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O kit de teste REAGENTM patulin ELISA permite s agências governamentais,Os fabricantes de alimentos e as organizações de garantia de qualidade para detectar a patulina em vários tipos de amostras e para satisfazer as preocupações dos clientes sobre a segurança dos alimentos.
1A extracço da patulina a partir de alimentos para animais, mel, carne, leite, tecidos, soro e urina pode ser concluída em 10 a 30 minutos com uma taxa de recuperaço elevada de 75 a 95%.
2Uma análise ELISA rápida (menos de 2 horas, independentemente do número de amostras).
3Alta reprodutibilidade.
O método baseia-se num ensaio ELISA colorimétrico competitivo. O anticorpo de patulina foi revestido nos poços da placa.A amostra é adicionada juntamente com o conjugado de peroxidase patulina-rabanete (patulina-HRP)Se o resíduo de patulina estiver presente na amostra, competirá pelo anticorpo de patulina, impedindo assim que a patulina-HRP se ligue ao anticorpo ligado ao poço.A intensidade de cor resultante, após adiço do substrato HRP (TMB), tem uma relaço inversa com a concentraço de resíduos de patulina na amostra.
O kit de ensaio REAGENTM patulin ELISA tem capacidade para 96 determinações ou testes de 42 amostras em duplicado (assumindo 12 poços para padrões).Devolver os micro-cavidades no utilizados para o saco de papel alumínio e re-selar com o dessecante fornecido na embalagem original. Conservar o kit a 2- 8°C. A validade é de 12 meses quando o kit estiver devidamente conservado.
1- Os padrões contêm patulina.
2No utilize o kit após a data de validade.
3.No misture reagentes de kits ou lotes diferentes, exceto para componentes com o mesmo número de peça dentro das suas datas de validade.
4.Tente manter uma temperatura de laboratório de 20°25°C (68°77°F). Evite conduzir testes sob ou perto de aberturas de ar, pois isso pode causar arrefecimento, aquecimento e/ou evaporaço excessivos.No execute ensaios luz solar direta, uma vez que isto pode causar calor e evaporaço excessivos.Os bancos frios devem ser evitados colocando várias camadas de toalha de papel ou outro material isolante sob as placas de ensaio durante a incubaço..
5Certifique-se de utilizar apenas água destilada ou desionizada, uma vez que a qualidade da água é muito importante.
6.Quando as amostras ou reagentes forem pipetadas numa placa de microtiter vazia, colocar as pontas da pipeta no canto inferior do poço, em contacto com o plástico.
7.As incubações das placas de ensaio devem ser cronometradas com a maior preciso possível.Seja consistente ao adicionar padrões placa de ensaio.Adicione primeiro os seus padrões e depois as amostras.
8. Adicionar padrões placa apenas na ordem de baixa concentraço para alta concentraço, pois isso minimizará o risco de comprometer a curva padro.
9- Refrigerar sempre as placas em sacos selados com um dessecante para manter a estabilidade.Prevenir a formaço de condensaço nas placas, permitindo-lhes equilibrar- se temperatura ambiente (20°C/ 68°F) enquanto estiverem na embalagem.
Tipo de amostra | Limite de detecço(ng/g ou ppb) |
Alimentos para animais | 1 |
Querida. | 2 |
Carne/Fígado/Rins/Peixe/Camarões | 1 |
Leite | 0.5 |
Serum | 0.5 |
Urina | 0.5 |
Sucos | 1 |
NAme | Reatividade cruzada (%) |
patulina | 100 |
Ácido oxolínico | 40 |
Ácido pipemídico | 18 |
Ofloxacina | 17 |
Ciprofloxacina | 9 |
Enrofloxacina | 6 |
Flumequin | 6 |
Cinoxacina | 1 |
1Leitor de placas de microtiter (450 nm)
2Incubadora
3. Misturador de tecidos (por exemplo, Omni TissueMaster Homogenizer)
4. Misturador de vórtice (por exemplo, misturador de vórtice Gneie da VWR)
5. 10, 20, 100 e 1000 μL pipetas
6. Pipeta multicanal: 50-300 μL (opcional)
1- Os padrões contêm patulina.
