Jogo de ELISA para a especificidade alta e a sensibilidade do CUME humano

Número de modelo:Cat.No E0813Hu
Lugar de origem:Xangai, China.
Quantidade de ordem mínima:negociação
Capacidade da fonte:Western union, T/T
Tempo de entrega:1-3 dias úteis, pedido em grandes quantidades dentro de uma semana
Detalhes de empacotamento:Envolvido com bloco de gelo e pacote do isopor
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Jogo de ELISA para a especificidade alta e a sensibilidade do CUME humano

 

Cat.No E0813Hu

Escala padro da curva: 2IU/L - 600IU/L

Sensibilidade: 1.12IU/L

 

Uso pretendido

Este jogo do sanduíche é para a detecço quantitativa exata de fosfatase alcalina humana (igualmente conhecida como o CUME) no soro, plasma, supernates da cultura celular, lysates da pilha, homogenates do tecido.

 

Princípio do ensaio

Este jogo é um ensaio Enzima-ligado da imunoabsorço (ELISA). A placa foi pré-revestida com o anticorpo humano do CUME. O CUME atual na amostra é adicionado e liga aos anticorpos revestidos nos poços. E o anticorpo humano ento biotinylated do CUME é adicionado e liga ao CUME na amostra. Ento Streptavidin-HRP é adicionado e liga ao anticorpo do CUME de Biotinylated. Após a incubaço Streptavidin-HRP desatado é lavado afastado durante uma etapa de lavagem. A soluço da carcaça é adicionada ento e a cor torna-se em proporço quantidade de CUME humano. A reaço é terminada pela adiço de ácido para a soluço e a absorvência é medida em 450 nanômetro.

 

Reagente fornecido

ComponentesQuantidade
Soluço padro (800IU/L)0.5ml x1
Placa pré-revestida de ELISA12 * 8 tiras boas x1
Diluente padro3ml x1
Streptavidin-HRP6ml x1
Pare a soluço6ml x1
Soluço A da carcaça6ml x1
Soluço B da carcaça6ml x1
Concentrado do amortecedor da lavagem (30x)20ml x1
Anticorpo humano do CUME de Biotinylated1ml x1
Instruço do usuário1
Aferidor da placapics 2
Saco do zíper1 PIC

 

Material exigido mas no fornecido

  • Incubadora 37°C±0.5°C
  • Papel absorvente
  • Pipeta da preciso e pontas descartáveis da pipeta
  • Limpe os tubos
  • Deionized ou água destilada
  • Leitor de Microplate com 450 o filtro do comprimento de onda do ± 10nm

 

Precauções

  • Antes do uso, o jogo e a amostra devem ser aquecidos naturalmente temperatura ambiente 30 minutos.
  • Esta instruço deve restritamente ser seguida na experiência.
  • Uma vez que o número desejado de tiras foi removido, reseal imediatamente o saco para proteger permanecer da deterioraço. Cubra todos os reagentes quando no no uso.
  • Make sure que introduz com pipeta a ordem e a taxa de adiço de bem-a-bem ao introduzir com pipeta reagentes.
  • A pipeta derruba e o aferidor da placa disposiço deve ser limpo e descartável para evitar a contaminaço colateral.
  • Evite usar os reagentes dos grupos diferentes junto.
  • A soluço B da carcaça é sensível luz, no expõe a soluço B da carcaça para iluminar-se por muito tempo.
  • Pare a soluço contém o ácido. Vista por favor a proteço do olho, da mo e de pele ao usar este material. Evite o contato da pele ou das mucosas com reagente do jogo.
  • O jogo no deve ser usado além da data de validade.

Preparaço do reagente

Todos os reagentes devem ser trazidos temperatura ambiente antes de usar.

O padro reconstitui o 120μl do padro (800IU/L) com o 120μl do diluente padro para gerar uma soluço 400IU/L conservada em estoque padro. Permita que o padro sente-se por 15 minutos com agitaço delicada antes de fazer diluições. Prepare pontos padro duplicados em série diluindo a soluço conservada em estoque padro (400IU/L) 1:2 com o diluente padro para produzir as soluções 200IU/L, 100IU/L, 50IU/L e 25IU/L. O diluente padro serve como o padro zero (0 IU/L). Toda a soluço restante deve ser congelada em -20°C e ser usada dentro de um mês. A diluiço das soluções padro sugeridas é como segue:

 

400IU/LPadro No.5diluente original do padro 120μl + do padro 120μl
200IU/LPadro No.4padro 120μl diluente do padro No.5 + 120μl
100IU/LPadro No.3padro 120μl diluente do padro No.4 + 120μl
50IU/LPadro No.2padro 120μl diluente do padro No.3 + 120μl
25IU/LPadro No.1padro 120μl diluente do padro No.2 + 120μl

 

Concentraço padroPadro No.5Padro No.4Padro No.3Padro No.2Padro No.1
800IU/L400IU/L200IU/L100IU/L50IU/L25IU/L

 

Amortecedor 20ml diluído da lavagem do concentrado 30x do amortecedor da lavagem no deionized ou água destilada para render 500 ml do amortecedor da lavagem 1x. Se os cristais formaram no concentrado, mistura delicadamente até que os cristais se dissolverem completamente.

 

Sumário

1. Prepare todos os reagentes, amostras e padrões.

2. Adicione a amostra e o reagente de ELISA em cada um bem. Incube para 1 hora em 37°C.

3. Lave a placa 5 vezes.

4. Adicione a soluço A e B. Incubaço da carcaça por 10 minutos em 37°C.

5. Adicione param a soluço e a cor torna-se.

6. Leia o valor do OD dentro de 10 minutos.

 

Cálculo de resultado

Construa uma curva padro traçando o OD médio para cada padro no vertical (Y) linha central contra a concentraço no horizontal (X) a linha central e tira uma melhor curva do ajuste através dos pontos no gráfico. Estes cálculos podem melhor ser executados com o software por computador do curva-encaixe e a melhor linha do ajuste pode ser determinada pela análise de regresso.

 
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Jogo de ELISA para a especificidade alta e a sensibilidade do CUME humano

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