Gato do jogo de Elisa do ser humano de 96 Wells nenhum E1055hu, 1.51pg/jogo de Pth Elisa sensibilidade do Ml

Número de modelo:Cat.No E1055Hu
Lugar de origem:Xangai, China.
Quantidade de ordem mínima:negociação
Capacidade da fonte:Western union, T/T
Tempo de entrega:1-3 dias úteis, pedido em grandes quantidades dentro de uma semana
Detalhes de empacotamento:Envolvido com bloco de gelo e pacote do isopor
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Detalhes do produto

Jogo humano 96 Wells da hormona PTH ELISA da paratireoide da elevada preciso e da sensibilidade
 

Cat.No E1055Hu

Escala padro da curva: 3pg/ml - 1000pg/ml

Sensibilidade: 1.51pg/ml

Tamanho: 96 poços

Armazenamento: Armazene os reagentes em 2-8°C. para um armazenamento de mais de 6 meses referem a data de validade mantêm-no em ciclos repetidos Avoid da aproximaço amigável de -20°C. Se os reagentes individuais so abertos recomenda-se que o jogo esteja usado dentro de 1 mês.

o produto dos *This é para o uso da pesquisa somente, no para o uso em procedimentos do diagnóstico. É recomenda altamente ler inteiramente antes de usar esta instruço.

 

Princípio do ensaio

Este jogo é um ensaio Enzima-ligado da imunoabsorço (ELISA). A placa foi pré-revestida com o anticorpo humano de PTH. PTH apresentam na amostra so adicionados e ligam aos anticorpos revestidos nos poços. E o anticorpo humano ento biotinylated de PTH é adicionado e liga a PTH na amostra. Ento Streptavidin-HRP é adicionado e liga ao anticorpo de Biotinylated PTH. Após a incubaço Streptavidin-HRP desatado é lavado afastado durante uma etapa de lavagem. A soluço da carcaça é adicionada ento e a cor torna-se em proporço quantidade de PTH humano. A reaço é terminada pela adiço de ácido para a soluço e a absorvência é medida em 450 nanômetro.

 

Reagente fornecido

ComponentesQuantidade
Soluço padro (1200pg/ml)0.5ml x1
Placa pré-revestida de ELISA12 * 8 tiras boas x1
Diluente padro3ml x1
Streptavidin-HRP6ml x1
Pare a soluço6ml x1
Soluço A da carcaça6ml x1
Soluço B da carcaça6ml x1
Concentrado do amortecedor da lavagem (30x)20ml x1
Anticorpo humano de Biotinylated PTH1ml x1
Instruço do usuário1
Aferidor da placapics 2
Saco do zíper1 PIC

 

Material exigido mas no fornecido

  • Incubadora 37°C±0.5°C
  • Papel absorvente
  • Pipeta da preciso e pontas descartáveis da pipeta
  • Limpe os tubos
  • Deionized ou água destilada
  • Leitor de Microplate com 450 o filtro do comprimento de onda do ± 10nm

 

Preparaço do reagente

Todos os reagentes devem ser trazidos temperatura ambiente antes de usar.

O padro reconstitui o 120μl do padro (1200pg/ml) com o 120μl do diluente padro para gerar uma soluço 600pg/ml conservada em estoque padro. Permita que o padro sente-se por 15 minutos com agitaço delicada antes de fazer diluições. Prepare pontos padro duplicados em série diluindo o 1:2 padro da soluço conservada em estoque (600pg/ml) com o diluente padro para produzir as soluções 300pg/ml, 150pg/ml, 75pg/ml e 37.5pg/ml. O diluente padro serve como o padro zero (0 pg/ml). Toda a soluço restante deve ser congelada em -20°C e ser usada dentro de um mês. A diluiço das soluções padro sugeridas é como segue:

 

600pg/mlPadro No.5diluente original do padro 120μl + do padro 120μl
300pg/mlPadro No.4padro 120μl diluente do padro No.5 + 120μl
150pg/mlPadro No.3padro 120μl diluente do padro No.4 + 120μl
75pg/mlPadro No.2padro 120μl diluente do padro No.3 + 120μl
37.5pg/mlPadro No.1padro 120μl diluente do padro No.2 + 120μl

 

Concentraço padroPadro No.5Padro No.4Padro No.3Padro No.2Padro No.1
1200pg/ml600pg/ml300pg/ml150pg/ml75pg/ml37.5pg/ml

 

Amortecedor 20ml diluído da lavagem do concentrado 30x do amortecedor da lavagem no deionized ou água destilada para render 500 ml do amortecedor da lavagem 1x. Se os cristais formaram no concentrado, mistura delicadamente até que os cristais se dissolverem completamente.

 

Procedimento de ensaio

1. Prepare todos os reagentes, soluções padro e amostras como instruídas. Traga todos os reagentes temperatura ambiente antes de usar. O ensaio é executado na temperatura ambiente.

2. Determine o número de tiras exigidas para o ensaio. Introduza as tiras nos quadros para o uso. As tiras no utilizadas devem ser armazenadas em 2-8°C.

3. Adicione o padro 50μl ao padro bem. Nota: No adicione o anticorpo ao padro bem porque a soluço padro contém o anticorpo biotinylated.

4. Adicione a amostra 40μl aos poços da amostra e ento adicione o anti-PTH anticorpo 10μl aos poços da amostra, a seguir adicione o streptavidin-HRP 50μl aos poços da amostra e aos poços padro (poço do controle no vazio). Misture bem. Cubra a placa com um aferidor. Incube 60 minutos em 37°C.

5. Remova o aferidor e lave a placa 5 vezes com amortecedor da lavagem. Embeba poços com pelo menos o amortecedor da lavagem de 0,35 ml para 30 segundos a 1 minuto para cada Washington. Para a lavagem automatizada, aspire todos os poços e lave 5 vezes com o amortecedor da lavagem, enchendo em demasia jorra com amortecedor da lavagem. Borre a placa nas toalhas de papel ou no outro material absorvente.

6. Adicione a soluço A da carcaça 50μl a cada um poço e adicione ento a soluço B da carcaça 50μl a cada um bem. Incube a placa coberta com um aferidor novo por 10 minutos em 37°C na obscuridade.

7. Adicione 50μl param a soluço a cada um bem, a cor azul mudará no amarelo imediatamente.

8. Determine a densidade ótica (valor do OD) de cada um poço que usa imediatamente um grupo do leitor do microplate a 450 nanômetro dentro de 10 minuetos após ter adicionado a soluço da parada.

 

Referências
“Enchondromatosis (doença de Ollier, síndrome de Maffucci) no é causado PTHR1 pela mutaço p.R150C.”
Rozeman L.B., Sangiorgi L., Briaire-de Bruijn I.H., Mainil-Varlet P., Bertoni F., Cleton-Jansen A. - M., Hogendoorn P.C.W., Bovee J.V.M.G.
Zumbido. Mutat. 24:466- 473(2004)

 

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