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O polymeraset do ADN Taq detecta o tipo do vírus do Reovirus da carpa da grama (GCRVI) mim jogo do teste do PCR
Uso pretendido:
Este jogo é apropriado para o diagnóstico auxiliar do tipo do Reovirus da carpa da grama mim infecço do vírus (GCRVI)
Princípio:
Este jogo usa o RNA como um molde e as primeiras demo como um ponto
de partida para sintetizar as costas do cDNA complementares ao
molde do RNA sob a aço do transcriptase reverso de grande eficacia.
Escolha a ponta de prova específica do projeto conservador do gene
do vírus do pêssego, a ponta de prova pode com área da amplificaço
da primeira demo no meio de um molde obrigatório específico do ADN,
em processo da extenso do PCR, as enzimas limitadas da polimerase
de Taq do 5" extremidade de grupos fluorescentes na ponta de prova
será reduzido, feito livre no sistema de reaço, extinguindo desse
modo grupos fora do 3" extremidade, fulgor, o ácido nucleico do
vírus do taora foi detectado pelo PCR da fluorescência em um
sistema de reaço completamente fechado.
Componentes principais:
| Componente | Especificaço |
| Líquido da reaço do PCR | 24 tubos |
| Controle positivo | 1 tubo |
| Controle negativo | 1 tubo |
1. Tipo da amostra
Amostras de tecido de carpa da grama e de carpa preta
2. Coleço da amostra
A fritada com comprimento de corpo ≤4cm deve ser tomada no conjunto peixes, se há saco de gema, ele deve ser removida; Toda a entranhas que inclui o rim e o cérebro foi tomada da fritada de 4~6cm. O fígado, o cérebro, o baço e o rim foram tomados dos peixes com comprimento de corpo ≥6cm. 5 peixes podem ser combinados em uma amostra pequena.
3. Armazenamento e transporte
As amostras so transportadas em sacos de gelo de 2℃~8℃, e repetiram a congelaço e thawing so proibidos. O armazenamento a curto prazo em -20℃, -70℃ pode ser armazenamento a longo prazo.
Amplificaço do PCR e detecço da fluorescência (área da detecço do PCR):
Põe cada tubo da reaço no instrumento do PCR e execute a amplificaço do PCR de acordo com os seguintes procedimentos:
| Etapa | Número de ciclo | Temperatura | Tempo |
| 1 | 1 | 50℃ | 20min |
| 2 | 1 | 95℃ | 2min30s |
| 3 | 45 | 95℃ | 10s |
| 60℃ | 30s recolhem fluorescente |
FAM é selecionado para os canais da detecço.
Os resultados da interpretaço:
| Resultados | Valor do Ct |
| Positivo | Ct≤40 |
| Negativo | Nenhum valor do Ct ou Ct value=0 |
| Área de cinza | 40<Ct≤45 |
Nota: O resultado é julgado para ser a área cinzenta, que precisa de ser verificada novamente. Se verifique novamente o resultado é valor do Ct < 45="" is="" considered="" as="" positive="">
Índice do desempenho de produto:
1. Preciso
Os materiais de referência positivos de empresas de teste eram toda positivos.
2. Limite de detecço mínimo: o limite de detecço deste jogo é 3copies/μL.
3. Preciso: O coeficiente de variaço (CV, %) do valor do Ct da preciso do intra-grupo é ≤5%.
Os detalhes da operaço satisfazem verificam de IFU!