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Jogo do teste de Trichothecenes (T-2) ELISA para o arroz 96 Wells/jogo do amendoim da alimentaço
1. Princípio
Este jogo do teste é baseado no immunoassay competitivo da enzima
para a detecço de Trichothecenes (T-2). O antígeno de acoplamento é
pré-revestido nas micro-bem listras. O Trichothecenes (T-2) na
amostra e os antígenos de acoplamento pré-revestidos nas micro-bem
listras competem para os anti anticorpos de Trichothecenes (T-2).
Depois que a adiço do conjugado da enzima, a carcaça de TMB é
adicionada para a coloraço. O valor da densidade ótica (OD) da
amostra tem uma correlaço negativa com o Trichothecenes (T-2) na
amostra. Este valor é comparado curva padro e os resíduos de
Trichothecenes (T-2) so obtidos subseqentemente.
2. Especificações técnicas
Sensibilidade: 0,05 ppb
Temperatura da incubadora: 25℃
Tempo da incubadora: 30min~15min
Limite de detecço:
Alimentaço, amendoim, arroz 3ppb
Taxa da reaço cruzada:
Trichothecenes (T-2) 100%
Taxa de recuperaço:
Alimentaço, arroz 90±25%
Amendoim 85±25%
3. Componentes
1 | Micro-bem tiras | 12 tiras com os 8 poços removíveis cada | |
2 | soluço 6× padro (1 mL cada um) | 0ppb | 0.05ppb |
0.15ppb | 0.45ppb | ||
1.35ppb | 4.05ppb | ||
3 | Conjugado da enzima | 7ml | tampo vermelho |
4 | Soluço de funcionamento do anticorpo | 7ml | tampo azul |
5 | Carcaça A | 7ml | tampo branco |
6 | SubstrateB | 7ml | tampo preto |
7 | Pare a soluço | 7ml | tampo amarelo |
8 | 20× concentrou o amortecedor de lavagem | 15ml | tampo branco |
9 | 5× concentrou redissolving a soluço | 50ml*2 | tampo transparente |
4. Materiais exigidos mas no fornecidos
1) Equipamento: ELISA Reader (450 nm/630nm), homogenizador, abanador,
centrifugador, equilíbrio: 0.01g quantidade sensível, dispositivo
da nitrogênio-secagem, incubadora, pipeta graduadas, impressora
2) Micropipettes: monocanal 20ml ~ 200ml, 100ml ~ 1000ml, μl do
multi-canal 30~300
3) Reagentes: Metanol.
5. Pré-tratamento da amostra
Instruções (os seguintes pontos devem ser tratados antes do
pré-tratamento)
1) Somente as pontas descartáveis podem ser usadas para as
experiências e as pontas devem ser mudadas quando usadas para
absorver reagentes diferentes;
2) Antes da experiência, cada utensílio experimental deve estar
limpo e deve re-ser limpado caso necessário, a fim evitar a
contaminaço que interfere com os resultados experimentais.
Preparaço da soluço antes do pré-tratamento da amostra:
1) Soluço de Sampleredissolving
Use de 1 partes (5X) do concentrado redissolving a soluço e para
dissolver-se com o de 4 partes da água deionized para obter a
amostra pronto para uso que redissolving a soluço.
2) Soluço do extrato de amostra
Use de 1 partes do metanol e dissolva-o com a 1 porço da amostra
que redissolving a soluço para obter a soluço pronto para uso do
extrato de amostra.
Preparaço da alimentaço, amendoim, amostra do arroz
1) A tomada 1.0±0.05g grinded a amostra no tubo de centrifugador
50ml, adiciona a soluço do extrato de amostra 5ml, agitaço para
3min, centrifugador acima de 4000r/min em 20℃ para o minuto 10;
2) Tome o supernatant 100ul (acima-camada), adicione a amostra
400ul que redissolving a soluço, agite- uniformemente;
3) Tome 50μl para testar
Fator da diluiço: 25
6. Procedimentos de ELISA
6,1 instruções
1) Traga reagentes de ELISA temperatura ambiente (20 - °C) 25 antes de
usar.
