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96 ser humano personalizado Wells Corticotropin que libera o jogo de CRH ELISA da hormona
Cat.No EHu1000
Escala padro da curva: 1ng/ml - 40ng/ml
Sensibilidade: 0.53ng/ml
Tamanho: 96 poços
Armazenamento: Armazene os reagentes em 2-8°C. para um armazenamento de mais de 6 meses referem a data de validade mantêm-no em ciclos repetidos Avoid da aproximaço amigável de -20°C. Se os reagentes individuais so abertos recomenda-se que o jogo esteja usado dentro de 1 mês.
Princípio do ensaio
Este jogo é um ensaio Enzima-ligado da imunoabsorço (ELISA). A placa foi pré-revestida com o anticorpo de CRH do ser humano. CRH apresenta na amostra é adicionado e liga aos anticorpos revestidos nos poços. E o anticorpo ento biotinylated de CRH do ser humano é adicionado e liga a CRH na amostra. Ento Streptavidin-HRP é adicionado e liga ao anticorpo de Biotinylated CRH. Após a incubaço Streptavidin-HRP desatado é lavado afastado durante uma etapa de lavagem. A soluço da carcaça é adicionada ento e a cor torna-se em proporço quantidade de ser humano CRH. A reaço é terminada pela adiço de ácido para a soluço e a absorvência é medida em 450 nanômetro.
Reagente fornecido
Componentes | Quantidade |
Soluço padro (40ng/ml) | 0.5ml x1 |
Placa pré-revestida de ELISA | 12 * 8 tiras boas x1 |
Diluente padro | 3ml x1 |
Streptavidin-HRP | 6ml x1 |
Pare a soluço | 6ml x1 |
Soluço A da carcaça | 6ml x1 |
Soluço B da carcaça | 6ml x1 |
Concentrado do amortecedor da lavagem (30x) | 20ml x1 |
Anticorpo de CRH do ser humano de Biotinylated | 1ml x1 |
Instruço do usuário | 1 |
Aferidor da placa | pics 2 |
Saco do zíper | 1 PIC |
Preparaço do reagente
Todos os reagentes devem ser trazidos temperatura ambiente antes de usar. O padro reconstitui o 120μl do padro (40ng/ml) com o 120μl do diluente padro para gerar uma soluço 20ng/ml conservada em estoque padro. Permita que o padro sente-se por 15 minutos com agitaço delicada antes de fazer diluições. Prepare pontos padro duplicados em série diluindo o 1:2 padro da soluço conservada em estoque (20ng/ml) com o diluente padro para produzir as soluções 10ng/ml, 5ng/ml, 2.5ng/ml e 1.25ng/ml. O diluente padro serve como o padro zero (0 ng/ml). Toda a soluço restante deve ser congelada em -20℃ e ser usada dentro de um mês. A diluiço das soluções padro sugeridas é como segue:
20ng/ml | Padro No.5 | diluente original do padro 120μl + do padro 120μl |
10ng/ml | Padro No.4 | padro 120μl diluente do padro No.5 + 120μl |
5ng/ml | Padro No.3 | padro 120μl diluente do padro No.4 + 120μl |
2.5ng/ml | Padro No.2 | padro 120μl diluente do padro No.3 + 120μl |
1.25ng/ml | Padro No.1 | padro 120μl diluente do padro No.2 + 120μl |
Concentraço padro | Padro No.5 | Padro No.4 | Padro No.3 | Padro No.2 | Padro No.1 |
40ng/ml | 20ng/ml | 10ng/ml | 5ng/ml | 2.5ng/ml | 1.25ng/ml |
Amortecedor 20ml diluído da lavagem do concentrado 30x do amortecedor da lavagem no deionized ou água destilada para render 500 ml do amortecedor da lavagem 1x. Se os cristais formaram no concentrado, mistura delicadamente até que os cristais se dissolverem completamente.
Sumário
1. Prepare todos os reagentes, amostras e padrões.
2. Adicione a amostra e o reagente de ELISA em cada um bem. Incube para 1 hora em 37°C.
3. Lave a placa 5 vezes.
4. Adicione a soluço A e B. Incubaço da carcaça por 10 minutos em 37°C.
5. Adicione param a soluço e a cor torna-se.
6. Leia o valor do OD dentro de 10 minutos.
Cálculo de resultado
Construa uma curva padro traçando o OD médio para cada padro no vertical (Y) linha central contra a concentraço no horizontal (X) a linha central e tira uma melhor curva do ajuste através dos pontos no gráfico. Estes cálculos podem melhor ser executados com o software por computador do curva-encaixe e a melhor linha do ajuste pode ser determinada pela análise de regresso.