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LH Elisa Kit Luteinizing Hormone
1. Uso pretendido
Immunoassay para in vitro a determinaço quantitativa da hormona luteinizing no soro humano.
2. Sumário
3. Princípio do teste
Princípio do sanduíche. Duraço total do ensaio: 80 minutos.
• A amostra, Anti-LH revestiu microwells e o Anti-LH etiquetado enzima é combinado.
• Durante a incubaço, o LH apresenta na amostra é reservado reagir
simultaneamente com os dois anticorpos, tendo por resultado as moléculas do LH que so
imprensado entre a fase contínua e os anticorpos enzima-ligados.
• Após a lavagem, um complexo é gerado entre a fase contínua, o LH dentro da amostra e anticorpos enzima-ligados por reações imunológicas.
• A soluço da carcaça ento é adicionada e catalisada por este complexo, tendo por resultado uma reaço cromogénea. A reaço cromogénea resultante é medida como a absorvência.
• A absorvência é proporcional quantidade de LH na amostra.
Reagentes
Materiais fornecidos
• Microplate revestido, 8 X12 tiras, 96 poços, pré-revestidos com o rato monoclonal
Anti-LH.
• Calibradores, 6 tubos de ensaio, 1 ml cada um, prontos para uso; Concentrações: 0 (A), 5 (B), 20 (C), 50 (D), 100 (E) e 200 (F) mIU/mL.
• O conjugado da enzima, 1 tubo de ensaio, 11 mL de HRP (peroxidase do armorácio) etiquetou o rato Anti-LH monoclonal no amortecedor Tris-NaCl que contém BSA (albumina de soro bovino). Contém 0,1% preservativos ProClin300.
• Carcaça, 1 tubo de ensaio, 11ml, pronto para uso, (tetramethylbenzidine) TMB.
• Pare a soluço, 1 tubo de ensaio, 6,0 ml de 1 mol/L de ácido sulfúrico.
• Concentrado da soluço da lavagem, 1 tubo de ensaio, 25 mL (40X se concentrou), PBS-Tween
soluço da lavagem.
• IFU, 1 cópia.
• Tampa da placa: 1 parte.
Materiais exigidos (mas no fornecido)
• Leitor de Microplate com capacidade absorvente do comprimento de onda 450nm e 620nm.
• Arruela de Microplate.
• Incubadora
4. Procedimento de teste
• Use somente o número de poços exigidos e formate os poços dos microplates para
cada calibrador e amostra a ser analisados.
• Adicione o μL 25 dos calibradores ou das amostras a cada poço.
• Adicione o μL 100 do conjugado da enzima a cada poço.
• Agite o microplate delicadamente por 30 segundos para misturar.
• Cubra a placa com uma tampa da placa e incube-a no °C 37 por 60 minutos.
• Rejeite os índices da micro placa pela decantaço ou pela aspiraço. Se
decantando, bata e borre o seco de placa com papel absorvente.
• Adicione o μL 350 da soluço da lavagem, decante-o (torneira e mancha) ou aspire-o. Repita 4 vezes adicionais para um total de 5 lavagens. Uma arruela automatizada da tira do microplate pode ser usada. No fim da lavagem, inverta a placa e bata para fora toda a soluço residual da lavagem no papel absorvente.
• Adicione o μL 100 da carcaça a cada poço.
• Incube na temperatura ambiental (18-25℃) na obscuridade para a reaço por 20 minutos. No agite a placa após a adiço do substate.
• Adicione o μl 50 da soluço da parada a cada poço.
• Agite por 15-20 segundos para misturar o líquido dentro dos poços. É importante para
assegure-se de que as mudanças azuis da cor para amarelar completamente.
• Leia a absorvência de cada poço em 450 nanômetro (que usam 620 a 630 nanômetro como
comprimento de onda da referência para minimizar imperfeições boas) em um micro leitor da placa.