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Olaquindox ELISA Test Kit para o pato 96 Wells/Kit Sensitivity da carne de porco da galinha 0,2 ppb
1. Princípio
Este jogo do teste é baseado no immunoassay competitivo da enzima
para o ofOlaquindox da detecço na amostra. Os antígenos de
acoplamento so pré-revestidos nas micro-bem listras. TheOlaquindox
na amostra e os antígenos de acoplamento pré-revestidos nas
micro-bem listras competem para o anti-Olaquindox anticorpo. Depois
que a adiço do conjugado da enzima, a carcaça de TMB é adicionada
para a coloraço. O valor da densidade ótica (OD) da amostra tem uma
correlaço negativa com o Olaquindox nele. Este valor é comparado
curva padro e a concentraço de Olaquindox é obtida subseqentemente.
2. Especificações técnicas
Sensibilidade: 0,2 ppb
Temperatura da incubadora: 37℃
Tempo da incubadora: 30min~30min~15min
Limite de detecço:
Carne de porco, ppb da galinha 0,2
Ppb suíno do fígado 1
Alimentaço 20ppb
Taxa da reaço cruzada:
Olaquindox100%
Carbadox<7>
Taxa de recuperaço:
Tissue95%±25%
Feed70%±20%
3. Componentes
1 | Micro-bem tiras | 12 tiras com os 8 removíveis poços cada | |
2 | soluço 6× padro (1 mL cada um) | 0ppb | 0.2ppb |
0.6ppb | 1.8ppb | ||
5.4ppb | 16.2ppb | ||
3 | Conjugado da enzima | 12ml | tampo vermelho |
4 | Soluço de funcionamento do anticorpo | 7ml | tampo azul |
5 | Carcaça A | 7ml | tampo branco |
6 | SubstrateB | 7ml | tampo preto |
7 | Pare a soluço | 7ml | tampo amarelo |
8 | 20× concentrou o amortecedor de lavagem | 40ml | tampo branco |
9 | 2× concentrou redissolving a soluço | 50ml | tampo transparente |
4. Materiais exigidos mas no fornecidos
1) Equipamentos: o leitor do microplate (450nm/630nm), homogenizador,
oscilador, centrifugador, medindo introduz com pipeta, dispositivo
da nitrogênio-secagem e equilíbrio (uma sensibilidade recíproca de
0,01 g), incubadora.
2) Micropipettors: monocanal 20 a 200µL e 100 a 1000µL e a
multi-canal 30~300µl;
3) Reagentes: Acetonitrilo, N-hexano, Al2O3
5. Pré-tratamento da amostra
Instruções
Os seguintes pontos devem ser tratados antes do pré-tratamento do
tipo da amostra:
1) Somente as pontas descartáveis podem ser usadas para as
experiências e as pontas devem ser mudadas quando usadas para
absorver reagentes diferentes;
2) Antes da experiência, cada utensílio experimental deve ser
verificado para estar limpo e deve re-ser limpado caso necessário,
a fim evitar a contaminaço que interfere com os resultados
experimentais.
Preparaço da amostra
1) Soluço de Sampleredissolving: Dilute2× concentrou redissolving a
soluço com água deionized no 1:1
5.1Tissues (galinha, carne de porco/fígado)
1. tome 2± 0.05g da amostra homogeneizada no tubo de centrifugador
50ml, add10mLAcetonitrile (sem água), agitam corretamente for2min.
Centrifugador em above4000r/minuto na temperatura ambiente (20 -
25℃) para 10min.
2. supernatant, sopro a secar com nitrogênio ou ar de Take5mL em
56℃.
3. dissolva o residuesin seco 2mlN-hexane, add1mL da soluço
redissolving diluída, mixthoroughly para 30s, centrifugador em
above4000r/minuto na temperatura ambiente (20-25℃) for5min. Remova
a fase do acima-layerN-hexano.
4. tome a 50 o µL para a análise.
Dobra da diluiço da amostra: 1
5.2Feed
1. pese 1± 0,05 g homogeneizou a amostra no tubo de centrifugador,
adicionam 2gAl2O3, a seguir 5mlAcetonitrile, shakeviolently
for3min, centrifugador em above4000r/minuto em 25℃ for5min;
2. Take50ulsupernatant, mistura com 950ul diluiu redissolving
solutionevenly, toma o líquido da acima-camada 50µL para a análise.
