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96 ser humano Kim da elevada precisão e da especificidade de Wells 48 Wells 1 jogo de ELISA
Cat.No E1099Hu
Armazenamento: Armazene os reagentes em 2-8°C. para um armazenamento de mais de 6 meses referem a data de validade mantêm-no em ciclos repetidos Avoid da aproximação amigável de -20°C. Se os reagentes individuais são abertos recomenda-se que o jogo esteja usado dentro de 1 mês.
o produto dos *This é para o uso da pesquisa somente, não para o uso em procedimentos do diagnóstico. É recomenda altamente ler inteiramente antes de usar esta instrução.
Princípio do ensaio
Este jogo é um ensaio Enzima-ligado da imunoabsorção (ELISA). A placa foi pré-revestida com o anticorpo Kim-1 humano. Kim-1 apresentam na amostra são adicionados e ligam aos anticorpos revestidos nos poços. E o anticorpo Kim-1 humano então biotinylated é adicionado e liga a Kim-1 na amostra. Então Streptavidin-HRP é adicionado e liga ao anticorpo de Biotinylated Kim-1. Após a incubação Streptavidin-HRP desatado é lavado afastado durante uma etapa de lavagem. A solução da carcaça é adicionada então e a cor torna-se em proporção à quantidade de Kim-1 humano. A reação é terminada pela adição de ácido para a solução e a absorvência é medida em 450 nanômetro.
Reagente fornecido
| Componentes | Quantidade |
| Solução padrão (12.8ng/ml) | 0.5ml x1 |
| Placa pré-revestida de ELISA | 12 * 8 tiras boas x1 |
| Diluente padrão | 3ml x1 |
| Streptavidin-HRP | 6ml x1 |
| Pare a solução | 6ml x1 |
| Solução A da carcaça | 6ml x1 |
| Solução B da carcaça | 6ml x1 |
| Concentrado do amortecedor da lavagem (30x) | 20ml x1 |
| Anticorpo Kim-1 humano de Biotinylated | 1ml x1 |
| Instrução do usuário | 1 |
| Aferidor da placa | pics 2 |
| Saco do zíper | 1 PIC |
Material exigido mas não fornecido
Precisão
A precisão do Intra-ensaio (precisão dentro de um ensaio) três amostras de concentração conhecida foi testada em uma placa para avaliar a precisão do intra-ensaio.
A precisão do Inter-ensaio (precisão entre ensaios) três amostras de concentração conhecida foi testada em ensaios separados para avaliar a precisão do inter-ensaio.
CV (%) = SD/mean x 100
Intra-ensaio: CV<8>
Inter-ensaio: CV<10>
Precauções
Preparação do reagente
Todos os reagentes devem ser trazidos à temperatura ambiente antes de usar.
O padrão reconstitui o 120μl do padrão (12.8ng/ml) com o 120μl do diluente padrão para gerar uma solução 6.4ng/ml conservada em estoque padrão. Permita que o padrão sente-se por 15 minutos com agitação delicada antes de fazer diluições. Prepare pontos padrão duplicados em série diluindo o 1:2 padrão da solução conservada em estoque (6.4ng/ml) com o diluente padrão para produzir as soluções 3.2ng/ml, 1.6ng/ml, 0.8ng/ml e 0.4ng/ml. O diluente padrão serve como o padrão zero (0 ng/ml). Toda a solução restante deve ser congelada em -20°C e ser usada dentro de um mês. A diluição das soluções padrão sugeridas é como segue:
| 6.4ng/ml | Padrão No.5 | diluente original do padrão 120μl + do padrão 120μl |
| 3.2ng/ml | Padrão No.4 | padrão 120μl diluente do padrão No.5 + 120μl |
| 1.6ng/ml | Padrão No.3 | padrão 120μl diluente do padrão No.4 + 120μl |
| 0.8ng/ml | Padrão No.2 | padrão 120μl diluente do padrão No.3 + 120μl |
| 0.4ng/ml | Padrão No.1 | padrão 120μl diluente do padrão No.2 + 120μl |
| Concentração padrão | Padrão No.5 | Padrão No.4 | Padrão No.3 | Padrão No.2 | Padrão No.1 |
| 12.8ng/ml | 6.4ng/ml | 3.2ng/ml | 1.6ng/ml | 0.8ng/ml | 0.4ng/ml |
Amortecedor 20ml diluído da lavagem do concentrado 30x do amortecedor da lavagem no deionized ou água destilada para render 500 ml do amortecedor da lavagem 1x. Se os cristais formaram no concentrado, mistura delicadamente até que os cristais se dissolverem completamente.
Cálculo de resultado
Construa uma curva padrão traçando o OD médio para cada padrão no vertical (Y) linha central contra a concentração no horizontal (X) a linha central e tira uma melhor curva do ajuste através dos pontos no gráfico. Estes cálculos podem melhor ser executados com o software por computador do curva-encaixe e a melhor linha do ajuste pode ser determinada pela análise de regressão.
“A susceptibilidade genética ao bronchiolitis syncytial respiratório do vírus em crianças prematuras é associada com a via aérea que remodela genes e genes imunes inatos.”
Siezen C.L., Bont L., Hodemaekers H.M., Ermers M.J., Doornbos G., entalhe R. de Van't, Wijmenga C., Houwelingen H.C., Kimpen J.L., Kimman T.G., Hoebee B., Janssen R.
Pediatr. Contamine. Dis. J. 28:333- 335(2009)