2No utilize o kit após a data de validade.
3.No misture reagentes de kits ou lotes diferentes, exceto para componentes com o mesmo número de peça dentro das suas datas de validade.
4.Tente manter uma temperatura de laboratório de 20°25°C (68°77°F). Evite conduzir testes sob ou perto de aberturas de ar, pois isso pode causar arrefecimento, aquecimento e/ou evaporaço excessivos.No execute ensaios luz solar direta, uma vez que isto pode causar calor e evaporaço excessivos.Os bancos frios devem ser evitados colocando várias camadas de toalha de papel ou outro material isolante sob as placas de ensaio durante a incubaço..
5Certifique-se de utilizar apenas água destilada ou desionizada, uma vez que a qualidade da água é muito importante.
6.Quando as amostras ou reagentes forem pipetadas numa placa de microtiter vazia, colocar as pontas da pipeta no canto inferior do poço, em contacto com o plástico.
7.As incubações das placas de ensaio devem ser cronometradas com a maior preciso possível.Seja consistente ao adicionar padrões placa de ensaio.Adicione primeiro os seus padrões e depois as amostras.
8. Adicionar padrões placa apenas na ordem de baixa concentraço para alta concentraço, pois isso minimizará o risco de comprometer a curva padro.
9- Refrigerar sempre as placas em sacos selados com um dessecante para manter a estabilidade.Prevenir a formaço de condensaço nas placas, permitindo-lhes equilibrar- se temperatura ambiente (20°C/ 68°F) enquanto estiverem na embalagem.
A uma quantidade razoável de amostra, adicionar 5 vezes a quantidade de metanol 70% (por exemplo, 1 g de amostra + 5 ml de metanol 70%); homogeneizar a amostra com um misturador adequado.
Retirar 1,5 ml da amostra homogeneizada e centrifugar durante 5 minutos a 4.000 x g a temperatura ambiente (20°C / 68°F).
Transferir 0,5 ml do supernatante para um tubo, adicionar 0,5 ml de tampo de extracço de amostra 1X e misturar bem.
Para o ensaio, utilizar 100 μL da amostra por poço.
Nota:Fator de diluiço: 10.
Retirar 0,1 g de amostra de mel, adicionar 1,9 ml de 35% de metanol/ tampo de extracço da amostra e misturar bem.
Para o ensaio, utilizar 100 μL por poço.
Nota:Fator de diluiço: 20
Retirar a gordura da amostra e homogeneizá-la com um misturador adequado.
Pesar 1,0 g da amostra homogeneizada e adicionar 4 ml de metanol a 70%.
Vortex durante 10 minutos velocidade máxima.
Centrifugar durante 5 minutos a 4.000 x g a temperatura ambiente (20°C / 68°F).
Transferir 0,5 ml do supernatante para um tubo, adicionar 0,5 ml de tampo de extracço de amostra 1X e misturar bem.
Utilize 100 μL para o ensaio.
Notas:Fator de diluiço: 10.
Para o leite sem gordura, retirar 200 μL da amostra de leite, adicionar 800 μL de metanol/buffer de extracço de amostra de 35% e misturar bem.
Para o leite normal com gordura, centrifugar 1 ml da amostra de leite a 4.000 x g durante 5 minutos, descartar a camada de gordura superior, retirar 200 μl da amostra de leite,Adicionar 800 μL de metanol/buffer de extracço de amostra de 35%, e misturar bem. Retirar 100 μL da amostra diluída por poço para análise.
NoTe:Fator de diluiço: 5.
Centrifugar 0,5 ml de soro a 4.000 x g durante 5 minutos.
Retirar 0,2 ml do supernatante, adicionar 0,8 ml de 35% de metanol/tampo de extracço da amostra.
Para o ensaio, utilizar 100 μl por poço.
Notas:Fator de diluiço: 5.