Dobra da diluiço da amostra: 100
6. Procedimentos de ELISA
6,1 instruções
1) Traga todos os reagentes e micro-bem tiras temperatura ambiente
(20-25℃) antes de usar;
2) Retorne todos os reagentes a 2-8℃ imediatamente depois do uso;
3) A reprodutibilidade da análise de ELISA, em grande parte,
depende da consistência da lavagem da placa. A operaço correta do
lavagem da placa é o ponto-chave nos procedimentos de ELISA;
4) Para a incubaço em temperaturas constantes, todas as amostras e
reagentes devem evitar a exposiço luz, e cada microplate deve ser
selado pela membrana da tampa.
6,2 procedimento de funcionamento
1) Remova todos os reagentes exigidos e mantenha-os na temperatura
ambiente (20-25℃) no mínimo 30min. Note que cada reagente deve ser
agitado e misturado bem antes de usar;
2) Tome o quadro desejado da tira e da placa do microwell. Os
microplates no utilizados devem ser resealed e armazenado em 2-8°C;
3) Preparaço da soluço: Os 40 mL diluídos de 20× concentraram o
amortecedor de lavagem com água deionized no 1:19 (de 1 partes do
amortecedor concentrado 20× da lavagem + 19 porções da água
deionized), ou preparam-se como necessário;
4) Numeraço: Numere os microwells de acordo com as amostras e as
soluções padro; cada amostra e soluço padro devem ser feitas em
duplicado; grave suas posições;
5) Adicione o µL 50 da amostra ou da soluço padro para separar
poços, e adicione ento o µL 50 da soluço de trabalho do anticorpo a
cada poço. Agite delicadamente para misturar bem, cubra o
microplate com um filme da tampa, e incube-o em 37°C para o minuto
30;
6) Lave o microplate 4-5 vezes com os 250 µL/well do amortecedor de
lavagem; embeba os poços no amortecedor de lavagem por 15-30
segundos, e a pancadinha seca com o papel absorvente (se alguma
bolha de ar é encontrada após a batida, eliminada com uma ponta
limpa da pipeta));
7) Adicione o µL 100 do conjugado da enzima a cada poço, agitaço e
mistura delicadamente, tampa o microplate com um filme da tampa, e
incube-o em 37°C para o minuto 30; derrame para fora o líquido do
poço, lave o microplate com amortecedor da lavagem, e continue a
pisar 6).
8) Desenvolvimento da cor: Adicione o µL 50 o µL da soluço da
carcaça A e 50 da soluço de B a cada poço. Agite delicadamente e
mistura, e incube em 37°C por 15 minutos na obscuridade para o
desenvolvimento da cor;
9) Ensaio: Adicione o µL 50 da soluço da parada a cada poço. Agite
delicadamente para misturar. Ajuste o comprimento de onda do leitor
do microplate a 450nm para determinar o valor do OD. (Se recomenda
ler o valor do OD no comprimento de onda duplo 450/630nm dentro de
5 minutos).
7. Julgamento do resultado
Há dois métodos para julgar os resultados; primeiro é o julgamento
áspero, quando o segundo for a determinaço quantitativa. Nota que o
valor do OD da amostra tem uma correlaço negativa com o
ofOlaquindox satisfeito.
7,1 determinaço qualitativa
A escala de concentraço (ng/mL) pode ser obtida da comparaço o
valor médio do OD da amostra com o aquele da soluço padro. Supor
que o valor do OD da amostraⅠ é 0,3, e aquela do Ⅱ da amostra so
1,0, quando aquelas das soluções padro forem como os followings:
2,243 para 0ppb, 1,816 for0.2ppb, 1,415 for0.6ppb, 0,74 for1.8ppb,
0,313 for5.4ppb e 0,155 for16.2ppb, em conformidade a escala de
concentraço do Ⅰ is5.4 to16.2ppb da amostra, e aquela do Ⅱ is0.6 da
amostra a 1.8ppb.
