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Tamanho suíno de Wells do jogo 96 do teste de Immunoassay do sanduíche SDC1 com sensibilidade e especificidade altas
Cat.No E0604Po
Uso pretendido
Este jogo do sanduíche é para a detecção quantitativa exata de Syndecan-1 suíno (igualmente conhecido como SDC1) no soro, plasma, supernates da cultura celular, lysates da pilha, homogenates do tecido.
Princípio do ensaio
Este jogo do teste de ELISA é um ensaio Enzima-ligado da imunoabsorção (ELISA). A placa foi pré-revestida com o anticorpo SDC1 suíno. SDC1 apresentam na amostra são adicionados e ligam aos anticorpos revestidos nos poços. E o anticorpo SDC1 suíno então biotinylated é adicionado e liga a SDC1 na amostra. Então Streptavidin-HRP é adicionado e liga ao anticorpo de Biotinylated SDC1. Após a incubação Streptavidin-HRP desatado é lavado afastado durante uma etapa de lavagem. A solução da carcaça é adicionada então e a cor torna-se em proporção à quantidade de SDC1 suíno. A reação é terminada pela adição de ácido para a solução e a absorvência é medida em 450 nanômetro.
o produto dos *This é para o uso da pesquisa somente, não para o uso em procedimentos do diagnóstico. É recomenda altamente ler inteiramente antes de usar esta instrução.
Precauções
Reagente fornecido
Componentes | Quantidade |
Solução padrão (640ng/ml) | 0.5ml x1 |
Placa pré-revestida de ELISA | 12 * 8 tiras boas x1 |
Diluente padrão | 3ml x1 |
Streptavidin-HRP | 6ml x1 |
Pare a solução | 6ml x1 |
Solução A da carcaça | 6ml x1 |
Solução B da carcaça | 6ml x1 |
Concentrado do amortecedor da lavagem (30x) | 20ml x1 |
Anticorpo ASDC1 suíno de Biotinylated | 1ml x1 |
Instrução do usuário | 1 |
Aferidor da placa | pics 2 |
Saco do zíper | 1 PIC |
Preparação do reagente
Todos os reagentes devem ser trazidos à temperatura ambiente antes de usar.
O padrão reconstitui o 120μl do padrão (640ng/ml) com o 120μl do diluente padrão para gerar uma solução 320ng/ml conservada em estoque padrão. Permita que o padrão sente-se por 15 minutos com agitação delicada antes de fazer diluições. Prepare pontos padrão duplicados em série diluindo o 1:2 padrão da solução conservada em estoque (320ng/ml) com o diluente padrão para produzir as soluções 160ng/ml, 80ng/ml, 40ng/ml e 20ng/ml. O diluente padrão serve como o padrão zero (0 ng/ml). Toda a solução restante deve ser congelada em -20°C e ser usada dentro de um mês. A diluição das soluções padrão sugeridas é como segue:
320ng/ml | Padrão No.5 | diluente original do padrão 120μl + do padrão 120μl |
160ng/ml | Padrão No.4 | padrão 120μl diluente do padrão No.5 + 120μl |
80ng/ml | Padrão No.3 | padrão 120μl diluente do padrão No.4 + 120μl |
40ng/ml | Padrão No.2 | padrão 120μl diluente do padrão No.3 + 120μl |
20ng/ml | Padrão No.1 | padrão 120μl diluente do padrão No.2 + 120μl |
Concentração padrão | Padrão No.5 | Padrão No.4 | Padrão No.3 | Padrão No.2 | Padrão No.1 |
640ng/ml | 320ng/ml | 160ng/ml | 80ng/ml | 40ng/ml | 20ng/ml |
Amortecedor 20ml diluído da lavagem do concentrado 30x do amortecedor da lavagem no deionized ou água destilada para render 600 ml do amortecedor da lavagem 1x. Se os cristais formaram no concentrado, mistura delicadamente até que os cristais se dissolverem completamente.
Sumário
1. Prepare todos os reagentes, amostras e padrões.
2. Adicione a amostra e o reagente de ELISA em cada um bem. Incube para 1 hora em 37°C.
3. Lave a placa 5 vezes.
4. Adicione a solução A e B. Incubação da carcaça por 10 minutos em 37°C.
5. Adicione param a solução e a cor torna-se.
6. Leia o valor do OD dentro de 10 minutos.
Cálculo de resultado
Construa uma curva padrão traçando o OD médio para cada padrão no vertical (Y) linha central contra a concentração no horizontal (X) a linha central e tira uma melhor curva do ajuste através dos pontos no gráfico. Estes cálculos podem melhor ser executados com o software por computador do curva-encaixe e a melhor linha do ajuste pode ser determinada pela análise de regressão.