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Jogo ácido nucleico da detecço do PCR do jogo parahaemolyticus do Vibrio
(Método PCR-fluorescente da ponta de prova)
Uso pretendido:
Este jogo é apropriado para a detecço específica de vibrio
patogênico parahaemolyticus (Vpa) na isca, nas amostras de água,
nas plntulas do camaro, nos tecidos do camaro e em produtos
processados.
Princípio:
Este jogo usa um fragmento específico do Vibrio parahaemolyticus
(Vpa) para projetar uma ponta de prova da ponta de prova da
primeira demo, que possa especificamente ligar a uma SEÇO do molde
do ADN no meio da regio da amplificaço da primeira demo. Durante o
processo da extenso do PCR, a atividade do exonuclide da enzima de
Taq corta o 5" - terminal fluoróforo da ponta de prova e fá-lo
livre no sistema de reaço. Assim, o 3" - o grupo extinto
extremidade foi separado, e a fluorescência foi emitida, que foi
detectada pelo instrumento do PCR da fluorescência para conseguir a
detecço de ácido nucleico parahaemolyticus do Vibrio (Vpa) no
sistema de reaço completamente fechado.
Componentes principais:
Componente | Especificaço |
Líquido da reaço do PCR | 24 tubos |
Controle positivo | 1 tubo |
Controle negativo | 1 tubo |
Exigências da amostra:
1. Tipo da amostra
Plntula do camaro, tecido do camaro, corpo da água, isca, produtos processados, etc.
2. Prove a coleço e o transporte
Prove a coleço e o transporte será realizado de acordo com NY/T 541. As amostras sero transportadas ao laboratório o mais cedo possível sob circunstncias refrigeradas para evitar a gelo-aproximaço amigável repetida.
3. Preservaço da amostra
Pode ser armazenado por 24 horas em 2℃~8℃, e pode ser armazenado por muito tempo em -20℃.
Usando Micgene 242/244/244IVD e ABI QuantStudio 5:
os procedimentos so ajustados como abaixo:
Etapas | Número de ciclo | Temperatura | Tempo |
1 | 1 | 95℃ | 3min |
2 | 45 | 95℃ | 10s |
60℃ | 30sCollect o fluorescente |
FAM foi selecionado para o canal da detecço.
Os resultados da interpretaço
Resultados | Valor do Ct |
Positivo | Ct≤40 |
Negativo | Nenhum valor do Ct ou Ct value≥45 |
Área de cinza | 40<Ct<45> |
Nota: O resultado é julgado para ser a área cinzenta, que precisa
de ser verificada novamente. Se verifique novamente o resultado é
valor do Ct < 45="" is="" considered="" as="" positive="">
Análise do resultado:
Análise automática usando a instrumentaço
Controle da qualidade:
Controle negativo: Nenhuma curva óbvia da amplificaço do canal da
detecço de FAM;
Controle positivo: O canal de FAM mostrou a curva óbvia da
amplificaço, valor ≤30 do Ct;
As circunstncias acima so estadas conformes simultaneamente na
mesma experiência; de outra maneira, a experiência é inválida e
reexaminar é exigido.