 segundos a 1 minuto para cada Washington. Para a
lavagem automatizada, aspire todos os poços e lave 5 vezes com o
amortecedor da lavagem, enchendo em demasia jorra com amortecedor
da lavagem. Borre a placa nas toalhas de papel ou no outro material
absorvente.
6. Adicione a soluço A da carcaça 50μl a cada um poço e adicione ento
a soluço B da carcaça 50μl a cada um bem. Incube a placa coberta
com um aferidor novo por 10 minutos em 37°C na obscuridade.
7. Adicione 50μl param a soluço a cada um bem, a cor azul mudará no
amarelo imediatamente.
8. Determine a densidade ótica (valor do OD) de cada um poço que usa
imediatamente um grupo do leitor do microplate a 450 nanômetro
dentro de 10 minuetos após ter adicionado a soluço da parada.
Sumário
1. Prepare todos os reagentes, amostras e padrões.
2. Adicione a amostra e o reagente de ELISA em cada um bem. Incube
para 1 hora em 37°C.
3. Lave a placa 5 vezes.
4. Adicione a soluço A e B. Incubaço da carcaça por 10 minutos em
37°C.
5. Adicione param a soluço e a cor torna-se.
6. Leia o valor do OD dentro de 10 minutos.
Cálculo de resultado
Construa uma curva padro traçando o OD médio para cada padro no
vertical (Y) linha central contra a concentraço no horizontal (X) a
linha central e tira uma melhor curva do ajuste através dos pontos
no gráfico. Estes cálculos podem melhor ser executados com o
software por computador do curva-encaixe e a melhor linha do ajuste
pode ser determinada pela análise de regresso.