Leite rápido 96Wells/Kit ISO9001 da detecção de ELISA Milk Test Kit For da melamina

Kit de teste ELISA de melamina para detecço de leite 96 Wells/Kit ISO9001

1. Princípio

Este kit de teste é baseado no imunoensaio enzimático competitivo indireto para a detecço de melamina na amostra.O antígeno de acoplamento é pré-revestido nas tiras do micropoço.A melamina na amostra e os antígenos de acoplamento pré-revestidos nas tiras dos micropoços competem pelos anticorpos anti-melamina.Após a adiço do conjugado enzimático, o substrato TMB é adicionado para coloraço.O valor da densidade óptica (OD) da amostra de teste tem uma correlaço negativa com a concentraço de melamina na amostra.Este valor é comparado com a curva padro e posteriormente é obtida a concentraço de Melamina.

2.Kit de teste de leiteComponentes

3. Especificações técnicas

Sensibilidade: 0,5ppb

Temperatura da incubadora: 25 ℃

Tempo de incubaço: 30min～15min

Limite de detecço:

Manteiga, doces, queijo 10ppb

Taxa de reaço cruzada:

Melamina 100%

Taxa de recuperaço:

Manteiga 90±25%

Doces, queijo 95±25%

4. Materiais necessários, mas no fornecidos

1) Equipamentos: leitor de microplacas, impressora, vortex, centrífuga, pipetas de mediço, balança (sensibilidade recíproca de 0,01 g), banho-maria de 70 ℃;

2) Micropipetadores: canal único 20~200 µL, 100~1000 µL;e multicanal 30～300 μl;

5. Pré-tratamento da amostra

Instruções (Os seguintes pontos devem ser tratados antes do pré-tratamento)

1) Somente as ponteiras descartáveis ​​podem ser utilizadas para os experimentos e as ponteiras devem ser trocadas quando utilizadas para reagentes diferentes;

2) Antes do experimento, cada equipamento experimental deve ser limpo e deve ser re-limpado se necessário, a fim de evitar contaminaço que interfira nos resultados experimentais.

Preparaço da soluço

1) Amostra extraindo uma soluço

Dilua 10x a amostra extraindo uma soluço com água deionizada a 1:9;

2) Soluço B de extraço de amostras

Dilua 20x a soluço B de extraço de amostra com água deionizada a 1:19.

5.1 Manteiga

1) Coloque 1 g de manteiga fresca em um tubo de centrífuga de 50 ml, adicione 5 ml de soluço de extraço de amostras A, incube em banho-maria a 70 ℃ por 5 minutos, vórtex e agite por 5 minutos, centrifugue acima de 4000 r/min em temperatura ambiente por 5 minutos;

2) Pegue 50ul de líquido da camada inferior para análise

Dobra de diluiço da amostra: 5

5.2 doces, queijo

1) Pegue 1 g de amostra fresca em tubo de centrífuga de 50 ml, adicione 5 ml de soluço de extraço de amostra B, incube em banho-maria de 70 ℃ por 5 minutos, vórtice e agite por 5 minutos, centrifugue acima de 4000 r/min em temperatura ambiente por 5 minutos;

2) Pegue 50ul de líquido da camada inferior para análise

Dobra de diluiço da amostra: 5

6. Procedimentos ELISA

6.1 Instruções

1 Leve todos os reagentes e tiras de micropoços temperatura ambiente (20-25 ℃).

2 Devolva todos os reagentes a 2-8 ℃ imediatamente após o uso.

3 A reprodutibilidade da análise ELISA, em grande parte, depende da consistência da lavagem da placa.A correta operaço de lavagem da placa é o ponto chave nos procedimentos de ELISA.

4 Para a incubaço a temperaturas constantes, todas as amostras e reagentes devem evitar a exposiço luz, e cada microplaca deve ser selada pela membrana de cobertura.

6.2 Procedimentos de operaço

1)Traga o kit de teste temperatura ambiente (20-25 ℃) por pelo menos 30 min, observe que cada reagente deve ser agitado uniformemente antes do uso;coloque as tiras de micropoços necessárias em quadros de placas.Selou novamente a microplaca no utilizada, armazenada a 2-8 ℃, no congelada.

2)Preparo da soluço: diluir 15mL do tampo de lavagem concentrado 20X com a água deionizada para 300mL para uso;

3)Numeraço: numerar os micropoços de acordo com as amostras e soluço padro;cada amostra e soluço padro deve ser realizada em duplicata;registrar suas posições.

4)Adicione 50µL da amostra/soluço padro para separar poços duplicados, depois adicione 50µL de conjugado enzimático, depois adicione 50µL de soluço de trabalho de anticorpo a cada poço, agite adequadamente, sele a microplaca com a membrana de cobertura e incube a 25℃ por 30 min;

5)Despeje o líquido dos poços, lave a microplaca com o tampo de lavagem diluído a 250 µL/poço por 5-6 vezes.Cada vez mergulhe o poço com o tampo de lavagem diluído por 15-30 segundos e, em seguida, aba para secar em papel absorvente (se houver bolhas após bater, corte-as com as pontas limpas).

