96 jogos de Elisa Test Human Ferritin Elisa do Ferritin do FE de Wells

Ferritin humano, FE ELISA Kit

Materiais fornecidos com o jogo

Procedimento

Diluiço dos padrões

os poços 1.Ten so ajustados para padrões em um stripplate de Microelisa. Em bem 1 e bem em 2, a soluço 100μl padro e o amortecedor padro da diluiço 50μl so adicionados e misturados bem. Em bem 3 e bem em 4, a soluço 100μl de bem 1 e 2 é adicionada bem respectivamente. Ento o amortecedor padro da diluiço 50μl é adicionado e misturado bem. a soluço 50μl é rejeitada do poço 3 e bem 4. Em bem 5 e bem em 6, a soluço 50μl de bem 3 e 4 é adicionada bem respectivamente. Ento o amortecedor padro da diluiço 50μl é adicionado e misturado bem. Em bem 7 e bem em 8, a soluço 50μl de bem 5 e 6 é adicionada bem respectivamente. Ento o amortecedor padro da diluiço 50μl é adicionado e misturado bem. Em bem 9 e bem em 10, a soluço 50μl de bem 7 e 8 é adicionada bem respectivamente. Ento o amortecedor padro da diluiço 50μl é adicionado e misturado bem. a soluço 50μl é rejeitada do poço 9 e bem 10. Após a diluiço, o volume total em todos os poços é 50μl e as concentrações so 24ng/ml, 16 ng/ml, 8 ng/ml, 4ng/ml e 2ng/ml, respectivamente.

2. No stripplate de Microelisa, deixe um poço vazio como o controle vazio. Em poços da amostra, o amortecedor da diluiço da amostra 40μl e a amostra 10μl é adicionado (o fator da diluiço é 5). As amostras devem ser carregadas na parte inferior sem tocar na parede boa. Misture bem com a agitaço delicada.

3. Incubaço: incube o minuto 30 em 37℃ após selado com a membrana da placa de fechamento.

4. Diluiço: dilua o amortecedor de lavagem concentrado com a água destilada (30 vezes para 96T e 20 vezes para 48T).

5. Lavagem: descasque com cuidado fora a membrana da placa de fechamento, aspire-a e reencha-a com a soluço da lavagem. Rejeite a soluço da lavagem após o descanso por 30 segundos. Repita o procedimento de lavagem por 5 vezes.

6. Adicione o reagente do HRP-conjugado de 50 μl a cada poço exceto o controle vazio bem.

7. Incubaço como descrito em etapa 3.

8. Lavagem como descrito em etapa 5.

9. Coloraço: Adicione a soluço A do cromogêneo de 50 μl e a soluço B a cada poço, mistura do cromogêneo de 50 μl com delicadamente agitaço e incube-os em 37℃ por 15 minutos. Evite por favor a luz durante a coloraço.

10. Terminaço: adicione 50 que o μl para a soluço a cada poço para terminar a reaço. A cor no poço deve mudar do azul para amarelar.

11. A absorvência lida O.D. em 450nm usando um leitor da placa de Microtiter. O valor do OD do controle vazio é ajustado bem como zero. O ensaio deve ser realizado dentro de 15 minutos após a adiço para a soluço.

Preciso

preciso do Intra-ensaio (preciso dentro de um ensaio): 3 amostras com o baixo, Ferritin humano médio e de nível elevado (FE) foram testadas 20 vezes em uma placa, respectivamente.

preciso do Inter-ensaio (preciso entre ensaios): 3 amostras com o baixo, Ferritin humano médio e de nível elevado (FE) foram testadas em 3 placas diferentes, 8 replicates em cada placa.

CV (%) = SD/meanX100

Intra-ensaio: CV<10>

Inter-ensaio: CV<12>

Escala do ensaio

0.4ng/ml-25ng/ml

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