Sensibilidade forte do jogo de Elisa do sanduíche de Lipopolysaccharides com tempo de um ensaio de 120 minutos

Jogo forte do sanduíche ELISA de Lipopolysaccharides da sensibilidade do jogo alto dos LPS ELISA do rato da especificidade

Cat.No E0756Ra

Escala padro da curva: 2EU/L - 600EU/L

Sensibilidade: 1.02EU/L

o produto dos *This é para o uso da pesquisa somente, no para o uso em procedimentos do diagnóstico. É recomenda altamente ler inteiramente antes de usar esta instruço.

Uso pretendido

Este jogo do sanduíche é para a detecço quantitativa exata de rato Lipopolysaccharides (igualmente conhecido como LPS) no soro, plasma, supernates da cultura celular, lysates da pilha, homogenates do tecido.

Princípio do ensaio

Este jogo é um ensaio Enzima-ligado da imunoabsorço (ELISA). A placa foi pré-revestida com o anticorpo dos LPS do rato. Os LPS atuais na amostra so adicionados e ligam aos anticorpos revestidos nos poços. E o anticorpo ento biotinylated dos LPS do rato é adicionado e liga aos LPS na amostra. Ento Streptavidin-HRP é adicionado e liga aos LPS de Biotinylated o anticorpo. Após a incubaço Streptavidin-HRP desatado é lavado afastado durante uma etapa de lavagem. A soluço da carcaça é adicionada ento e a cor torna-se em proporço quantidade de LPS do rato. A reaço é terminada pela adiço de ácido para a soluço e a absorvência é medida em 450 nanômetro.

Coleço de espécime

O soro permite que o soro coagule por 10-20 minutos na temperatura ambiente. Centrifugador em 2000-3000 RPM por 20 minutos.

O plasma recolhe o plasma usando o EDTA ou a heparina como um anticoagulante. Centrifugue amostras por 15 minutos em 2000-3000 RPM em 2 - 8°C dentro de 30 minutos da coleço.

A urina recolhe pelo tubo estéril. Centrifugador em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Ao recolher o líquido fluido e cerebrospinal pleuroperitoneal, siga por favor os procedimentos acima mencionados.

O Supernatant da cultura celular recolhe pelos tubos estéreis ao examinar segregue componentes. Centrifugue em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Recolha os supernatants com cuidado. Ao examinar os componentes dentro da pilha, use PBS (pH 7.2-7.4) para diluir a suspenso da pilha concentraço da pilha de aproximadamente 1 million/ml. Danifique pilhas através dos ciclos repetidos da gelo-aproximaço amigável para deixar para fora os componentes internos. Centrifugue em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.

Tecidos da lavagem do tecido em PBS (pH 7,4) para remover completamente o sangue adicional e a pesá-lo antes da homogeneizaço. Triture tecidos e homogeneize-os em PBS (pH7.4) com um homogenizador de vidro no gelo. Aproximaço amigável em 2-8°C ou gelo no centrifugador de -20°C. em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.

Nota

• As concentrações da amostra devem ser previstas antes de ser usada no ensaio. Se a concentraço da amostra no está dentro da escala da curva padro, os usuários devem contactar-nos para determinar a amostra ótima para suas experiências particulares.
• As amostras a ser usadas no prazo de 5 dias devem ser armazenadas nas amostras 2-8°C. devem ser aliquoted ou devem ser armazenadas em -20°C dentro de 1 mês ou em -80°C dentro de 6 meses. Avoid repetiu ciclos da aproximaço amigável do gelo.
• As amostras devem ser trazidas temperatura ambiente antes de começar o ensaio.
• Centrifugador para recolher antes de usar a amostra.
• As amostras que contêm NaN3 no podem ser testadas enquanto inibe a atividade da peroxidase (HRP) do rabanete de cavalo.
• Recolha os supernatants com cuidado. Quando os sedimentos ocorreram durante o armazenamento, a centrifugaço deve ser executada outra vez.
• A hemólise pode extremamente impactar a validez dos resultados da análise. Ciao para minimizar a hemólise.

o *Sample no pode ser diluído com este jogo. Devido o ao material nós usamo-nos para preparar o jogo, a interferência de matriz da amostra pode falsamente comprimir a especificidade e a preciso do ensaio.

