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Jogo do cortisol ELISA da cabra com Spesificity alto e sensibilidade
Cat.No E0021Go
Escala padrão da curva: 0.5ng/ml - 60ng/ml
Sensibilidade: 0.22ng/ml
Tamanho: 96 poços
Armazenamento: Armazene os reagentes em 2-8°C. para um armazenamento de mais de 6 meses referem a data de validade mantêm-no em ciclos repetidos Avoid da aproximação amigável de -20°C. Se os reagentes individuais são abertos recomenda-se que o jogo esteja usado dentro de 1 mês.
* este produto é para o uso da pesquisa somente, não para o uso em procedimentos do diagnóstico. É recomenda altamente ler inteiramente antes de usar esta instrução.
Uso pretendido
Este jogo do sanduíche é para a detecção quantitativa exata de cortisol da cabra (igualmente conhecido como o NÚCLEO) no soro, plasma, supernates da cultura celular, lysates da pilha, homogenates do tecido.
Princípio do ensaio
Este jogo é um ensaio Enzima-ligado da imunoabsorção (ELISA). A placa foi pré-revestida com o anticorpo do NÚCLEO da cabra. O NÚCLEO atual na amostra é adicionado e liga aos anticorpos revestidos nos poços. E o anticorpo então biotinylated do NÚCLEO da cabra é adicionado e liga ao NÚCLEO na amostra. Então Streptavidin-HRP é adicionado e liga ao anticorpo do NÚCLEO de Biotinylated. Após a incubação Streptavidin-HRP desatado é lavado afastado durante uma etapa de lavagem. A solução da carcaça é adicionada então e a cor torna-se em proporção à quantidade de NÚCLEO da cabra. A reação é terminada pela adição de ácido para a solução e a absorvência é medida em 450 nanômetro.
Reagente fornecido
Componentes | Quantidade |
Solução padrão (64ng/ml) | 0.5ml x1 |
Placa pré-revestida de ELISA | 12 * 8 tiras boas x1 |
Diluente padrão | 3ml x1 |
Streptavidin-HRP | 6ml x1 |
Pare a solução | 6ml x1 |
Solução A da carcaça | 6ml x1 |
Solução B da carcaça | 6ml x1 |
Concentrado do amortecedor da lavagem (30x) | 20ml x1 |
Anticorpo do NÚCLEO da cabra de Biotinylated | 1ml x1 |
Instrução do usuário | 1 |
Aferidor da placa | pics 2 |
Saco do zíper | 1 PIC |
Coleção de espécime
O soro permite que o soro coagule por 10-20 minutos na temperatura ambiente. Centrifugador em 2000-3000 RPM por 20 minutos.
O plasma recolhe o plasma usando o EDTA ou a heparina como um anticoagulante. Centrifugue amostras por 15 minutos em 2000-3000 RPM em 2 - 8°C dentro de 30 minutos da coleção.
A urina recolhe pelo tubo estéril. Centrifugador em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Ao recolher o líquido fluido e cerebrospinal pleuroperitoneal, siga por favor os procedimentos acima mencionados.
O Supernatant da cultura celular recolhe pelos tubos estéreis ao examinar segregue componentes. Centrifugue em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Recolha os supernatants com cuidado. Ao examinar os componentes dentro da pilha, use PBS (pH 7.2-7.4) para diluir a suspensão da pilha à concentração da pilha de aproximadamente 1 million/ml. Danifique pilhas através dos ciclos repetidos da gelo-aproximação amigável para deixar para fora os componentes internos. Centrifugue em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.
Tecidos da lavagem do tecido em PBS (pH 7,4) para remover completamente o sangue adicional e a pesá-lo antes da homogeneização. Triture tecidos e homogeneize-os em PBS (pH7.4) com um homogenizador de vidro no gelo. Aproximação amigável em 2-8°C ou gelo no centrifugador de -20°C. em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.
Preparação do reagente
Todos os reagentes devem ser trazidos à temperatura ambiente antes de usar.
O padrão reconstitui o 120μl do padrão (320ng/ml) com o 120μl do diluente padrão para gerar uma solução 160ng/ml conservada em estoque padrão. Permita que o padrão sente-se por 15 minutos com agitação delicada antes de fazer diluições. Prepare pontos padrão duplicados em série diluindo o 1:2 padrão da solução conservada em estoque (160ng/ml) com o diluente padrão para produzir as soluções 80ng/ml, 40ng/ml, 20ng/ml e 10ng/ml. O diluente padrão serve como o padrão zero (0 ng/ml). Toda a solução restante deve ser congelada em -20°C e ser usada dentro de um mês. A diluição das soluções padrão sugeridas é como segue:
32ng/ml | Padrão No.5 | diluente original do padrão 120μl + do padrão 120μl |
16ng/ml | Padrão No.4 | padrão 120μl diluente do padrão No.5 + 120μl |
8ng/ml | Padrão No.3 | padrão 120μl diluente do padrão No.4 + 120μl |
4ng/ml | Padrão No.2 | padrão 120μl diluente do padrão No.3 + 120μl |
2ng/ml | Padrão No.1 | padrão 120μl diluente do padrão No.2 + 120μl |
Concentração padrão | Padrão No.5 | Padrão No.4 | Padrão No.3 | Padrão No.2 | Padrão No.1 |
64ng/L | 32ng/L | 16ng/L | 8ng/L | 4ng/L | 2ng/L |