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RNase um pó
Categoria do BR, para o uso da pesquisa somente
Gato. No. N9046
Tamanho: magnésio 100
Atividade específica: Proteína de ≥3000 U/mg (proteína de ≥60 Kunitz units/mg).
Formulário: Contém o RNase A do magnésio 100, pó liofilizado
Descriço
O RNase A é um endoribonuclease que degrade especificamente o RNA
único-encalhado em resíduos de C e de U. Fende a ligaço de
phosphodiester entre o 5' - ribose de um nucleotide e do grupo do
fosfato unidos ao 3' - ribose de um nucleotide adjacente da
pirimidina. O 2' resultante, 3' - o fosfato cíclico hydrolyzed ao
3' correspondente - fosfato do nucleoside.
Aplicações
--Plasmídeo e preparaço genomic do ADN
--Remoço do RNA das preparações de recombinaço da proteína.
--Ensaios da proteço do Ribonuclease
--Traçando mutações da único-base no ADN ou no RNA
Armazenamento
-20ºC recomendou. A vida útil do RNase um pó é um ano quando armazenado selado e seco. O pó do RNase A é enviado na temperatura ambiente.
Controle da qualidade
Testado funcionalmente para a digesto do RNA em um procedimento da purificaço do ADN do plasmídeo.
Peso molecular
monômero 13,7 do kDa.
Definiço da unidade de atividade
Uma unidade das causas da enzima um aumento na absorvência de 1,0
em 260 nanômetro quando o RNA do fermento hydrolyzed em 37°C e em
pH 5,0.
Cinqênta unidades so aproximadamente equivalentes a 1 unidade de
Kunitz.
Inibiço e inativaço
--Inibidores: o inibidor o mais poderoso é uma proteína do kDa ~50
do cytosol de pilhas mamíferas, por exemplo, inibidor do RNase de
RiboLock™.
--Outros inibidores: uridine 2', 3' - vanadate cíclico, 5' -
diphosphoadenosine 3' - phophate e 5' - diphosphoadenosine 2' -
phophate (2), SDS, pirocarbonato diethyl, thyocyanate do
guanidinium de 4M mais 0.1M 2 mercaptoethanol e íons do metal
pesado. Neutralizado pela extraço do fenol/clorofórmio.
--Neutralizado pela extraço do fenol/clorofórmio.
--Neutralizado aquecendo em 95°C por 10 minutos.
Nota
--A concentraço de trabalho para o RNase A é 1-100 µg/ml segundo a
aplicaço.
--A enzima é ativa sob uma vasta gama de condições da reaço. No
baixo milímetro do NaCl das concentrações de sal (0 a 100), o RNase
A fende o RNA também único-encalhado e dobro-encalhado a costa do
RNA em híbrido de RNA-DNA. Contudo, em concentrações do NaCl de 0,3
M ou mais alto, o RNase A fende especificamente o RNA
único-encalhado
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