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Jogos ácidos nucleicos hypodermal e hematopoietic infecciosos da detecço do vírus da necrose (IHHNV)
(Método PCR-fluorescente da ponta de prova)
Uso pretendido:
Este jogo é apropriado para a detecço específica de IHHNV em amostras de água, em plntulas do camaro, em isca, etc., e é usado para o diagnóstico etiological de pessoas contaminadas suspeitadas.
Princípio:
Este jogo é o fragmento específico subcutneo e hematopoietic infeccioso escolhido ponta de prova da ponta de prova das primeiras demo do projeto, a ponta de prova do vírus da necrose do órgo (IHHNV) com área da amplificaço da primeira demo no meio de um molde obrigatório específico do ADN, em processo da extenso do PCR, as enzimas limitadas da polimerase de Taq do 5" extremidade de grupos fluorescentes na ponta de prova será reduzido, faz livre no sistema de reaço, assim, o 3" - o grupo extinto extremidade foi separado e a fluorescência foi emitida, que foi detectada pelo instrumento do PCR da fluorescência para realizar a detecço do vírus subcutneo e hematopoietic infeccioso da necrose (IHHNV) em um sistema de reaço completamente fechado.
Componentes principais:
Componente | Especificaço |
Líquido da reaço do PCR | 24 tubos |
Controle positivo | 1 tubo |
Controle negativo | 1 tubo |
Exigências da amostra:
1. Tipo da amostra
Plntulas: pai, ovos do camaro, plntulas, produtos padro grosseiros
Lagoa: lama inferior, excremento, corpo da água
Isca: a isca viva, a isca refrigerada e a no-alto-temperatura trataram amostras da isca
2. Transporte
Prove a coleço e o transporte será realizado de acordo com NY/T 541. As amostras sero transportadas ao laboratório o mais cedo possível sob circunstncias refrigeradas para evitar a gelo-aproximaço amigável repetida.
3. Preservaço da amostra
Pode ser armazenado por 24 horas em 2℃~8℃, e pode ser armazenado por muito tempo em -20℃.
Usando Micgene 242/244/244IVD e ABI QuantStudio 5:
os procedimentos so ajustados como abaixo:
Etapas | Número de ciclo | Temperatura | Tempo |
1 | 1 | 95℃ | 3min |
2 | 45 | 95℃ | 10s |
60℃ | 30sCollect o fluorescente |
FAM foi selecionado para o canal da detecço.
Os resultados da interpretaço
Resultados | Valor do Ct |
Positivo | Ct≤45 |
Negativo | Nenhum valor do Ct ou Ct value≥45 |
Área de cinza | 40<Ct≤45 |
Nota: O resultado é julgado para ser a área cinzenta, que precisa de ser verificada novamente. Se verifique novamente o resultado é valor do Ct < 45="" is="" considered="" as="" positive="">
Análise do resultado:
Análise automática usando a instrumentaço
Controle da qualidade:
Controle negativo: Nenhuma curva óbvia da amplificaço do canal da detecço de FAM;
Controle positivo: O canal de FAM mostrou a curva óbvia da amplificaço, valor ≤30 do Ct;
As circunstncias acima so estadas conformes simultaneamente na mesma experiência; de outra maneira, a experiência é inválida e reexaminar é exigido.