Shanghai Korain Biotech Co., Ltd
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Jogo sensível alto canino do teste de Immunoassay do Interleukin 10 da pesquisa do laboratório 2 horas de comprimento do ensaio
Cat.No E0006Ca
Princípio do ensaio
Este jogo do teste do elisa é um ensaio Enzima-ligado da imunoabsorção (ELISA). A placa foi pré-revestida com o anticorpo IL-10 canino. IL-10 apresentam na amostra são adicionados e ligam aos anticorpos revestidos nos poços. E o anticorpo IL-10 canino então biotinylated é adicionado e liga a IL-10 na amostra. Então Streptavidin-HRP é adicionado e liga ao anticorpo de Biotinylated IL-10. Após a incubação Streptavidin-HRP desatado é lavado afastado durante uma etapa de lavagem. A solução da carcaça é adicionada então e a cor torna-se em proporção à quantidade de IL-10 canino. A reação é terminada pela adição de ácido para a solução e a absorvência é medida em 450 nanômetro.
Uso pretendido
Este jogo do teste do elisa é para a detecção quantitativa exata do Interleukin canino 10 (igualmente conhecido como IL-10) no soro, plasma, supernates da cultura celular, lysates da pilha, homogenates do tecido.
o produto dos *This é para o uso da pesquisa somente, não para o uso em procedimentos do diagnóstico. É recomenda altamente ler inteiramente antes de usar esta instrução.
Reagente fornecido
| Componentes | Quantidade |
| Solução padrão (800pg/ml) | 0.5ml x1 |
| Placa pré-revestida de ELISA | 12 * 8 tiras boas x1 |
| Diluente padrão | 3ml x1 |
| Streptavidin-HRP | 6ml x1 |
| Pare a solução | 6ml x1 |
| Solução A da carcaça | 6ml x1 |
| Solução B da carcaça | 6ml x1 |
| Concentrado do amortecedor da lavagem (30x) | 20ml x1 |
| Anticorpo IL-10 canino de Biotinylated | 1ml x1 |
| Instrução do usuário | 1 |
| Aferidor da placa | pics 2 |
| Saco do zíper | 1 PIC |
Coleção de espécime
O soro permite que o soro coagule por 10-20 minutos na temperatura ambiente. Centrifugador em 2000-3000 RPM por 20 minutos.
O plasma recolhe o plasma usando o EDTA ou a heparina como um anticoagulante. Centrifugue amostras por 15 minutos em 2000-3000 RPM em 2 - 8°C dentro de 30 minutos da coleção.
A urina recolhe pelo tubo estéril. Centrifugador em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Ao recolher o líquido fluido e cerebrospinal pleuroperitoneal, siga por favor os procedimentos acima mencionados.
O Supernatant da cultura celular recolhe pelos tubos estéreis ao examinar segregue componentes. Centrifugue em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Recolha os supernatants com cuidado. Ao examinar os componentes dentro da pilha, use PBS (pH 7.2-7.4) para diluir a suspensão da pilha à concentração da pilha de aproximadamente 1 million/ml. Danifique pilhas através dos ciclos repetidos da gelo-aproximação amigável para deixar para fora os componentes internos. Centrifugue em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.
O tecido outros líquidos de corpo enxágua tecidos em PBS (pH 7,4) para remover completamente o sangue adicional e para pesá-lo antes da homogeneização. Triture tecidos e homogeneize-os em PBS (pH7.4) com um homogenizador de vidro no gelo. Aproximação amigável em 2-8°C ou gelo no centrifugador de -20°C. em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.
o *Sample não pode ser diluído com este jogo. Devido o ao material nós usamo-nos para preparar o jogo, a interferência de matriz da amostra pode falsamente comprimir a especificidade e a precisão do ensaio.
Preparação do reagente
Todos os reagentes devem ser trazidos à temperatura ambiente antes de usar.
O padrão reconstitui o 120μl do padrão (800pg/ml) com o 120μl do diluente padrão para gerar uma solução 400pg/ml conservada em estoque padrão. Permita que o padrão sente-se por 15 minutos com agitação delicada antes de fazer diluições. Prepare pontos padrão duplicados em série diluindo o 1:2 padrão da solução conservada em estoque (400pg/ml) com o diluente padrão para produzir as soluções 200pg/ml, 100pg/ml, 50pg/ml e 25pg/ml. O diluente padrão serve como o padrão zero (0 pg/ml). Toda a solução restante deve ser congelada em -20°C e ser usada dentro de um mês. A diluição das soluções padrão sugeridas é como segue:
| 400pg/ml | Padrão No.5 | diluente original do padrão 120μl + do padrão 120μl |
| 200pg/ml | Padrão No.4 | padrão 120μl diluente do padrão No.5 + 120μl |
| 100pg/ml | Padrão No.3 | padrão 120μl diluente do padrão No.4 + 120μl |
| 50pg/ml | Padrão No.2 | padrão 120μl diluente do padrão No.3 + 120μl |
| 25pg/ml | Padrão No.1 | padrão 120μl diluente do padrão No.2 + 120μl |
| Concentração padrão | Padrão No.5 | Padrão No.4 | Padrão No.3 | Padrão No.2 | Padrão No.1 |
| 800pg/ml | 400pg/ml | 200pg/ml | 100pg/ml | 50pg/ml | 25pg/ml |
Amortecedor 20ml diluído da lavagem do concentrado 30x do amortecedor da lavagem no deionized ou água destilada para render 600 ml do amortecedor da lavagem 1x. Se os cristais formaram no concentrado, mistura delicadamente até que os cristais se dissolverem completamente.
Sumário
1. Prepare todos os reagentes, amostras e padrões.
2. Adicione a amostra e o reagente de ELISA em cada um bem. Incube para 1 hora em 37°C.
3. Lave a placa 5 vezes.
4. Adicione a solução A e B. Incubação da carcaça por 10 minutos em 37°C.
5. Adicione param a solução e a cor torna-se.
6. Leia o valor do OD dentro de 10 minutos.