Método Murine de Kit Mouse Interferon Gamma Sandwich do teste da gama RUO de Ifn

Γ da interferona do rato; Gama da interferona; IFN-γ; IFN-gama; IFNG; ELISA Kit

Para in vitro a determinaço quantitativa de concentrações do γ da interferona (IFN-γ) no soro do rato, no plasma, nos meios de cultura ou em algum líquido biológico.

Princípio

Este jogo de ELISA usa o sanduíche-ELISA como o método. O stripplate de Microelisa fornecido neste jogo foi pré-revestido com um anticorpo específico a IFN-γ. Os padrões ou as amostras so adicionados aos poços apropriados do stripplate de Microelisa e combinaram ao anticorpo específico. Ento uma peroxidase do armorácio (HRP) - anticorpo conjugado específico para IFN-γ é adicionada a cada stripplate de Microelisa bem e incubada. Os componentes livres so lavados afastado. A soluço da carcaça de TMB é adicionada a cada poço. Somente aqueles poços que contêm IFN-γ e o anticorpo conjugado HRP de IFN-γ parecero azuis na cor e giraro ento amarelo após a adiço da soluço da parada. A densidade ótica (OD) é medida spectrophotometrically em um comprimento de onda de 450 nanômetro. O valor do OD é proporcional concentraço de IFN-γ. Você pode calcular a concentraço de IFN-γ nas amostras comparando o OD das amostras curva padro.

Materiais fornecidos com o jogo

• Diluiço dos padrões

Dez poços so ajustados para padrões em um stripplate de Microelisa. Em bem 1 e bem em 2, a soluço 100μl padro e o amortecedor padro da diluiço 50μl so adicionados e misturados bem. Em bem 3 e bem em 4, a soluço 100μl de bem 1 e 2 é adicionada bem respectivamente. Ento o amortecedor padro da diluiço 50μl é adicionado e misturado bem. a soluço 50μl é rejeitada do poço 3 e bem 4. Em bem 5 e bem em 6, a soluço 50μl de bem 3 e 4 é adicionada bem respectivamente. Ento o amortecedor padro da diluiço 50μl é adicionado e misturado bem. Em bem 7 e bem em 8, a soluço 50μl de bem 5 e 6 é adicionada bem respectivamente. Ento o amortecedor padro da diluiço 50μl é adicionado e misturado bem. Em bem 9 e bem em 10, a soluço 50μl de bem 7 e 8 é adicionada bem respectivamente. Ento o amortecedor padro da diluiço 50μl é adicionado e misturado bem. a soluço 50μl é rejeitada do poço 9 e bem 10. Após a diluiço, o volume total em todos os poços é 50μl e as concentrações so 180 pg/ml, 120pg/ml, 60 pg/ml, 30pg/ml e 15 pg/ml, respectivamente.

Cálculo de resultados

As concentrações conhecidas do padro de IFN-γ do rato e de sua leitura correspondente OD so traçadas na escala do log (x-linha central) e na escala do log (y-linha central) respectivamente. A concentraço de rato IFN-γ na amostra é determinada pelo traço o O.D. da amostra na Y-linha central. A concentraço original é calculada multiplicando o fator da diluiço.

Preciso

preciso do Intra-ensaio (preciso dentro de um ensaio): 3 amostras com o baixo, rato médio e de nível elevado IFN-γ foram testadas 20 vezes em uma placa, respectivamente.

preciso do Inter-ensaio (preciso entre ensaios): 3 amostras com o baixo, rato médio e de nível elevado IFN-γ foram testadas em 3 placas diferentes, 8 replicates em cada placa.

CV (%) = SD/meanX100

Intra-ensaio: CV<10>

Inter-ensaio: CV<12>

Escala do ensaio

3pg/ml-200 pg/ml

Sensibilidade:

0.8pg/ml

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