Preparaço do reagente

Todos os reagentes devem ser trazidos temperatura ambiente antes de usar.

O padro reconstitui o 120μl do padro (640EU/L) com o 120μl do diluente padro para gerar uma soluço 320EU/L conservada em estoque padro. Permita que o padro sente-se por 15 minutos com agitaço delicada antes de fazer diluições. Prepare pontos padro duplicados em série diluindo a soluço conservada em estoque padro (320EU/L) 1:2 com o diluente padro para produzir as soluções 160EU/L, 80EU/L, 40EU/L e 20EU/L. O diluente padro serve como o padro zero (0 EU/L). Toda a soluço restante deve ser congelada em -20°C e ser usada dentro de um mês. A diluiço das soluções padro sugeridas é como segue:

Amortecedor 20ml diluído da lavagem do concentrado 30x do amortecedor da lavagem no deionized ou água destilada para render 500 ml do amortecedor da lavagem 1x. Se os cristais formaram no concentrado, mistura delicadamente até que os cristais se dissolverem completamente.

Procedimento de ensaio

1. Prepare todos os reagentes, soluções padro e amostras como instruídas. Traga todos os reagentes temperatura ambiente antes de usar. O ensaio é executado na temperatura ambiente.

2. Determine o número de tiras exigidas para o ensaio. Introduza as tiras nos quadros para o uso. As tiras no utilizadas devem ser armazenadas em 2-8°C.

3. Adicione o padro 50μl ao padro bem. Nota: No adicione o anticorpo ao padro bem porque a soluço padro contém o anticorpo biotinylated.

4. Adicione a amostra 40μl aos poços da amostra e ento adicione o anticorpo dos anti-LPS 10μl aos poços da amostra, a seguir adicione o streptavidin-HRP 50μl aos poços da amostra e aos poços padro (poço do controle no vazio). Misture bem. Cubra a placa com um aferidor. Incube 60 minutos em 37°C.

5. Remova o aferidor e lave a placa 5 vezes com amortecedor da lavagem. Embeba poços com pelo menos o amortecedor da lavagem de 0,35 ml para 30 segundos a 1 minuto para cada Washington. Para a lavagem automatizada, aspire todos os poços e lave 5 vezes com o amortecedor da lavagem, enchendo em demasia jorra com amortecedor da lavagem. Borre a placa nas toalhas de papel ou no outro material absorvente.

6. Adicione a soluço A da carcaça 50μl a cada um poço e adicione ento a soluço B da carcaça 50μl a cada um bem. Incube a placa coberta com um aferidor novo por 10 minutos em 37°C na obscuridade.

7. Adicione 50μl param a soluço a cada um bem, a cor azul mudará no amarelo imediatamente.

8. Determine a densidade ótica (valor do OD) de cada um poço que usa imediatamente um grupo do leitor do microplate a 450 nanômetro dentro de 10 minuetos após ter adicionado a soluço da parada.

Cálculo de resultado

Construa uma curva padro traçando o OD médio para cada padro no vertical (Y) linha central contra a concentraço no horizontal (X) a linha central e tira uma melhor curva do ajuste através dos pontos no gráfico. Estes cálculos podem melhor ser executados com o software por computador do curva-encaixe e a melhor linha do ajuste pode ser determinada pela análise de regresso.

