Jogo de estimulação do sanduíche ELISA da hormona do tiroide bovino da elevada precisão com 2 horas de tempo do ensaio

Número de modelo:Cat.No E0217Bo
Lugar de origem:Xangai, China.
Quantidade de ordem mínima:negociação
Capacidade da fonte:Western union, T/T
Tempo de entrega:1-3 dias úteis, pedido em grandes quantidades dentro de uma semana
Detalhes de empacotamento:Envolvido com bloco de gelo e pacote do isopor
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Jogo de estimulaço do sanduíche ELISA da hormona do tiroide bovino da elevada preciso com 2 horas de tempo do ensaio
 

Cat.No E0217Bo

 

Tamanho: 96 poços

Uso pretendido

Este jogo do sanduíche é para a detecço quantitativa exata de hormona de estimulaço do tiroide bovino (igualmente conhecida como TSH) no soro, plasma, supernates da cultura celular, lysates da pilha, homogenates do tecido.

 

Sensibilidade: 0.027mIU/L

Escala padro da curva: 0.05mIU/L - 30mIU/L

Armazenamento: Armazene os reagentes em 2-8°C. para um armazenamento de mais de 6 meses referem a data de validade mantêm-no em ciclos repetidos Avoid da aproximaço amigável de -20°C. Se os reagentes individuais so abertos recomenda-se que o jogo esteja usado dentro de 1 mês.

o produto dos *This é para o uso da pesquisa somente, no para o uso em procedimentos do diagnóstico. É recomenda altamente ler inteiramente antes de usar esta instruço.

 

Uso pretendido

Este jogo do sanduíche é para a detecço quantitativa exata de hormona de estimulaço do tiroide bovino (igualmente conhecida como TSH) no soro, plasma, supernates da cultura celular, lysates da pilha, homogenates do tecido.

 

Princípio do ensaio

Este jogo do sanduíche ELISA é um ensaio Enzima-ligado da imunoabsorço (ELISA). A placa foi pré-revestida com o anticorpo bovino de TSH. TSH apresentam na amostra so adicionados e ligam aos anticorpos revestidos nos poços. E o anticorpo bovino ento biotinylated de TSH é adicionado e liga a TSH na amostra. Ento Streptavidin-HRP é adicionado e liga ao anticorpo de Biotinylated TSH. Após a incubaço Streptavidin-HRP desatado é lavado afastado durante uma etapa de lavagem. A soluço da carcaça é adicionada ento e a cor torna-se em proporço quantidade de TSH bovino. A reaço é terminada pela adiço de ácido para a soluço e a absorvência é medida em 450 nanômetro.

 

Coleço de espécime

O soro permite que o soro coagule por 10-20 minutos na temperatura ambiente. Centrifugador em 2000-3000 RPM por 20 minutos.

 

O plasma recolhe o plasma usando o EDTA ou a heparina como um anticoagulante. Centrifugue amostras por 15 minutos em 2000-3000 RPM em 2 - 8°C dentro de 30 minutos da coleço.

 

A urina recolhe pelo tubo estéril. Centrifugador em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Ao recolher o líquido fluido e cerebrospinal pleuroperitoneal, siga por favor os procedimentos acima mencionados.

 

O Supernatant da cultura celular recolhe pelos tubos estéreis ao examinar segregue componentes. Centrifugue em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Recolha os supernatants com cuidado. Ao examinar os componentes dentro da pilha, use PBS (pH 7.2-7.4) para diluir a suspenso da pilha concentraço da pilha de aproximadamente 1 million/ml. Danifique pilhas através dos ciclos repetidos da gelo-aproximaço amigável para deixar para fora os componentes internos. Centrifugue em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.

 

O tecido outros líquidos de corpo enxágua tecidos em PBS (pH 7,4) para remover completamente o sangue adicional e para pesá-lo antes da homogeneizaço. Triture tecidos e homogeneize-os em PBS (pH7.4) com um homogenizador de vidro no gelo. Aproximaço amigável em 2-8°C ou gelo no centrifugador de -20°C. em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.

 

Nota

  • As concentrações da amostra devem ser previstas antes de ser usada no ensaio. Se a concentraço da amostra no está dentro da escala da curva padro, os usuários devem contactar-nos para determinar a amostra ótima para suas experiências particulares.
  • As amostras a ser usadas no prazo de 5 dias devem ser armazenadas nas amostras 2-8°C. devem ser aliquoted ou devem ser armazenadas em -20°C dentro de 1 mês ou em -80°C dentro de 6 meses. Avoid repetiu ciclos da aproximaço amigável do gelo.
  • As amostras devem ser trazidas temperatura ambiente antes de começar o ensaio.
  • Centrifugador para recolher antes de usar a amostra.
  • As amostras que contêm NaN3 no podem ser testadas enquanto inibe a atividade da peroxidase (HRP) do rabanete de cavalo.
  • Recolha os supernatants com cuidado. Quando os sedimentos ocorreram durante o armazenamento, a centrifugaço deve ser executada outra vez.
  • A hemólise pode extremamente impactar a validez dos resultados da análise. Ciao para minimizar a hemólise.

o *Sample no pode ser diluído com este jogo. Devido o ao material nós usamo-nos para preparar o jogo, a interferência de matriz da amostra pode falsamente comprimir a especificidade e a preciso do ensaio.

