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Tipo jogo básico do sanduíche do fator de crescimento ELISA do fibroblasto do jogo do teste do rato BFGF ELISA com 2 horas de tempo do ensaio
Cat.No E0341Ra
Escala padro da curva: 2ng/L - 600ng/L
Sensibilidade: 1.16ng/L
Tamanho: 96 poços
Armazenamento: Armazene os reagentes em 2-8°C. para um armazenamento de mais de 6 meses referem a data de validade mantêm-no em ciclos repetidos Avoid da aproximaço amigável de -20°C. Se os reagentes individuais so abertos recomenda-se que o jogo esteja usado dentro de 1 mês.
o produto dos *This é para o uso da pesquisa somente, no para o uso em procedimentos do diagnóstico. É recomenda altamente ler inteiramente antes de usar esta instruço.
Sumário
1. Prepare todos os reagentes, amostras e padrões.
2. Adicione a amostra e o reagente de ELISA em cada um bem. Incube para 1 hora em 37°C.
3. Lave a placa 5 vezes.
4. Adicione a soluço A e B. Incubaço da carcaça por 10 minutos em 37°C.
5. Adicione param a soluço e a cor torna-se.
6. Leia o valor do OD dentro de 10 minutos.
Cálculo de resultado
Construa uma curva padro traçando o OD médio para cada padro no vertical (Y) linha central contra a concentraço no horizontal (X) a linha central e tira uma melhor curva do ajuste através dos pontos no gráfico. Estes cálculos podem melhor ser executados com o software por computador do curva-encaixe e a melhor linha do ajuste pode ser determinada pela análise de regresso.
Preciso
A preciso do Intra-ensaio (preciso dentro de um ensaio) três amostras de concentraço conhecida foi testada em uma placa para avaliar a preciso do intra-ensaio.
A preciso do Inter-ensaio (preciso entre ensaios) três amostras de concentraço conhecida foi testada em ensaios separados para avaliar a preciso do inter-ensaio.
CV (%) = SD/mean x 100
Intra-ensaio: CV<8>
Inter-ensaio: CV<10>
Uso pretendido
Este jogo do sanduíche é para a detecço quantitativa exata de fator de crescimento básico do fibroblasto do rato (igualmente conhecido como BFGF) no soro, plasma, supernates da cultura celular, lysates da pilha, homogenates do tecido.
Princípio do ensaio
Este jogo do sanduíche é um ensaio Enzima-ligado da imunoabsorço (ELISA). A placa foi pré-revestida com o anticorpo do rato BFGF. BFGF apresentam na amostra so adicionados e ligam aos anticorpos revestidos nos poços. E o anticorpo ento biotinylated do rato BFGF é adicionado e liga a BFGF na amostra. Ento Streptavidin-HRP é adicionado e liga ao anticorpo de Biotinylated BFGF. Após a incubaço Streptavidin-HRP desatado é lavado afastado durante uma etapa de lavagem. A soluço da carcaça é adicionada ento e a cor torna-se em proporço quantidade do rato BFGF. A reaço é terminada pela adiço de ácido para a soluço e a absorvência é medida em 450 nanômetro.
Precauções
Reagente fornecido
Componentes | Quantidade |
Soluço padro (640ng/L) | 0.5ml x1 |
Placa pré-revestida de ELISA | 12 * 8 tiras boas x1 |
Diluente padro | 3ml x1 |
Streptavidin-HRP | 6ml x1 |
Pare a soluço | 6ml x1 |
Soluço A da carcaça | 6ml x1 |
Soluço B da carcaça | 6ml x1 |
Concentrado do amortecedor da lavagem (25x) | 20ml x1 |
Anticorpo do rato BFGF de Biotinylated | 1ml x1 |
Instruço do usuário | 1 |
Aferidor da placa | pics 2 |
Saco do zíper | 1 PIC |
Preparaço do reagente
Todos os reagentes devem ser trazidos temperatura ambiente antes de usar.
O padro reconstitui o 120μl do padro (640ng/L) com o 120μl do diluente padro para gerar uma soluço 320ng/L conservada em estoque padro. Permita que o padro sente-se por 15 minutos com agitaço delicada antes de fazer diluições. Prepare pontos padro duplicados em série diluindo a soluço conservada em estoque padro (320ng/L) 1:2 com o diluente padro para produzir as soluções 160ng/L, 80ng/L, 40ng/L e 20ng/L. O diluente padro serve como o padro zero (0 ng/L). Toda a soluço restante deve ser congelada em -20°C e ser usada dentro de um mês. A diluiço das soluções padro sugeridas é como segue:
320ng/L | Padro No.5 | diluente original do padro 120μl + do padro 120μl |
160ng/L | Padro No.4 | padro 120μl diluente do padro No.5 + 120μl |
80ng/L | Padro No.3 | padro 120μl diluente do padro No.4 + 120μl |
40ng/L | Padro No.2 | padro 120μl diluente do padro No.3 + 120μl |
20ng/L | Padro No.1 | padro 120μl diluente do padro No.2 + 120μl |
Concentraço padro | Padro No.5 | Padro No.4 | Padro No.3 | Padro No.2 | Padro No.1 |
640ng/L | 320ng/L | 160ng/L | 80ng/L | 40ng/L | 20ng/L |
Amortecedor 20ml diluído da lavagem do concentrado 25x do amortecedor da lavagem no deionized ou água destilada para render 500 ml do amortecedor da lavagem 1x. Se os cristais formaram no concentrado, mistura delicadamente até que os cristais se dissolverem completamente.