6)Coloraço: adicionar 50µL do substrato A, depois 50µL do substrato B em cada poço.Misture suavemente agitando a placa manualmente e incube a 25 ℃ por 15 minutos no escuro para coloraço;

7)Determinaço: adicione 50µL da soluço de parada em cada poço.Misture suavemente agitando a placa manualmente.Defina o comprimento de onda do leitor de microplacas em 450 nm para determinar o valor OD de cada poço.(Recomende ler o valor OD no comprimento de onda duplo 450/630 nm em 5 min).

7. Julgamento do resultado

Existem dois métodos para julgar os resultados;o primeiro é o julgamento aproximado, enquanto o segundo é a determinaço quantitativa.Observe que o valor de DO da amostra tem uma correlaço negativa com o conteúdo de melamina.

7.1 Determinaço qualitativa

A faixa de concentraço (ng/mL) pode ser obtida comparando o valor médio de DO da amostra de teste com o da soluço padro.Supondo que o valor de DO da amostraⅠ seja 0,3 e o da amostraⅡ seja 1,0, o valor de DO das soluções padro é: 2,043 para 0ppb, 1,604 para 0,5ppb, 1,101 para 1,5ppb, 0,512 para 4,5ppb, 0,161 para 13,5ppb , 0,055 para 40,5ppb, portanto, a faixa de concentraço da amostraⅠ é de 4,5 a 13,5ppb, e a da amostra Ⅱ é de 1,5 a 4,5ppb.

7.2 Determinaço quantitativa

Os valores médios dos valores de absorbncia so equivalentes porcentagem do valor médio de DO (B) da amostra de teste e da soluço padro dividido pelo valor de DO (B0) da primeira soluço padro (0 padro) e subsequentemente multiplicado por 100 %, isso é

B—o valor de OD médio (poços duplos) da amostra de teste ou da soluço padro

B0 - o valor médio de OD da soluço padro de 0ng/mL

Desenhe a curva padro com as porcentagens de absorço das soluções padro e os valores semilogarítmicos das soluções padro de melamina (ng/mL) como eixo Y e X, respectivamente.Leia a concentraço correspondente da amostra de teste da curva padro incorporando sua porcentagem de absorço na curva padro.O valor resultante é posteriormente multiplicado pela dobra de diluiço correspondente, obtendo-se finalmente a concentraço de Melamina na amostra.

8. Precauções

1)A temperatura ambiente abaixo de 25 ℃ ou a temperatura dos reagentes e das amostras de teste no retornando temperatura ambiente (20-25 ℃) levará a um valor de OD padro mais baixo.

2)O ressecamento da microplaca no processo de lavagem será acompanhado pelas situações que incluem as curvas padro no lineares e a reprodutibilidade indesejável;Portanto, continue na próxima etapa imediatamente após a lavagem.

3)Misture uniformemente, caso contrário haverá reprodutibilidade indesejável.

4)A soluço de parada é a soluço de ácido sulfúrico 2 M, evite o contato com a pele.

5)No use o kit após o prazo de validade.O uso de reagentes diluídos ou adulterados dos kits levará a alterações na sensibilidade e nos valores de DO de detecço.No troque os reagentes dos kits de lotes diferentes para uso.

6)Coloque a microplaca no utilizada em um saco autovedante para fechá-la novamente.A substncia padro e o formador de cor incolor so sensíveis luz e, portanto, no podem ser expostos diretamente luz.

7)Descarte a soluço de coloraço com qualquer cor que indique a degeneraço desta soluço.O valor de detecço da soluço padro 1(0 ppb) inferior a 0,5 indica sua degeneraço.

8)A temperatura de reaço ideal é de 25 ℃, e temperaturas muito altas ou baixas resultaro em mudanças na sensibilidade de detecço e nos valores OD.

9. Data de armazenamento e validade

Armazenamento: armazenado a 2-8 ℃, no congelado.

Prazo de validade: 12 meses;a data de produço está na caixa

Observaço: Se a embalagem a vácuo da microplaca apresentar vazamento, ela ainda é válida para uso, no afeta o resultado do teste, pode ser usada com tranquilidade.

Q1: Quanto tempo vai demorar para você enviar?
A1: Normalmente enviado dentro de 7 dias úteis.

Q2: você suporta OEM/ODM?
A2: pode ser suportado.Podemos personalizar de acordo com suas necessidades específicas e quantidades específicas.

P3: como está sua fábrica em termos de controle de qualidade?
A3: Temos certificaço ISO9001 e certificaço ISO13485, até agora todo o processo de produço, temos regras padro, cumprimos o comportamento e as leis relevantes do governo.

Q4: O serviço pós-venda é garantido?
A4: fornecemos serviço pós-venda técnico online profissional.Se o produto falhar durante o experimento, podemos fornecer
orientaço individual por telefone, vídeo e outros formulários.

Q5: Qual é a sua quantidade mínima de pedido?
A5: 1Kit.

Q6: Qual é o método de envio?
A6: Pode ser enviado por expresso (FEDEX, UPS, DHL, EMS, etc.) ou por via aérea e terrestre. Confirme conosco antes de fazer um pedido.