 

Preparaço do reagente

Todos os reagentes devem ser trazidos temperatura ambiente antes de usar.

O padro reconstitui o 120μl do padro (32mIU/L) com o 120μl do diluente padro para gerar uma soluço 16mIU/L conservada em estoque padro. Permita que o padro sente-se por 15 minutos com agitaço delicada antes de fazer diluições. Prepare pontos padro duplicados em série diluindo a soluço conservada em estoque padro (16mIU/L) 1:2 com o diluente padro para produzir as soluções 8mIU/L, 4mIU/L, 2mIU/L e 1mIU/L. O diluente padro serve como o padro zero (0 mIU/L). Toda a soluço restante deve ser congelada em -20°C e ser usada dentro de um mês. A diluiço das soluções padro sugeridas é como segue:

 

16mIU/LPadro No.5diluente original do padro 120μl + do padro 120μl
8mIU/LPadro No.4padro 120μl diluente do padro No.5 + 120μl
4mIU/LPadro No.3padro 120μl diluente do padro No.4 + 120μl
2mIU/LPadro No.2padro 120μl diluente do padro No.3 + 120μl
1mIU/LPadro No.1padro 120μl diluente do padro No.2 + 120μl

 

Concentraço padroPadro No.5Padro No.4Padro No.3Padro No.2Padro No.1
32mIU/L16mIU/L8mIU/L4mIU/L2mIU/L1mIU/L

 

Amortecedor 20ml diluído da lavagem do concentrado 30x do amortecedor da lavagem no deionized ou água destilada para render 600 ml do amortecedor da lavagem 1x. Se os cristais formaram no concentrado, mistura delicadamente até que os cristais se dissolverem completamente.

 

Procedimento de ensaio

1. Prepare todos os reagentes, soluções padro e amostras como instruídas. Traga todos os reagentes temperatura ambiente antes de usar. O ensaio é executado na temperatura ambiente.

2. Determine o número de tiras exigidas para o ensaio. Introduza as tiras nos quadros para o uso. As tiras no utilizadas devem ser armazenadas em 2-8°C.

3. Adicione o padro 50μl ao padro bem. Nota: No adicione o anticorpo ao padro bem porque a soluço padro contém o anticorpo biotinylated.

4. Adicione a amostra 40μl aos poços da amostra e ento adicione o anti-TSH anticorpo 10μl aos poços da amostra, a seguir adicione o streptavidin-HRP 50μl aos poços da amostra e aos poços padro (poço do controle no vazio). Misture bem. Cubra a placa com um aferidor. Incube 60 minutos em 37°C.

5. Remova o aferidor e lave a placa 5 vezes com amortecedor da lavagem. Embeba poços com pelo menos o amortecedor da lavagem de 0,35 ml para 30 segundos a 1 minuto para cada Washington. Para a lavagem automatizada, aspire todos os poços e lave 5 vezes com o amortecedor da lavagem, enchendo em demasia jorra com amortecedor da lavagem. Borre a placa nas toalhas de papel ou no outro material absorvente.

6. Adicione a soluço A da carcaça 50μl a cada um poço e adicione ento a soluço B da carcaça 50μl a cada um bem. Incube a placa coberta com um aferidor novo por 10 minutos em 37°C na obscuridade.

7. Adicione 50μl param a soluço a cada um bem, a cor azul mudará no amarelo imediatamente.

8. Determine a densidade ótica (valor do OD) de cada um poço que usa imediatamente um grupo do leitor do microplate a 450 nanômetro dentro de 10 minuetos após ter adicionado a soluço da parada.

 

Cálculo de resultado

Construa uma curva padro traçando o OD médio para cada padro no vertical (Y) linha central contra a concentraço no horizontal (X) a linha central e tira uma melhor curva do ajuste através dos pontos no gráfico. Estes cálculos podem melhor ser executados com o software por computador do curva-encaixe e a melhor linha do ajuste pode ser determinada pela análise de regresso.

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Jogo de estimulação do sanduíche ELISA da hormona do tiroide bovino da elevada precisão com 2 horas de tempo do ensaio

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