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Zearalenone ELISA Test Kit para o milho 96 Wells/Kit Sensitivity da alimentaço 0,1 ppb
1. Princípio
Este jogo do teste é baseado no immunoassay competitivo da enzima
para a detecço de Zearalenone. O antígeno de acoplamento é
pré-revestido nas micro-bem listras. O Zearalenone na amostra e os
antígenos de acoplamento pré-revestidos nas micro-bem listras
competem para os anti anticorpos de Zearalenone. Depois que a adiço
do conjugado da enzima, a carcaça de TMB é adicionada para a
coloraço. O valor da densidade ótica (OD) da amostra tem uma
correlaço negativa com o Zearalenone na amostra. Este valor é
comparado curva padro e os resíduos de Zearalenone so obtidos
subseqentemente.
2. Especificações técnicas
Sensibilidade: 0,1 ppb
Temperatura da incubadora: 25℃
Tempo da incubadora: 30min~15min
Limite de detecço:
Alimentaço 10ppb
Arroz, milho, amendoim 5ppb
Taxa da reaço cruzada:
Zearalenone 100%
Taxa de recuperaço:
Alimentaço, arroz, amendoim, milho 100±30%
3. Componentes
1 | Micro-bem tiras | 12 tiras com os 8 poços removíveis cada | |
2 | soluço 6× padro (1 mL cada um) | 0 ppb | 0,1 ppb |
0,3 ppb | 0,9 ppb | ||
ppb 2,7 | ppb 8,1 | ||
3 | Conjugado da enzima | 7 ml | tampo vermelho |
4 | Soluço de funcionamento do anticorpo | 7 ml | tampo azul |
5 | Carcaça A | 7 ml | tampo branco |
6 | SubstrateB | 7 ml | tampo preto |
7 | Pare a soluço | 7 ml | tampo amarelo |
8 | 20X concentrou o amortecedor de lavagem | 40 ml | tampo branco |
9 | 2X concentrou redissolving a soluço | 50 ml | tampo transparente |
4. Materiais exigidos mas no fornecidos
1) Equipamento: ELISA Reader (450 nm/630nm), homogenizador, abanador,
centrifugador, equilíbrio: 0.01g quantidade sensível, dispositivo
da nitrogênio-secagem, incubadora, pipeta graduadas, impressora
2) Micropipettes: monocanal 20l ~ 200l, 100l ~ 1000l, μl do
multi-canal 30~300
3) Reagentes: Metanol, n-hexano.
5. Pré-tratamento da amostra
Instruções (os seguintes pontos devem ser tratados antes do
pré-tratamento)
1) Somente as pontas descartáveis podem ser usadas para as
experiências e as pontas devem ser mudadas quando usadas para
absorver reagentes diferentes;
2) Antes da experiência, cada utensílio experimental deve estar
limpo e deve re-ser limpado caso necessário, a fim evitar a
contaminaço que interfere com os resultados experimentais.
Preparaço da soluço antes do pré-tratamento da amostra:
No. 1 da soluço: Prove redissolving
O 2×concentrated que redissolving a soluço é diluído com água
deionized no 1:1 (soluço redissolving concentrada de 1 partes +
água deionized de 1 partes), usado para redissolving da amostra.
No. 2 da soluço: Soluço do extrato de amostra
7 porções do metanol + 3 porções da água deionized para obter a
soluço pronto para uso do extrato de amostra.
Preparaço das amostras
5,1 preparaço da amostra da alimentaço
1) Tome 1.0±0.05g grinded a amostra da alimentaço no tubo de
centrifugador 50ml, adicionam a soluço do extrato de amostra 5ml;
2) Agite completamente para 3min (ou para agitar mo para acima de
5min), centrifugador acima de 4000r/min em 20℃ para o minuto 10;
3) Tome o supernatant 50ul (acima-camada), adicione a amostra 950ul
que redissolving, agite- uniformemente;
4) Tome 50μl para testar
Fator da diluiço: 100
Nota: se a concentraço do resíduo da droga na amostra é fora da
escala da curva, a amostra pode mais ser diluída para o teste (por
exemplo: tome o supernatant 50ul (acima-camada) em um tubo de
centrifugador novo, adicione 1450ul deionized a água, o fator da
diluiço é 150).