2) Reagentes postos de ELISA de volta ao ℃ 2-8 imediatamente depois do
uso
3) A reprodutibilidade de ELISA no processo da análise é depende pela
maior parte da consistência da placa de lavagem, a operaço de
lavagem correta da placa é o ponto do programa da determinaço ELISA
4) Em todo o processo de incubaço da temperatura constante, evite a
exposiço luz, selo o microplate com a membrana da tampa.
6. 2 procedimentos da operaço
1) Traga o jogo do teste ao minuto 30 da temperatura ambiente (℃
20-25) no mínimo, note que cada reagente deve ser agitado
uniformemente antes de usar;
2) Põe as micro-bem tiras exigidas em quadros da placa. Re-selou o
microplate no utilizado, armazenado no ℃ 2-8, no congelado.
3) Preparaço da soluço: tome o amortecedor concentrado 20× da lavagem
15ml, dissolva-o com água deionized no 1:19 (amortecedor
concentrado 20× de 1 partes da lavagem + 19 porções da água
deionized), ou prepare-o como a quantidade necessária.
4) Numeraço: número os micro-poços de acordo com amostras e a soluço
padro; cada amostra e soluço padro devem ser executadas em
duplicado; grave suas posições.
5) Adicione o padro/amostra: Adicione o µL 50 da amostra ou a soluço
padro em poços duplicados separados, a seguir adicione o conjugado
da enzima, 50 µL/well; ento soluço de funcionamento do anticorpo,
50 µL/well. Misture delicadamente agitando a placa manualmente,
selo o microplate com a membrana da tampa, incube o °C at25 para o
minuto 30 na obscuridade.
6) Microplate da lavagem: Abra com cuidado o membrance da tampa,
derramam o líquido fora do microwell; adicione 250 µL/well do
amortecedor da lavagem, lave-os inteiramente por 4-5 vezes, 15-30 s
cada vez, a seguir remova-os e bata-os para secar com papel
absorvente. (Use lança no utilizada para perfurar a bolha após
seco)
7) Coloraço: adicione o µL 50 da soluço da carcaça A ento soluço de 50
µL B em cada poço. Misture delicadamente agitando a placa
manualmente, °C do andincubate at25 para 15minin a obscuridade para
a coloraço.
8) Determinaço: adicione 50 que o µL do para a soluço em cada poço.
Misture delicadamente agitando a placa manualmente. Ajuste o
comprimento de onda do leitor do microplate em 450 nanômetro para
determinar o valor do OD de cada poço. (Recomende ler o valor do OD
no duplo-comprimento de onda 450/630 de nanômetro dentro do minuto
5).
7. Julgamento do resultado
Há dois métodos para julgar os resultados; primeiro é o julgamento
áspero, quando o segundo for a determinaço quantitativa. Nota que o
valor do OD da amostra tem uma correlaço negativa com o
Trichothecenes (T-2) na amostra
7,1 determinaço qualitativa
A escala de concentraço (ppb) pode ser obtida pelo comparado o
valor médio da absorvência com os padrões. Supõe que valor da
absorvência da amostra uma é 0,3, a amostra dois é 1,0, e os
padrões so: 0ppb de 2,243; 0.05ppb de 1,816; 0.15ppb de 1,415;
0.45ppb de 0,74; 1.35ppb de 0,313; 4.05ppb de 0,155. Ento a
concentraço da amostra uma está na escala de 1.35ppb ~ 4.05ppb; A
amostra dois é 0.15ppb ~ 0.45ppb. A escala de concentraço de
Trichothecenes (T-2) nas amostras pode ser obtida pelo multiplicado
pela diluiço correspondente da amostra.
7. análise 2 quantitativa
A fim calcular a concentraço de amostras, uma curva padro deve ser
feita. Antes que a curva padro esteja feita, o conceito de % da
absorvência deve ser saber.
