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E 1 jogo sensível alto do rato ELISA do jogo do ensaio da imunoabsorção do sanduíche 2 horas de comprimento do ensaio
Cat.No E0257Mo
Escala padrão da curva: 1ng/L - 400ng/L
Sensibilidade: 0.43ng/L
Tamanho: 96 poços
Armazenamento: Armazene os reagentes em 2-8°C. para um armazenamento de mais de 6 meses referem a data de validade mantêm-no em ciclos repetidos Avoid da aproximação amigável de -20°C. Se os reagentes individuais são abertos recomenda-se que o jogo esteja usado dentro de 1 mês.
o produto dos *This é para o uso da pesquisa somente, não para o uso em procedimentos do diagnóstico. É recomenda altamente ler inteiramente antes de usar esta instrução.
Uso pretendido
Este jogo do sanduíche é para a detecção quantitativa exata do Endothelin 1 do rato (igualmente conhecido como ET-1) no soro, plasma, supernates da cultura celular, lysates da pilha, homogenates do tecido.
Princípio do ensaio
Este jogo é um ensaio Enzima-ligado da imunoabsorção (ELISA). A placa foi pré-revestida com o anticorpo do rato ET-1. ET-1 apresentam na amostra são adicionados e ligam aos anticorpos revestidos nos poços. E o anticorpo então biotinylated do rato ET-1 é adicionado e liga a ET-1 na amostra. Então Streptavidin-HRP é adicionado e liga ao anticorpo de Biotinylated ET-1. Após a incubação Streptavidin-HRP desatado é lavado afastado durante uma etapa de lavagem. A solução da carcaça é adicionada então e a cor torna-se em proporção à quantidade do rato ET-1. A reação é terminada pela adição de ácido para a solução e a absorvência é medida em 450 nanômetro.
Precauções
Os reagentes de PreparationAll do reagente devem ser trazidos à temperatura ambiente antes de usar. O padrão reconstitui o 120μl do padrão (480ng/L) com o 120μl do diluente padrão para gerar uma solução 240ng/L conservada em estoque padrão. Permita que o padrão sente-se por 15 minutos com agitação delicada antes de fazer diluições. Prepare pontos padrão duplicados em série diluindo a solução conservada em estoque padrão (240ng/L) 1:2 com o diluente padrão para produzir as soluções 120ng/L, 60ng/L, 30ng/L e 15ng/L. O diluente padrão serve como o padrão zero (0 ng/L). Toda a solução restante deve ser congelada em -20℃ e ser usada dentro de um mês. A diluição das soluções padrão sugeridas é como segue:
240ng/L | Padrão No.5 | diluente original do padrão 120μl + do padrão 120μl |
120ng/L | Padrão No.4 | padrão 120μl diluente do padrão No.5 + 120μl |
60ng/L | Padrão No.3 | padrão 120μl diluente do padrão No.4 + 120μl |
30ng/L | Padrão No.2 | padrão 120μl diluente do padrão No.3 + 120μl |
15ng/L | Padrão No.1 | padrão 120μl diluente do padrão No.2 + 120μl |
Concentração padrão | Padrão No.5 | Padrão No.4 | Padrão No.3 | Padrão No.2 | Padrão No.1 |
480ng/L | 240ng/L | 120ng/L | 60ng/L | 30ng/L | 15ng/L |
Amortecedor 20ml diluído da lavagem do concentrado 25x do amortecedor da lavagem no deionized ou água destilada para render 500 ml do amortecedor da lavagem 1x. Se os cristais formaram no concentrado, mistura delicadamente até que os cristais se dissolverem completamente.
Sumário
1. Prepare todos os reagentes, amostras e padrões.
2. Adicione a amostra e o reagente de ELISA em cada um bem. Incube para 1 hora em 37°C.
3. Lave a placa 5 vezes.
4. Adicione a solução A e B. Incubação da carcaça por 10 minutos em 37°C.
5. Adicione param a solução e a cor torna-se.
6. Leia o valor do OD dentro de 10 minutos.
Cálculo de resultado
Construa uma curva padrão traçando o OD médio para cada padrão no vertical (Y) linha central contra a concentração no horizontal (X) a linha central e tira uma melhor curva do ajuste através dos pontos no gráfico. Estes cálculos podem melhor ser executados com o software por computador do curva-encaixe e a melhor linha do ajuste pode ser determinada pela análise de regressão.