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Do jogo humano do teste de Immunoassays da pesquisa especificidade alta METRNL do laboratório com serviço do Oem
Cat.No E3941Hu
Escala padrão da curva: 0.05ng/ml - 15ng/ml
Sensibilidade: 0.023ng/ml
Tamanho: 96 poços
Armazenamento: Armazene os reagentes em 2-8°C. para um armazenamento de mais de 6 meses referem a data de validade mantêm-no em ciclos repetidos Avoid da aproximação amigável de -20°C. Se os reagentes individuais são abertos recomenda-se que o jogo esteja usado dentro de 1 mês.
o produto dos *This é para o uso da pesquisa somente, não para o uso em procedimentos do diagnóstico. É recomenda altamente ler inteiramente antes de usar esta instrução.
Preparação do reagente
Todos os reagentes devem ser trazidos à temperatura ambiente antes de usar.
O padrão reconstitui o 120μl do padrão (16ng/ml) com o 120μl do diluente padrão para gerar uma solução 8ng/ml conservada em estoque padrão. Permita que o padrão sente-se por 15 minutos com agitação delicada antes de fazer diluições. Prepare pontos padrão duplicados em série diluindo o 1:2 padrão da solução conservada em estoque (8ng/ml) com o diluente padrão para produzir as soluções 4ng/ml, 2ng/ml, 1ng/ml e 0.5ng/ml. O diluente padrão serve como o padrão zero (0 ng/ml). Toda a solução restante deve ser congelada em -20°C e ser usada dentro de um mês. A diluição das soluções padrão sugeridas é como segue:
8ng/ml | Padrão No.5 | diluente original do padrão 120μl + do padrão 120μl |
4ng/ml | Padrão No.4 | padrão 120μl diluente do padrão No.5 + 120μl |
2ng/ml | Padrão No.3 | padrão 120μl diluente do padrão No.4 + 120μl |
1ng/ml | Padrão No.2 | padrão 120μl diluente do padrão No.3 + 120μl |
0.5ng/ml | Padrão No.1 | padrão 120μl diluente do padrão No.2 + 120μl |
Concentração padrão | Padrão No.5 | Padrão No.4 | Padrão No.3 | Padrão No.2 | Padrão No.1 |
16ng/ml | 8ng/ml | 4ng/ml | 2ng/ml | 1ng/ml | 0.5ng/ml |
Amortecedor 20ml diluído da lavagem do concentrado 25x do amortecedor da lavagem no deionized ou água destilada para render 500 ml do amortecedor da lavagem 1x. Se os cristais formaram no concentrado, mistura delicadamente até que os cristais se dissolverem completamente.
Reagente fornecido
Componentes | Quantidade |
Solução padrão (16ng/ml) | 0.5ml x1 |
Placa pré-revestida de ELISA | 12 * 8 tiras boas x1 |
Diluente padrão | 3ml x1 |
Streptavidin-HRP | 6ml x1 |
Pare a solução | 6ml x1 |
Solução A da carcaça | 6ml x1 |
Solução B da carcaça | 6ml x1 |
Concentrado do amortecedor da lavagem (25x) | 20ml x1 |
Anticorpo humano de Biotinylated METRNL | 1ml x1 |
Instrução do usuário | 1 |
Aferidor da placa | pics 2 |
Saco do zíper | 1 PIC |
Material exigido mas não fornecido
Coleção de espécime
As amostras devem ser claras e transparentes e ser centrifugadas para remover os sólidos suspendidos.
Soro: Permita que as amostras coagulem por 2 horas na temperatura ambiente ou durante a noite em 4°C antes que a centrifugação por 15 minutos em 1000×g. recolha o supernatant e realize o ensaio imediatamente. Os tubos da coleção do sangue devem ser descartáveis, não-pyrogenic, e não-endotoxina.
Plasma: Recolha o plasma usando o EDTA ou a heparina como um anticoagulante. Centrifugue amostras por 15 minutos em 1000×g em 2 - 8°Cwithin 30 minutos da coleção. Recolha o supernatant e realize o ensaio imediatamente. Hemolysissamples não é apropriado para o ensaio de ELISA!
Supernate da cultura celular: Supernate do centrifugador por 20 minutos para remover os restos insolúveis da impureza e de pilha em 1000×g em 2 - 8°C. recolhem o supernate claro e realizam o ensaio imediatamente.
Homogenates do tecido: Você deve obter referências detalhadas de outras literaturas antes do ensaio que visa tipos diferentes do tecido. Para a informação geral, o sangue da hemólise pode afetar o resultado, assim que você deve triturar os tecidos às partes pequenas e enxaguá-las em PBS gelado (0.01M, pH=7.4) para remover completamente o sangue adicional. As partes do tecido devem ser pesadas e então homogeneizado em PBS (o volume depende do peso do tecido) com um homogenizador de vidro no gelo. Para quebrar mais as pilhas, você pode sonicate a suspensão com um quebrador ultrassônico da pilha ou sujeitá-la aos ciclos da gelo-aproximação amigável. Os homogenates centrifugated então para 5minutes em 5000×g para obter o supernate.
Outros líquidos biológicos: Centrifugue amostras por 20 minutos em 1000×g em 2 - 8°C. recolhem o supernatant e realizam o ensaio imediatamente.
o *Sample não pode ser diluído com este jogo. Devido o ao material nós usamo-nos para preparar o jogo, a interferência de matriz da amostra pode falsamente comprimir a especificidade e a precisão do ensaio.
Sumário
1. Prepare todos os reagentes, amostras e padrões.
2. Adicione a amostra e o reagente de ELISA em cada um bem. Incube para 1 hora em 37°C.
3. Lave a placa 5 vezes.
4. Adicione a solução A e B. Incubação da carcaça por 10 minutos em 37°C.
5. Adicione param a solução e a cor torna-se.
6. Leia o valor do OD dentro de 10 minutos.