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Ferritin
Referência: Testes DS177720 96
Uso pretendido
Immunoassay para in vitro a determinaço quantitativa do ferritin no soro humano.
Sumário
O Ferritin é uma macromolécula com um peso molecular pelo menos do
kD 440 (segundo o índice de ferro) e consiste em um escudo da
proteína (apoferritin) de 24 subunidades e de um núcleo de ferro
que contém uma média de aproximadamente 2500 íons de Fe3+ (no
ferritin do fígado e do baço). (1) o Ferritin tende a formar
oligómero, e quando esta presente superior nas pilhas dos órgos do
armazenamento há uma tendência para a condensaço ao hemosiderin
semicrystalline ocorrer nos lisosomas. Pelo menos 20 isoferritins
podem ser distinguidos com o auxílio da focagem isoelétrica. (2)
este microheterogeneity é devido s diferenças nos índices do H
ácido e do L fracamente básico subunidades. Os isoferritins básicos
so responsáveis para a funço a longo prazo do armazenamento do
ferro, e so encontrados principalmente no fígado, no baço, e na
medula. (1, 3) os isoferritins ácidos so encontrados principalmente
no miocárdio, na placenta, e no tecido do tumor. Têm um índice de
ferro mais baixo e presumivelmente a funço como intermediários para
transferência do ferro nas várias sínteses (4, 5, 6) a determinaço
do ferritin é um método apropriado para verificar a situaço do
metabolismo de ferro. A determinaço do ferritin no início da
terapia fornece uma medida representativa das reservas do ferro do
corpo. Uma deficiência do armazenamento no sistema
reticulo-endothelial (RES) pode ser detectada em uma fase inicial
mesma (7) clinicamente, um valor de ponto inicial de 20 μg/L
(ng/mL) provou útil na detecço de deficiência de ferro prelatent.
Este valor fornece uma indicaço segura da exausto das reservas do
ferro que podem ser mobilizadas para a síntese da hemoglobina. A
deficiência de ferro latente é definida como uma queda abaixo do
ponto inicial do ferritin de 12 μg/L (ng/mL). Estes dois valores no
necessitam nenhuma elucidaço mais adicional do laboratório, mesmo
quando a imagem de sangue é ainda morfologicamente normal. Se o
nível deprimido do ferritin é acompanhado de hipocrômico, anemia
microcytal, a seguir a deficiência de ferro manifesta esta
presente. (1) quando o nível do ferritin é elevado e a
possibilidade de uma desordem da distribuiço pode ser ordenada para
fora, esta é uma manifestaço do ferro que sobrecarrega no corpo. o
ferritin de 400 μg/L (ng/mL) é usado como o valor de ponto inicial.
Os valores elevados do ferritin so encontrados igualmente com os
seguintes tumores: leucemia aguda, doença de Hodgkin e carcinoma do
pulmo, dos dois pontos, do fígado e da próstata.
A determinaço do ferritin provou ser do valor na metástase do
fígado. Os estudos indicam que 76% de todos os pacientes com
metástase do fígado têm valores do ferritin acima de 400 μg/L
(ng/mL). As razões para os valores elevados podiam ser necrose da
pilha, eritropoiese obstruída ou síntese aumentada no tecido do
tumor. Dois anticorpos monoclonais do rato - M-4.184 e M-3.170 - so
usados para formar o complexo do sanduíche no ensaio.
Reagentes
Materiais fornecidos
• Microplate revestido, 8 X12 tiras, 96 poços, pré-revestidos com
anti-ferritin do rato.
• Calibradores, 6 tubos de ensaio, 1 ml cada um, prontos para uso;
Concentrações: 0 (A), 20 (B), 50 (C), 100 (D), 300 (E) e 600 (F)
ng/mL.
• O conjugado da enzima, 1 tubo de ensaio, 11 mL de HRP (peroxidase
do armorácio) etiquetou o rato anti-ferritin monoclonal.
• Carcaça, 1 tubo de ensaio, 11ml, pronto para uso,
(tetramethylbenzidine) TMB.
• Pare a soluço, 1 tubo de ensaio, 6,0 ml de 1 mol/l de ácido
sulfúrico.
• Concentrado da soluço da lavagem, 1 tubo de ensaio, 25 ml (40X se
concentrou), soluço da lavagem do PBS-Tween.
• IFU, 1 cópia.
• Tampa da placa: 1 parte.
Materiais exigidos (mas no fornecido)
• Leitor de Microplate com capacidade absorvente do comprimento de
onda 450nm e 620nm.
• Arruela de Microplate.
• Incubadora.
• Abanador da placa.
• Micropipettes e micropipettes multichannel que entregam 50μl com
uma preciso de melhor de 1,5%.
• Papel absorvente.
• Água destilada.