Do jogo suíno do teste de Immunoassay do sanduíche da pesquisa sensibilidade forte Syndecan - 1

Número de modelo:Cat.No E0604Po
Lugar de origem:Xangai, China.
Quantidade de ordem mínima:negociação
Capacidade da fonte:Western union, T/T
Tempo de entrega:1-3 dias úteis, pedido em grandes quantidades dentro de uma semana
Detalhes de empacotamento:Envolvido com bloco de gelo e pacote do isopor
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Jogo forte suíno do teste de Immunoassay do sanduíche da sensibilidade e da especificidade Syndecan-1 para a pesquisa
 

Preciso

A preciso do Intra-ensaio (preciso dentro de um ensaio) três amostras de concentraço conhecida foi testada em uma placa para avaliar a preciso do intra-ensaio.

A preciso do Inter-ensaio (preciso entre ensaios) três amostras de concentraço conhecida foi testada em ensaios separados para avaliar a preciso do inter-ensaio.

CV (%) = SD/mean x 100

Intra-ensaio: CV<8>

Inter-ensaio: CV<10>

 

Cat.No E0604Po

Escala padro da curva: 2ng/ml - 600ng/ml

Sensibilidade: 1.26ng/ml

Tamanho: 96 poços

Armazenamento: Armazene os reagentes em 2-8°C. para um armazenamento de mais de 6 meses referem a data de validade mantêm-no em ciclos repetidos Avoid da aproximaço amigável de -20°C. Se os reagentes individuais so abertos recomenda-se que o jogo esteja usado dentro de 1 mês.

o produto dos *This é para o uso da pesquisa somente, no para o uso em procedimentos do diagnóstico. É recomenda altamente ler inteiramente antes de usar esta instruço.

 

Uso pretendido

Este jogo do sanduíche é para a detecço quantitativa exata de Syndecan-1 suíno (igualmente conhecido como SDC1) no soro, plasma, supernates da cultura celular, lysates da pilha, homogenates do tecido.

 

Princípio do ensaio

Este jogo do teste de ELISA é um ensaio Enzima-ligado da imunoabsorço (ELISA). A placa foi pré-revestida com o anticorpo SDC1 suíno. SDC1 apresentam na amostra so adicionados e ligam aos anticorpos revestidos nos poços. E o anticorpo SDC1 suíno ento biotinylated é adicionado e liga a SDC1 na amostra. Ento Streptavidin-HRP é adicionado e liga ao anticorpo de Biotinylated SDC1. Após a incubaço Streptavidin-HRP desatado é lavado afastado durante uma etapa de lavagem. A soluço da carcaça é adicionada ento e a cor torna-se em proporço quantidade de SDC1 suíno. A reaço é terminada pela adiço de ácido para a soluço e a absorvência é medida em 450 nanômetro.

 

Precauções

  • Antes do uso, o jogo e a amostra do teste de ELISA devem ser aquecidos naturalmente temperatura ambiente 30 minutos.
  • Esta instruço deve restritamente ser seguida na experiência.
  • Uma vez que o número desejado de tiras foi removido, reseal imediatamente o saco para proteger permanecer da deterioraço. Cubra todos os reagentes quando no no uso.
  • Make sure que introduz com pipeta a ordem e a taxa de adiço de bem-a-bem ao introduzir com pipeta reagentes.
  • A pipeta derruba e o aferidor da placa disposiço deve ser limpo e descartável para evitar a contaminaço colateral.
  • Evite usar os reagentes dos grupos diferentes junto.
  • A soluço B da carcaça é sensível luz, no expõe a soluço B da carcaça para iluminar-se por muito tempo.
  • Pare a soluço contém o ácido. Vista por favor a proteço do olho, da mo e de pele ao usar este material. Evite o contato da pele ou das mucosas com reagente do jogo.
  • O jogo no deve ser usado além da data de validade.

 

Coleço de espécime

O soro permite que o soro coagule por 10-20 minutos na temperatura ambiente. Centrifugador em 2000-3000 RPM por 20 minutos.

