Detalhes do produto
Protocolo de ensaio ELISA
Marcar as tiras individuais que sero utilizadas e os reagentes
aliquotados como exemplo:
Componente | Volume por reaço | 24 Reacções |
Anticorpo #1 da canamicina | 50 uL | 1.2 ml |
HRP-Conjugado Ab #2 | 50 uL | 1.2 ml |
1X Soluço de lavagem | 10,0 ml | 24 ml |
Parar tampo | 100 L | 2.4 ml |
Substrato TMB | 100 L | 2.4 ml |
- Adicionar 50 I.L. de cada um dos Standards de Canamicina em
duplicado em poços diferentes (Adicionar os Standards placa apenas
na ordem de baixa concentraço para alta concentraço).
- Adicionar 50 litros de cada amostra em duplicado em poços de
amostragem diferentes.
- Adicione 50 I.L. de HRP-Conjugated Ab#2 a cada poço e 50 I.L. de
Anticorpo #1 de Kanamicina a cada poço.
- Incube o prato durante 30 minutos a temperatura ambiente (20 ¢ 25°C
/ 68 ¢ 77°F). (É recomendável cobrir a placa de microtiter durante a incubaço.)).
- Lave o prato 4 vezes com 250 I.L. de 1 X Soluço de Lavar. Após a
última lavagem, inverta o prato e bata suavemente o prato para
secar em toalhas de papel (Faça o próximo passo imediatamente após
a lavagem dos pratos.No permitir que a chapa seque ao ar entre as
etapas de trabalho).
- Adicione 100L de substrato de TMB. Tempo da reaço imediatamente
após a adiço do substrato. Misture a soluço balançando suavemente a
placa manualmente por 30s enquanto incubaçoQualquer soluço de substrato que apresente coloraço indica
deterioraço e deve ser descartada.Recomenda-se cobrir a placa de
microtiter durante a incubaço)).
- Após incubaço durante 15 minutos a temperatura ambiente (20 ¢ 25°C / 68 ¢ 77°F), adicionar 100 I.U. de tampo para parar a reacço enzimática.
- Leia a placa o mais rapidamente possível após a adiço do tampo de
parada num leitor de placas com comprimento de onda de 450 nm
(Antes da leitura,utilizar uma toalha sem pêlos na parte inferior
da placa para garantir que a umidade ou as impressões digitais no
interferem com as leituras).