5.2Preparation do milho, amostra do arroz
1) Tome 1.0±0.05g grinded a amostra no tubo de centrifugador 50ml;
adicione a soluço do extrato de amostra 5ml;
2) Agite completamente para 3min (ou para agitar mo para acima de
5min), centrifugador acima de 4000r/min em 20℃ para o minuto 10;
3) Tome o supernatant 100ul (acima-camada), adicione a amostra
900ul que redissolving, agite- uniformemente;
4) Tome 50μl para testar
Fator da diluiço: 50
Nota: Se a concentraço do resíduo da droga da amostra é fora da
escala da curva, a amostra pode mais ser diluída para o teste (por
exemplo: tome o supernatant 50ul (acima-camada) em um tubo de
centrifugador novo, adicione a água deionized 950, o fator da
diluiço é 100).
5.3Preparation da amostra do amendoim
1) Tome 1.0±0.05g grinded a amostra do amendoim no tubo de
centrifugador 50ml; adicione a soluço do extrato de amostra 5ml, a
seguir adicione o n-hexano 4ml;
2) Agite completamente para 3min (ou para agitar mo para acima de
5min), centrifugador acima de 4000r/min em 20℃ para o minuto 10;
3) Rejeite o líquido claro da acima-camada, tome o líquido da
médio-camada 100ul, adicione a amostra 900ul que redissolving,
agite- uniformemente;
4) Tome 50μl para testar
Fator da diluiço: 50
Nota: Se a concentraço do resíduo da droga da amostra é fora da
escala da curva, a amostra pode mais ser diluída para o teste (por
exemplo: tome o líquido da médio-camada 50ul em um tubo de
centrifugador novo, adicione a água deionized 950, o fator da
diluiço é 100).
6. Procedimentos de ELISA
6,1 instruções
1. traga reagentes de ELISA temperatura ambiente (20 - °C) 25 antes
de usar.
2. põe reagentes de ELISA de volta ao ℃ 2-8 imediatamente depois do
uso
3. A reprodutibilidade de ELISA no processo da análise é depende
pela maior parte da consistência da placa de lavagem, a operaço de
lavagem correta da placa é o ponto do programa da determinaço ELISA
4. Em todo o processo de incubaço da temperatura constante, evite a
exposiço luz, selo o microplate com a membrana da tampa.
6,2 procedimentos da operaço
1. Põe o jogo na temperatura ambiente (20-25°C) no mínimo 30
minutos, notam que cada reagente deve ser agitado bem antes de
usar;
2. lugar as tiras desejadas do microwell no quadro da placa. Os
microplates no utilizados devem ser resealed e armazenado em 2-8°C,
no congelado.
3. preparaço da soluço: Tome 40ml de 20× concentrou o amortecedor
de lavagem e para dissolvê-lo na água deionized em uma relaço do
1:19 (de 1 partes do amortecedor concentrado 20× da lavagem + 19
porções da água deionized), ou preparam-se como necessário.
4. numeraço: Numere os microwells de acordo com as amostras e as
soluções padro; cada amostra e soluço padro devem ser feitas em
duplicado; grave suas posições.
5. adicione o padro/amostra: Adicione o µL 50 da amostra ou da
soluço padro para separar poços dobro, a seguir adicione o
conjugado da enzima, 50 µL/well; ento soluço de funcionamento do
anticorpo, 50 µL/well. Misture delicadamente agitando a placa mo, o
selo o microplate com um filme da tampa, e incube no °C 25 para o
minuto 30 na obscuridade.
6. lavagem o microplate: Abra com cuidado o filme da tampa e
derrame para fora o líquido no microwell; adicione 250 µL/well do
amortecedor da lavagem, lave completamente 4-5 vezes para 15-30 s
cada vez, remova-as ento com a pancadinha de papel absorvente seca.
(Picar as bolhas de ar com uma lança no utilizada após a secagem)
7. desenvolvimento da cor: Adicione o µL 50 da soluço da carcaça
cada poço, seguido pelo µL 50 da soluço B. Mistura delicadamente
agitando a placa mo e incube-o para o minuto 15 no °C 25 na
obscuridade para manchar.
8. ensaio: Adicione o µL 50 da soluço da parada a cada poço.
Misture delicadamente agitando a placa mo. Ajuste o comprimento de
onda do leitor do microplate a 450 nanômetro para determinar o
valor do OD de cada poço. (Se recomenda ler valores do OD em
comprimentos de onda duplos 450/630 de nanômetro dentro de 5
minutos).
