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Jogo da detecço do PCR do felis de Chlamydophila/Mycoplasma
(Método fluorescente da ponta de prova do qPCR do tempo real)
Uso pretendido:
Este jogo é apropriado para a detecço específica de felis de Chlamydophila (CF) e de felis do Mycoplasma (MF) no olho de gato nasal e nas secreções da boca.
Princípio:
Esta seleço do jogo da clamídia e da ponta de prova específica do gene do projeto conservador do mycoplasma, a ponta de prova pode com área da amplificaço da primeira demo no meio de um molde obrigatório específico do ADN, em processo da extenso do PCR, as enzimas limitadas da polimerase de Taq do 5" extremidade de grupos fluorescentes na ponta de prova será reduzida, feita livre no sistema de reaço, extinguindo desse modo grupos fora do 3" extremidade, a fluorescência foi emitida e detectada pelo instrumento do PCR da fluorescência para realizar a detecço de clamídia e ácidos nucleicos do mycoplasma no sistema de reaço completamente fechado.
Componentes principais:
Componente | Especificaço |
Líquido da reaço do PCR | 8 tubos |
Controle positivo | 1 tubo |
Controle negativo | 1 tubo |
Exigências da amostra:
1. Tipo da amostra
Olho de gato, secreço da boca e do nariz e outras amostras
2. Prove a coleço e o transporte
Prove a coleço e o transporte será realizado de acordo com NY/T 541. As amostras sero transportadas ao laboratório o mais cedo possível sob circunstncias refrigeradas para evitar a gelo-aproximaço amigável repetida.
3. Preservaço da amostra
Pode ser armazenado por 24 horas em 2℃~8℃, e pode ser armazenado por muito tempo em -70℃.
Amplificaço do PCR e detecço da fluorescência (área da detecço do
PCR)
Põe cada tubo da reaço no instrumento do PCR e execute a amplificaço do PCR de acordo com os seguintes procedimentos:
Etapa | Número de ciclo | Temperatura | Tempo |
1 | 1 | 95℃ | 3min |
2 | 45 | 95℃ | 10s |
60℃ | 30s recolhem fluorescente |
FAM e VIC/HEX so selecionados para os canais da detecço.
Os resultados da interpretaço
Canal de FAM (CF) | Canal de VIC/HEX (MF) | Interpretaço do resultado | |
1 | - | - | Os resultados foram relatados negativo |
2 | + | - | Os resultados foram relatados o positivo dos CF |
3 | - | + | Os resultados foram relatados o positivo do MF |
4 | + | + | Os resultados foram relatados os CF, MF positivo |
Valor do julgamento ou intervalo positivo da referência
Resultado | Valor do Ct |
Positivo | Ct≤38 |
Negativo | Nenhum valor do Ct ou Ct value=0 |
Área de cinza | 38<Ct≤45 |
Nota: O resultado é julgado para ser a área cinzenta, que precisa de ser verificada novamente. Se verifique novamente o resultado é valor do Ct < 45="" is="" considered="" as="" positive="">
Os detalhes da operaço satisfazem verificam de IFU!