Shanghai Korain Biotech Co. foi construído em 2010. Como um criador nos reagentes e nas ferramentas para a ciência da vida, Korainbio fornece pesquisadores as ferramentas e o apoio científico que incluem 30.000 anticorpos, proteínas 1000+ e 5000 jogos de ELISA. Nós apontamos ser um fornecedor principal com nível da mundo-classe para os pesquisadores pelo mundo inteiro. Nossa linha de produtos cobre um grupo de áreas de pesquisa que incluem a imunologia, a neurociência, o cncer, as quinase, as fosfatase e a biologia celular.

O laboratório da tecnologia do bio-ensaio (laboratório de BT) como um tipo principal de Korainbio focalizou em pesquisadores de ajuda para aperfeiçoar o trabalho da ciência da vida e serve como um fornecedor de serviços do teste e tornar-se, incluindo testes do elisa, teste da WB e desenvolvimento do antígeno. Fundando em 2010, nosso foco estratégico esteve no desenvolvimento de permitir tecnologias na pesquisa, no desenvolvimento, na fabricaço e no mercado dos produtos e serviço immuno inovativos baseados em tecnologias moleculars.

Os reagentes de Korain so apoiados pela equipe processional superior e por um sistema de gerenciamento da qualidade que seja certificado para o CE e o ISO. Nosso programa de desenvolvimento de produtos para o uso em uma variedade de incluir das aplicações:

ELISA e immunohistochemistry

• Imunoprecipitaço
• Immunohistochemistry
• Microscopia da imunofluorescência
• Immunohistochemistry
• Multiplexaço quantitativa

Sobre o laboratório de BT

Como um tipo principal de Korainbio, o laboratório da tecnologia do bio-ensaio (laboratório de BT) oferece uma variedade de jogos eficazes na reduço de custos e grupos de ELISA medir consistentemente e confiantemente cytokines, chemokines, e biomarkers solúveis. O jogo do sanduíche e competitivo que fornecem os reagentes do núcleo nossa seleço dos produtos de ELISA encontram a procura de novatos de ELISA aos peritos igualmente a preço muito econômico.

Distribuidores mundiais

ELISA Kit Categories

Jogo do sanduíche
Os jogos do sanduíche so validados inteiramente e prontos para uso, contendo 96 - as placas boas da tira pré-revestidas com anticorpo da captaço para detectar o antígeno da amostra.

Jogo competitivo
Em um ensaio competitivo de ELISA, o antígeno da amostra e o antígeno etiquetado competem para o emperramento do anticorpo da captaço. Mais proteína do alvo há na amostra, o antígeno menos etiquetado estará capturado e mais fraco o sinal.

Jogo qualitativo
Os resultados qualitativos fornecem um resultado positivo ou negativo simples para uma amostra. Em ELISA quantitativo, a densidade ótica (OD) da amostra é comparada a uma curva padro, que seja tipicamente uma diluiço de série de uma soluço da saber-concentraço da molécula do alvo. É apropriado para detectar antígenos pequenos.

Vantagens de nosso jogo do sanduíche

Sem amostra de diluiço

• Tempo de salvaguarda do ensaio
• Escala larga da detecço
• Reduzindo interações no específicas entre as proteínas da matriz da amostra

sistema da Streptavidin-biotina

• O emperramento no específico significativo pode ser impedido pelo strepvidin
• Reduzindo a interferência da biotina residual na amostra
• Uma interaço no-covalent com afinidade alta

Etapa de lavagem

• Somente 5 vezes para uma etapa

Placa pré-revestida

O que nós fornecemos

• Folha de dados do produto, imagem do produto, MSDS, referências do publican
• Ordem pelo telefone do emailor.
• Garantia de qualidade com o certificado do ISO e do CE
• Dentro de 36 horas a seu inquérito
• O apoio pela equipe profissional que é especializa-se na ciência da vida.
• Entrega a mais de 100 países
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O que nós apontamos

• Aperfeiçoe seu R&D com nossas ferramentas
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Se você está interessado no trabalho connosco para expandir o mercado, sinta por favor livre contactar-nos perto: save@bt-laboratory.com