Cálculo de % da absorvência:
Porcentagem do valor da absorvência = | B | ×100% |
B0 |
Valor do OD da média de B-the da amostra ou da soluço padro
Valor do OD da média de B0-the das 0 soluções padro de ng/mL
O padro zero é feito assim igual a 100% e os valores da absorvência
so citados nas porcentagens. Os valores calcularam para os padrões
so entrados em um sistema de coordenadas no papel de gráfico
semilogarithmic contra o a concentraço de Trichothecenes (T-2)
[ng/mL]. A concentraço de Trichothecenes (T-2) em ng/mL que
corresponde absorvência de cada amostra pode ser lida da curva de
calibraço.
Um software especial para a análise do resultado de ELISA
facilitará determinações dobro ou múltiplas. Se você precisa, chame
por favor para pedir.
8. Precauções
1) A temperatura ambiente abaixo do ℃ 25 ou a temperatura dos
reagentes e das amostras que no esto sendo retornados temperatura
ambiente (℃ 20-25) conduziro a um valor padro mais baixo do OD.
2) A seca do microplate no processo de lavagem será acompanhada das
situações que incluem as curvas padro no-lineares e a
reprodutibilidade indesejável; Continue assim ao passo seguinte
imediatamente depois da lavagem.
3) Misture uniformemente antes de adicionar algum reagente.
4) A soluço da parada é a soluço ácida sulfúrica de 2 M, evita
contactar com a pele.
5) No use o jogo que excede sua data de expiraço. O uso de reagentes
diluídos ou adulterados dos jogos conduzirá s mudanças na
sensibilidade e nos valores de detecço do OD. No troque os
reagentes dos jogos de números de lote diferentes para usar-se.
6) Armazenamento: loja no ℃ 2-8, no congelado. Põe o microplate no
utilizado em um saco da auto-selagem ao re-selo ele. A substncia
padro e a cor incolor anteriores so sensíveis luz, e assim no pode
diretamente ser exposta luz.
7) Rejeite a soluço da coloraço com toda a cor que indicar a
degeneraço desta soluço. O valor de detecço (450/630nm) das 0
soluções padro (0 ppb) de menos de 0,5 ((A450nm<0> 8) a temperatura a melhor da reaço é 25℃, e as temperaturas
demasiado altas ou demasiado baixas conduziro s mudanças na
sensibilidade de detecço e em valores do OD.
9. Data do armazenamento e de expiraço
Armazenamento: loja no ℃ 2-8, no congelado.
Data de expiraço: 12 meses; a data da produço está na caixa.
Nota: Se o pacote do vácuo do microplate tem o escapamento, é ainda
válido usar-se, no afeta o resultado da análise, seja relaxar para
usar-se.
Q1: Quanto tempo tomará para que você envie?
A1: Geralmente navios dentro de 7 dias de trabalho.
Q2: Você apoia OEM/ODM?
A2: pode ser apoiado. Nós podemos personalizar de acordo com suas
necessidades específicas e quantidades específicas.
Q3: Como sua fábrica está fazendo em termos do controle da
qualidade?
A3: Nós temos a certificaço ISO9001 e ISO13485 a certificaço, até
agora todo o processo de produço, nós temos regras padro, nós
cumprimos com o comportamento e as leis relevantes do governo.
Q4: O serviço pós-venda é garantido?
A4: Nós proporcionamos o serviço pós-venda técnico em linha
profissional. Se o produto falha durante a experiência, nós podemos
fornecer
orientaço linear através do telefone, do vídeo e dos outros
formulários.
Q5: Que é sua quantidade de ordem mínima?
A5: 1Kit.
Q6: Que é o método de envio?
A6: Pode ser enviado por expresso (FEDEX, UPS, DHL, EMS, etc.) ou
pelo ar e pela terra. Confirme por favor connosco antes de colocar
uma ordem.