Rato alto do jogo da especificidade ELISA 2 do ensaio do comprimento horas de vitamina K2 do rato

Número de modelo:Cat.No E0549Mo
Lugar de origem:Xangai, China.
Quantidade de ordem mínima:negociação
Capacidade da fonte:Western union, T/T
Tempo de entrega:1-3 dias úteis, pedido em grandes quantidades dentro de uma semana
Detalhes de empacotamento:Envolvido com bloco de gelo e pacote do isopor
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2 horas de jogo alto da especificidade ELISA do rato do jogo da vitamina K2 ELISA do rato do comprimento do ensaio

 

Cat.No E1804Mo

o produto dos *This é para o uso da pesquisa somente, no para o uso em procedimentos do diagnóstico. É recomenda altamente ler inteiramente antes de usar esta instruço.

 

Preciso

A preciso do Intra-ensaio (preciso dentro de um ensaio) três amostras de concentraço conhecida foi testada em uma placa para avaliar a preciso do intra-ensaio.

A preciso do Inter-ensaio (preciso entre ensaios) três amostras de concentraço conhecida foi testada em ensaios separados para avaliar a preciso do inter-ensaio.

CV (%) = SD/mean x 100

Intra-ensaio: CV<8>

Inter-ensaio: CV<10>

 

Princípio do ensaio

Este jogo é um ensaio Enzima-ligado da imunoabsorço (ELISA). A placa foi pré-revestida com o anticorpo do rato VK2. VK2 apresentam na amostra so adicionados e ligam aos anticorpos revestidos nos poços. E o anticorpo ento biotinylated do rato VK2 é adicionado e liga a VK2 na amostra. Ento Streptavidin-HRP é adicionado e liga ao Biotinylated VK2antibody. Após a incubaço Streptavidin-HRP desatado é lavado afastado durante uma etapa de lavagem. A soluço da carcaça é adicionada ento e a cor torna-se em proporço quantidade do rato VK2. A reaço é terminada pela adiço de ácido para a soluço e a absorvência é medida em 450 nanômetro.

 

Reagente fornecido

ComponentesQuantidade
Soluço padro (9.6nmol/L)0.5ml x1
Placa pré-revestida de ELISA12 * 8 tiras boas x1
Diluente padro3ml x1
Streptavidin-HRP6ml x1
Pare a soluço6ml x1
Soluço A da carcaça6ml x1
Soluço B da carcaça6ml x1
Concentrado do amortecedor da lavagem (30x)20ml x1
Anticorpo do rato VK2 de Biotinylated1ml x1
Instruço do usuário1
Aferidor da placapics 2
Saco do zíper1 PIC

 

Precauções

  • Antes do uso, o jogo e a amostra devem ser aquecidos naturalmente temperatura ambiente 30 minutos.
  • Esta instruço deve restritamente ser seguida na experiência.
  • Uma vez que o número desejado de tiras foi removido, reseal imediatamente o saco para proteger permanecer da deterioraço. Cubra todos os reagentes quando no no uso.
  • Make sure que introduz com pipeta a ordem e a taxa de adiço de bem-a-bem ao introduzir com pipeta reagentes.
  • A pipeta derruba e o aferidor da placa disposiço deve ser limpo e descartável para evitar a contaminaço colateral.
  • Evite usar os reagentes dos grupos diferentes junto.
  • A soluço B da carcaça é sensível luz, no expõe a soluço B da carcaça para iluminar-se por muito tempo.
  • Pare a soluço contém o ácido. Vista por favor a proteço do olho, da mo e de pele ao usar este material. Evite o contato da pele ou das mucosas com reagente do jogo.
  • O jogo no deve ser usado além da data de validade.

 

Coleço de espécime

O soro permite que o soro coagule por 10-20 minutos na temperatura ambiente. Centrifugador em 2000-3000 RPM por 20 minutos.

