Peptide relacionado de gene de Calcitonin sensível alto do jogo do Immunoassay do rato ELISA de CGRP

Jogo sensível alto do Immunoassay do rato ELISA do jogo CGRP do Peptide relacionado de gene de Calcitonin ELISA do rato
 
Cat.No E0347Ra
Escala padrão da curva: 2pg/ml - 600pg/ml
Sensibilidade: 1.02pg/ml
Tamanho: 96 poços
Armazenamento: Armazene os reagentes em 2-8°C. para um armazenamento de mais de 6 meses referem a data de validade mantêm-no em ciclos repetidos Avoid da aproximação amigável de -20°C. Se os reagentes individuais são abertos recomenda-se que o jogo esteja usado dentro de 1 mês.
o produto dos *This é para o uso da pesquisa somente, não para o uso em procedimentos do diagnóstico. É recomenda altamente ler inteiramente antes de usar esta instrução.
 
Uso pretendido
Este jogo do sanduíche é para a detecção quantitativa exata de Peptide relacionado de gene de Calcitonin do rato (igualmente conhecido como CGRP) no soro, plasma, supernates da cultura celular, lysates da pilha, homogenates do tecido.
 
Precauções

• Antes do uso, o jogo e a amostra do Immunoassay de ELISA devem ser aquecidos naturalmente à temperatura ambiente 30 minutos.
• Esta instrução deve restritamente ser seguida na experiência.
• Uma vez que o número desejado de tiras foi removido, reseal imediatamente o saco para proteger permanecer da deterioração. Cubra todos os reagentes quando não no uso.
• Make sure que introduz com pipeta a ordem e a taxa de adição de bem-a-bem ao introduzir com pipeta reagentes.
• A pipeta derruba e o aferidor da placa à disposição deve ser limpo e descartável para evitar a contaminação colateral.
• Evite usar os reagentes dos grupos diferentes junto.
• A solução B da carcaça é sensível à luz, não expõe a solução B da carcaça para iluminar-se por muito tempo.
• Pare a solução contém o ácido. Vista por favor a proteção do olho, da mão e de pele ao usar este material. Evite o contato da pele ou das mucosas com reagente do jogo.
• O jogo não deve ser usado além da data de validade.

 
Coleção de espécime
O soro permite que o soro coagule por 10-20 minutos na temperatura ambiente. Centrifugador em 2000-3000 RPM por 20 minutos.
 
O plasma recolhe o plasma usando o EDTA ou a heparina como um anticoagulante. Centrifugue amostras por 15 minutos em 2000-3000 RPM em 2 - 8°C dentro de 30 minutos da coleção.
 
A urina recolhe pelo tubo estéril. Centrifugador em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Ao recolher o líquido fluido e cerebrospinal pleuroperitoneal, siga por favor os procedimentos acima mencionados.
 
O Supernatant da cultura celular recolhe pelos tubos estéreis ao examinar segregue componentes. Centrifugue em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Recolha os supernatants com cuidado. Ao examinar os componentes dentro da pilha, use PBS (pH 7.2-7.4) para diluir a suspensão da pilha à concentração da pilha de aproximadamente 1 million/ml. Danifique pilhas através dos ciclos repetidos da gelo-aproximação amigável para deixar para fora os componentes internos. Centrifugue em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.
 
O tecido outros líquidos de corpo enxágua tecidos em PBS (pH 7,4) para remover completamente o sangue adicional e para pesá-lo antes da homogeneização. Triture tecidos e homogeneize-os em PBS (pH7.4) com um homogenizador de vidro no gelo. Aproximação amigável em 2-8°C ou gelo no centrifugador de -20°C. em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.
 
o *Sample não pode ser diluído com este jogo. Devido o ao material nós usamo-nos para preparar o jogo, a interferência de matriz da amostra pode falsamente comprimir a especificidade e a precisão do ensaio.
 
Preparação do reagente
 Todos os reagentes devem ser trazidos à temperatura ambiente antes de usar.
O padrão reconstitui o 120μl do padrão (640pg/ml) com o 120μl do diluente padrão para gerar uma solução 320pg/ml conservada em estoque padrão. Permita que o padrão sente-se por 15 minutos com agitação delicada antes de fazer diluições. Prepare pontos padrão duplicados em série diluindo o 1:2 padrão da solução conservada em estoque (320pg/ml) com o diluente padrão para produzir as soluções 160pg/ml, 80pg/ml, 40pg/ml e 20pg/ml. O diluente padrão serve como o padrão zero (0 pg/ml). Toda a solução restante deve ser congelada em -20°C e ser usada dentro de um mês. A diluição das soluções padrão sugeridas é como segue:
 

 
Amortecedor 20ml diluído da lavagem do concentrado 30x do amortecedor da lavagem no deionized ou água destilada para render 600 ml do amortecedor da lavagem 1x. Se os cristais formaram no concentrado, mistura delicadamente até que os cristais se dissolverem completamente.
 
Sumário
1. Prepare todos os reagentes, amostras e padrões.
2. Adicione a amostra e o reagente de ELISA em cada um bem. Incube para 1 hora em 37°C.
3. Lave a placa 5 vezes.
4. Adicione a solução A e B. Incubação da carcaça por 10 minutos em 37°C.
5. Adicione param a solução e a cor torna-se.
6. Leia o valor do OD dentro de 10 minutos.
 
Cálculo de resultado
Construa uma curva padrão traçando o OD médio para cada padrão no vertical (Y) linha central contra a concentração no horizontal (X) a linha central e tira uma melhor curva do ajuste através dos pontos no gráfico. Estes cálculos podem melhor ser executados com o software por computador do curva-encaixe e a melhor linha do ajuste pode ser determinada pela análise de regressão.