7,2 determinaço quantitativa
Os valores médios dos valores da absorvência so equivalentes
porcentagem do valor médio do OD (b) da amostra e da soluço padro
divididas pelo valor do OD (B0) da primeira soluço padro (0
padrões) e multiplicadas subseqentemente em 100%, isto é,
Porcentagem do valor da absorvência = | B | ×100% |
B0 |
Valor do OD da média de B-the (poços dobro) da amostra ou da soluço
padro
Valor do OD da média de B0-the das 0 soluções padro de ng/mL
Tire a curva padro com as porcentagens da absorço das soluções
padro e os valores do semilogarithm das soluções padro de
Olaquindox (ng/mL) como o y e a X-linha central, respectivamente.
Leia a concentraço correspondente da amostra da curva padro
incorporando sua porcentagem da absorço na curva padro. O valor
resultante é multiplicado subseqentemente pela dobra correspondente
da diluiço, assim finalmente obtendo a concentraço de Olaquindox na
amostra.
Usar o software de análise profissional deste jogo será mais
conveniente para a análise exata e rápida de uma grande quantidade
de amostras. (Nos contacte por favor para este software)
8. Precauções
1. A temperatura ambiente abaixo do ℃ 25 ou a temperatura dos
reagentes e das amostras que no esto sendo retornados temperatura
ambiente (℃ 20-25) conduziro a um valor padro mais baixo do OD
2. a seca do microplate no processo de lavagem será acompanhada das
situações que incluem as curvas padro no-lineares e a
reprodutibilidade indesejável
3. a mistura cada reagente e mistura de reaço uniformemente e para
lavar completamente o microplate, se no lá será a reprodutibilidade
indesejável
4. A soluço da parada é a soluço ácida sulfúrica de 2 M, evita
contactar com a pele;
5. põe o microplate no utilizado em um saco da auto-selagem ao
re-selo ele. A substncia padro e a cor incolor anteriores so
sensíveis luz, e assim no pode diretamente ser exposta luz
6. No use o jogo que excede sua data de expiraço. O uso de
reagentes diluídos ou adulterados dos jogos conduzirá s mudanças na
sensibilidade e nos valores de detecço do OD. No troque os
reagentes dos jogos de números de lote diferentes para usar-se
7. rejeite a soluço da coloraço com toda a cor que indicar a
degeneraço desta soluço. O valor de detecço das 0 soluções padro de
menos de 0,5 indica sua degeneraço
8. A temperatura a melhor da reaço é o ℃ 37, e as temperaturas
demasiado altas ou demasiado baixas conduziro s mudanças na
sensibilidade de detecço e em valores do OD.
9. Data do armazenamento e de expiraço
Armazenamento: loja no ℃ 2-8, no congelado.
Data de expiraço: 12 meses; a data da produço está na caixa.
Nota: Se o pacote do vácuo do microplate tem o escapamento, é ainda
válido usar-se, no afeta o resultado da análise, seja relaxar para
usar-se.
Q1: Quando será enviado?
A1: Nós enviaremos os bens para você o mais cedo possível dentro de
7 dias de trabalho após ter recebido o pagamento. (Em caso dos
fatores externos tais como a epidemia, a entrega pode ser atrasada)
Q2: Apoia OEM/ODM?
A2: Pode ser apoiado, mas a quantidade específica precisa de ser
mais de 100.000 partes, que é conveniente para produtos
personalizados.
Q3: Como sua fábrica está fazendo em termos do controle da
qualidade?
A3: Nós certificamos nacionalmente ISO9001 e ISO13485. Nosso
processo de produço conforma-se aos procedimentos padro para
assegurar a qualidade de produto a melhor.
Q4: Como proporcionar o serviço pós-venda?
A4: Nós proporcionamos o serviço pós-venda técnico em linha
profissional. Nós podemos fornecê-lo a orientaço cara-a-cara
através do vídeo, do telefone, etc.
Q5: Que é o método do pagamento?
A5: Nós recebemos o pagamento por T/T.
Q6: Como enviar?
A6: Escolha o melhor método de envio para você obtendo citações de
nossos muitos portadores cooperativos, e igualmente de navio de
acordo com suas exigências.