 

O plasma recolhe o plasma usando o EDTA ou a heparina como um anticoagulante. Centrifugue amostras por 15 minutos em 2000-3000 RPM em 2 - 8°C dentro de 30 minutos da coleço.

 

A urina recolhe pelo tubo estéril. Centrifugador em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Ao recolher o líquido fluido e cerebrospinal pleuroperitoneal, siga por favor os procedimentos acima mencionados.

 

O Supernatant da cultura celular recolhe pelos tubos estéreis ao examinar segregue componentes. Centrifugue em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Recolha os supernatants com cuidado. Ao examinar os componentes dentro da pilha, use PBS (pH 7.2-7.4) para diluir a suspenso da pilha concentraço da pilha de aproximadamente 1 million/ml. Danifique pilhas através dos ciclos repetidos da gelo-aproximaço amigável para deixar para fora os componentes internos. Centrifugue em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.

 

O tecido outros líquidos de corpo enxágua tecidos em PBS (pH 7,4) para remover completamente o sangue adicional e para pesá-lo antes da homogeneizaço. Triture tecidos e homogeneize-os em PBS (pH7.4) com um homogenizador de vidro no gelo. Aproximaço amigável em 2-8°C ou gelo no centrifugador de -20°C. em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.

 

o *Sample no pode ser diluído com este jogo. Devido o ao material nós usamo-nos para preparar o jogo, a interferência de matriz da amostra pode falsamente comprimir a especificidade e a preciso do ensaio.

 

Preparaço do reagente

Todos os reagentes devem ser trazidos temperatura ambiente antes de usar.

O padro reconstitui o 120μl do padro (9.6nmol/L) com o 120μl do diluente padro para gerar uma soluço 4.8nmol/L conservada em estoque padro. Permita que o padro sente-se por 15 minutos com agitaço delicada antes de fazer diluições. Prepare pontos padro duplicados em série diluindo a soluço conservada em estoque padro (4.8nmol/L) 1:2 com o diluente padro para produzir as soluções 2.4nmol/L, 1.2nmol/L, 0.6nmol/L e 0.3nmol/L. O diluente padro serve como o padro zero (0 nmol/L). Toda a soluço restante deve ser congelada em -20℃ e ser usada dentro de um mês. A diluiço das soluções padro sugeridas é como segue:

 

4.8nmol/LPadro No.5diluente original do padro 120μl + do padro 120μl
2.4nmol/LPadro No.4padro 120μl diluente do padro No.5 + 120μl
1.2nmol/LPadro No.3padro 120μl diluente do padro No.4 + 120μl
0.6nmol/LPadro No.2padro 120μl diluente do padro No.3 + 120μl
0.3nmol/LPadro No.1padro 120μl diluente do padro No.2 + 120μl

 

Concentraço padroPadro No.5Padro No.4Padro No.3Padro No.2Padro No.1
9.6nmol/L4.8nmol/L2.4nmol/L1.2nmol/L0.6nmol/L0.3nmol/L

 

Amortecedor 20ml diluído da lavagem do concentrado 30x do amortecedor da lavagem no deionized ou água destilada para render 500 ml do amortecedor da lavagem 1x. Se os cristais formaram no concentrado, mistura delicadamente até que os cristais se dissolverem completamente.

 

Sumário

1. Prepare todos os reagentes, amostras e padrões.

2. Adicione a amostra e o reagente de ELISA em cada um bem. Incube para 1 hora em 37°C.

3. Lave a placa 5 vezes.

4. Adicione a soluço A e B. Incubaço da carcaça por 10 minutos em 37°C.

5. Adicione param a soluço e a cor torna-se.

6. Leia o valor do OD dentro de 10 minutos.

 

Cálculo de resultado

Construa uma curva padro traçando o OD médio para cada padro no vertical (Y) linha central contra a concentraço no horizontal (X) a linha central e tira uma melhor curva do ajuste através dos pontos no gráfico. Estes cálculos podem melhor ser executados com o software por computador do curva-encaixe e a melhor linha do ajuste pode ser determinada pela análise de regresso.

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