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T3 o jogo bovino do sanduíche ELISA personalizou a placa de Wells
do jogo 96 do teste de Immunoassay do Tri iodothyronine
Cat.No E0215Bo
Escala padro da curva: 0.03ng/ml - 9ng/ml
Sensibilidade: 0.01ng/ml
Tamanho: 96 poços
Armazenamento: Armazene os reagentes em 2-8°C. para um armazenamento de mais de
6 meses referem a data de validade mantêm-no em ciclos repetidos
Avoid da aproximaço amigável de -20°C. Se os reagentes individuais
so abertos recomenda-se que o jogo esteja usado dentro de 1 mês.
o produto dos *This é para o uso da pesquisa somente, no para o uso
em procedimentos do diagnóstico. É recomenda altamente ler
inteiramente antes de usar esta instruço.
Preciso
A preciso do Intra-ensaio (preciso dentro de um ensaio) três
amostras de concentraço conhecida foi testada em uma placa para
avaliar a preciso do intra-ensaio.
A preciso do Inter-ensaio (preciso entre ensaios) três amostras de
concentraço conhecida foi testada em ensaios separados para avaliar
a preciso do inter-ensaio.
CV (%) = SD/mean x 100
Intra-ensaio: CV<8>
Inter-ensaio: CV<10>
Uso pretendido
Este jogo do sanduíche é para a detecço quantitativa exata de Tri
iodothyronine bovino (igualmente conhecido como o T3) no soro,
plasma, supernates da cultura celular, lysates da pilha,
homogenates do tecido.
Princípio do ensaio
Este jogo de ELISA é um ensaio Enzima-ligado da imunoabsorço
(ELISA). A placa foi pré-revestida com o anticorpo T3 bovino. O T3
apresenta na amostra é adicionado e liga aos anticorpos revestidos
nos poços. E o anticorpo T3 bovino ento biotinylated é adicionado e
liga ao T3 na amostra. Ento Streptavidin-HRP é adicionado e liga ao
Biotinylated T3antibody. Após a incubaço Streptavidin-HRP desatado
é lavado afastado durante uma etapa de lavagem. A soluço da carcaça
é adicionada ento e a cor torna-se em proporço quantidade de T3
bovino. A reaço é terminada pela adiço de ácido para a soluço e a
absorvência é medida em 450 nanômetro.
Reagente fornecido
Componentes | Quantidade |
Soluço padro (9.6ng/ml) | 0.5ml x1 |
Placa pré-revestida de ELISA | 12 * 8 tiras boas x1 |
Diluente padro | 3ml x1 |
Streptavidin-HRP | 6ml x1 |
Pare a soluço | 6ml x1 |
Soluço A da carcaça | 6ml x1 |
Soluço B da carcaça | 6ml x1 |
Concentrado do amortecedor da lavagem (30x) | 20ml x1 |
Anticorpo T3 bovino de Biotinylated | 1ml x1 |
Instruço do usuário | 1 |
Aferidor da placa | pics 2 |
Saco do zíper | 1 PIC |
Material exigido mas no fornecido
Precauções
Procedimento de ensaio
1. Prepare todos os reagentes, soluções padro e amostras como
instruídas. Traga todos os reagentes temperatura ambiente antes de
usar. O ensaio é executado na temperatura ambiente.
2. Determine o número de tiras exigidas para o ensaio. Introduza as
tiras nos quadros para o uso. As tiras no utilizadas devem ser
armazenadas em 2-8°C.
3. Adicione o padro 50μl ao padro bem. Nota: No adicione o anticorpo ao padro bem porque a soluço padro contém
o anticorpo biotinylated.
4. Adicione a amostra 40μl aos poços da amostra e ento adicione o
anticorpo de 10μl anti-T3 aos poços da amostra, a seguir adicione o
streptavidin-HRP 50μl aos poços da amostra e aos poços padro (poço
do controle no vazio). Misture bem. Cubra a placa com um aferidor.
Incube 60 minutos em 37°C.
5. Remova o aferidor e lave a placa 5 vezes com amortecedor da
lavagem. Embeba poços com pelo menos o amortecedor da lavagem de
0,35 ml para 30 segundos a 1 minuto para cada Washington. Para a
lavagem automatizada, aspire todos os poços e lave 5 vezes com o
amortecedor da lavagem, enchendo em demasia jorra com amortecedor
da lavagem. Borre a placa nas toalhas de papel ou no outro material
absorvente.
6. Adicione a soluço A da carcaça 50μl a cada um poço e adicione ento
a soluço B da carcaça 50μl a cada um bem. Incube a placa coberta
com um aferidor novo por 10 minutos em 37°C na obscuridade.
7. Adicione 50μl param a soluço a cada um bem, a cor azul mudará no
amarelo imediatamente.
8. Determine a densidade ótica (valor do OD) de cada um poço que usa
imediatamente um grupo do leitor do microplate a 450 nanômetro
dentro de 10 minuetos após ter adicionado a soluço da parada.
Sumário
1. Prepare todos os reagentes, amostras e padrões.
2. Adicione a amostra e o reagente de ELISA em cada um bem. Incube
para 1 hora em 37°C.
3. Lave a placa 5 vezes.
4. Adicione a soluço A e B. Incubaço da carcaça por 10 minutos em
37°C.
5. Adicione param a soluço e a cor torna-se.
6. Leia o valor do OD dentro de 10 minutos.