7. Julgamento do resultado
Há dois métodos para julgar os resultados; primeiro é o julgamento
áspero, quando o segundo for a determinaço quantitativa. Nota que o
valor do OD da amostra tem uma correlaço negativa com o Zearalenone
na amostra
7,1 determinaço qualitativa
A escala de concentraço (ppb) pode ser obtida pelo comparado o
valor médio da absorvência com os padrões. Supõe que valor da
absorvência da amostra uma é 0,3, a amostra dois é 1,0, e os
padrões so: 0ppb de 2,243; 0.1ppb de 1,816; 0.3ppb de 1,415; 0.9ppb
de 0,74; 2.7ppb de 0,313; 8.1ppb de 0,155. Ento a concentraço da
amostra uma está na escala de 2.7ppb ~ 8.1ppb; A amostra dois é
0.3ppb ~ 0.9ppb. A escala de concentraço de Zearalenone nas
amostras pode ser obtida pelo multiplicado pela diluiço
correspondente da amostra.
7. análise 2 quantitativa
A fim calcular a concentraço de amostras, uma curva padro deve ser
feita. Antes que a curva padro esteja feita, o conceito de % da
absorvência deve ser saber.
Cálculo de % da absorvência:
Porcentagem do valor da absorvência = | B | ×100% |
B0 |
Valor do OD da média de B-the da amostra ou da soluço padro
Valor do OD da média de B0-the das 0 soluções padro de ng/mL
O padro zero é feito assim igual a 100% e os valores da absorvência
so citados nas porcentagens. Os valores calcularam para os padrões
so entrados em um sistema de coordenadas no papel de gráfico
semilogarithmic contra o a concentraço de Zearalenone [ng/mL]. A
concentraço de Zearalenone em ng/ml que corresponde absorvência de
cada amostra pode ser lida da curva de calibraço.
Um software especial para a análise do resultado de ELISA
facilitará determinações dobro ou múltiplas. Se você precisa, chame
por favor para pedir.
8. Precauções
1. A temperatura ambiente abaixo do ℃ 25 ou a temperatura dos
reagentes e das amostras que no esto sendo retornados temperatura
ambiente (℃ 20-25) conduziro a um valor padro mais baixo do OD.
2. a seca do microplate no processo de lavagem será acompanhada das
situações que incluem as curvas padro no-lineares e a
reprodutibilidade indesejável; Continue assim ao passo seguinte
imediatamente depois da lavagem.
3. mistura uniformemente antes de adicionar algum reagente.
4. A soluço da parada é a soluço ácida sulfúrica de 2 M, evita
contactar com a pele.
5. No use o jogo que excede sua data de expiraço. O uso de
reagentes diluídos ou adulterados dos jogos conduzirá s mudanças na
sensibilidade e nos valores de detecço do OD. No troque os
reagentes dos jogos de números de lote diferentes para usar-se.
6. armazenamento: loja no ℃ 2-8, no congelado. Põe o microplate no
utilizado em um saco da auto-selagem ao re-selo ele. A substncia
padro e a cor incolor anteriores so sensíveis luz, e assim no pode
diretamente ser exposta luz.
7. rejeite a soluço da coloraço com toda a cor que indicar a
degeneraço desta soluço. O valor de detecço (450/630nm) das 0
soluções padro (0 ppb) de menos de 0,5 ((A450nm<0> 8. A temperatura a melhor da reaço é o ℃ 25, e as temperaturas
demasiado altas ou demasiado baixas conduziro s mudanças na
sensibilidade de detecço e em valores do OD.
9. Data do armazenamento e de expiraço
Armazenamento: loja no ℃ 2-8, no congelado.
Data de expiraço: 12 meses; a data da produço está na caixa.
Nota: Se o pacote do vácuo do microplate tem o escapamento, é ainda
válido usar-se, no afeta o resultado da análise, seja relaxar para
usar-se.
Q1: Quando será enviado?
A1: Nós enviaremos os bens para você o mais cedo possível dentro de
7 dias de trabalho após ter recebido o pagamento. (Em caso dos
fatores externos tais como a epidemia, a entrega pode ser atrasada)
Q2: Apoia OEM/ODM?
A2: Pode ser apoiado, mas a quantidade específica precisa de ser
mais de 100.000 partes, que é conveniente para produtos
personalizados.
Q3: Como sua fábrica está fazendo em termos do controle da
qualidade?
A3: Nós certificamos nacionalmente ISO9001 e ISO13485. Nosso
processo de produço conforma-se aos procedimentos padro para
assegurar a qualidade de produto a melhor.
Q4: Como proporcionar o serviço pós-venda?
A4: Nós proporcionamos o serviço pós-venda técnico em linha
profissional. Nós podemos fornecê-lo a orientaço cara-a-cara
através do vídeo, do telefone, etc.
Q5: Que é o método do pagamento?
A5: Nós recebemos o pagamento por T/T.
Q6: Como enviar?
A6: Escolha o melhor método de envio para você obtendo citações de
nossos muitos portadores cooperativos, e igualmente de navio de
acordo com suas exigências.