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Introduço:
A ruptura celular por ultra-som, também conhecida como sonication, é uma técnica usada no laboratório para quebrar as membranas celulares.Isto é normalmente conseguido através do uso de um processador de ultrassom que gera ondas sonoras de alta frequênciaEstas ondas sonoras criam microbolhas no meio líquido que rodeia as células.e o rápido crescimento e colapso dessas bolhas resulta em forças de cisalhamento que perturbam as membranas celulares e liberam o conteúdo intracelularEsta técnica é valiosa na biotecnologia e campos relacionados para a extraço de componentes celulares, incluindo proteínas, DNA e outras biomoléculas para análise ou uso posterior.
Aqui está uma explicaço simplificada do processo:
Uma amostra contendo células é colocada num recipiente (como um tubo de ensaio ou um bico).
O recipiente é ento colocado em um processador ultrassônico. O processador contém uma sonda vibratória, também conhecida como ponta de sonicador, que gera ondas sonoras de alta frequência.
Estas ondas sonoras atravessam a amostra, criando microbulhas no meio líquido em que as células esto.
As microbolhas se expandem e colapsam rapidamente, um processo conhecido como cavitaço. As forças geradas por este processo perturbam as membranas celulares.
A ruptura das membranas celulares permite que o conteúdo intracelular seja liberado para o meio circundante.
É importante notar que a sonication pode gerar calor, o que pode ser prejudicial para alguns componentes da célula.como usar um banho de gelo para resfriar a amostra ou sonicating em pulsos curtos para permitir que a amostra se resfriar entre as rodadas de sonication.
Parmetro
Aplicaço:
• Disruptor celular (extraço de substncias vegetais, desinfecço, desativaço de enzimas)
• Ultrassonografia terapêutica, isto é, induço de termólise nos tecidos (tratamento do cancro)
• diminuiço do tempo de reaço e/ou aumento do rendimento
• Utilizaço de condições menos forçantes, por exemplo, temperatura de reacço mais baixa
• Possível alteraço da via de reacço
• Utilizaço de catalisadores de transferência de fase em menor quantidade ou evitaço dos mesmos
• Forças desgaseificantes reacções com produtos gasosos
• Utilizaço de reagentes brutos ou técnicos
• Ativaço de metais e sólidos
• Reduço de qualquer período de introduço
• Melhoria da reatividade dos reagentes ou dos catalisadores
• Geraço de espécies reativas úteis
O processo de ruptura ultrasônica envolve várias etapas-chave:
Geraço de Ondas Ultrasônicas: As ondas ultrasônicas so geradas usando um dispositivo chamado disruptor ultrasônico ou homogeneizador ultrasônico.Este dispositivo consiste num transdutor que converte energia elétrica em vibrações mecnicas de alta frequência.
Formaço de bolhas de cavitaço: quando as ondas ultrassônicas so transmitidas para a amostra, elas criam ciclos alternados de alta e baixa presso.pequenas cavidades cheias de gásEssas bolhas crescem rapidamente durante os ciclos de baixa presso e depois colapsam violentamente durante os ciclos de alta presso.
Colapso de bolhas de cavitaço: O colapso de bolhas de cavitaço gera energia localizada intensa na forma de ondas de choque, micro-jetos e altas temperaturas.Essas forças físicas resultam na ruptura de células e tecidos.
Efeitos mecnicos e térmicos: as forças mecnicas geradas pelo colapso das bolhas de cavitaço causam tenso de cisalhamento e micro-fluxo dentro da amostra.quebra as estruturas celulares, e libera componentes intracelulares.As altas temperaturas geradas durante o colapso da bolha também podem contribuir para a ruptura das células, desnaturando proteínas ou outras moléculas sensíveis ao calor.
Otimizar os parmetros: a eficiência e eficácia da interrupço ultrasônica dependem de vários parmetros, incluindo a frequência e a intensidade das ondas ultrasônicas,a duraço da exposiço, o volume da amostra e o tipo de amostra perturbada.Estes parmetros devem ser otimizados para cada aplicaço específica, a fim de alcançar o nível de perturbaço desejado sem causar danos excessivos ou perda de atividade biológica..