 

O plasma recolhe o plasma usando o EDTA ou a heparina como um anticoagulante. Centrifugue amostras por 15 minutos em 2000-3000 RPM em 2 - 8°C dentro de 30 minutos da coleço.

 

A urina recolhe pelo tubo estéril. Centrifugador em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Ao recolher o líquido fluido e cerebrospinal pleuroperitoneal, siga por favor os procedimentos acima mencionados.

 

O Supernatant da cultura celular recolhe pelos tubos estéreis ao examinar segregue componentes. Centrifugue em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Recolha os supernatants com cuidado. Ao examinar os componentes dentro da pilha, use PBS (pH 7.2-7.4) para diluir a suspenso da pilha concentraço da pilha de aproximadamente 1 million/ml. Danifique pilhas através dos ciclos repetidos da gelo-aproximaço amigável para deixar para fora os componentes internos. Centrifugue em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.

 

Tecidos da lavagem do tecido em PBS (pH 7,4) para remover completamente o sangue adicional e a pesá-lo antes da homogeneizaço. Triture tecidos e homogeneize-os em PBS (pH7.4) com um homogenizador de vidro no gelo. Aproximaço amigável em 2-8°C ou gelo no centrifugador de -20°C. em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.

 

o *Sample no pode ser diluído com este jogo. Devido o ao material nós usamo-nos para preparar o jogo, a interferência de matriz da amostra pode falsamente comprimir a especificidade e a preciso do ensaio.

 

Preparaço do reagente

Todos os reagentes devem ser trazidos temperatura ambiente antes de usar.

O padro reconstitui o 120μl do padro (640ng/ml) com o 120μl do diluente padro para gerar uma soluço 320ng/ml conservada em estoque padro. Permita que o padro sente-se por 15 minutos com agitaço delicada antes de fazer diluições. Prepare pontos padro duplicados em série diluindo o 1:2 padro da soluço conservada em estoque (320ng/ml) com o diluente padro para produzir as soluções 160ng/ml, 80ng/ml, 40ng/ml e 20ng/ml. O diluente padro serve como o padro zero (0 ng/ml). Toda a soluço restante deve ser congelada em -20°C e ser usada dentro de um mês. A diluiço das soluções padro sugeridas é como segue:

 

320ng/mlPadro No.5diluente original do padro 120μl + do padro 120μl
160ng/mlPadro No.4padro 120μl diluente do padro No.5 + 120μl
80ng/mlPadro No.3padro 120μl diluente do padro No.4 + 120μl
40ng/mlPadro No.2padro 120μl diluente do padro No.3 + 120μl
20ng/mlPadro No.1padro 120μl diluente do padro No.2 + 120μl

 

Concentraço padroPadro No.5Padro No.4Padro No.3Padro No.2Padro No.1
640ng/ml320ng/ml160ng/ml80ng/ml40ng/ml20ng/ml

 

Amortecedor 20ml diluído da lavagem do concentrado 30x do amortecedor da lavagem no deionized ou água destilada para render 600 ml do amortecedor da lavagem 1x. Se os cristais formaram no concentrado, mistura delicadamente até que os cristais se dissolverem completamente.

 

Sumário

1. Prepare todos os reagentes, amostras e padrões.

2. Adicione a amostra e o reagente de ELISA em cada um bem. Incube para 1 hora em 37°C.

3. Lave a placa 5 vezes.

4. Adicione a soluço A e B. Incubaço da carcaça por 10 minutos em 37°C.

5. Adicione param a soluço e a cor torna-se.

6. Leia o valor do OD dentro de 10 minutos.

 

Cálculo de resultado

Construa uma curva padro traçando o OD médio para cada padro no vertical (Y) linha central contra a concentraço no horizontal (X) a linha central e tira uma melhor curva do ajuste através dos pontos no gráfico. Estes cálculos podem melhor ser executados com o software por computador do curva-encaixe e a melhor linha do ajuste pode ser determinada pela análise de regresso.

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