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96 jogo personalizado cabra do sanduíche ELISA da peroxidase 2 da glutatione da placa do poço 2 horas de comprimento do ensaio
Cat.No E0153Go
Preparação do reagente
Todos os reagentes devem ser trazidos à temperatura ambiente antes de usar.
O padrão reconstitui o 120μl do padrão (4000ng/L) com o 120μl do diluente padrão para gerar uma solução 2000ng/L conservada em estoque padrão. Permita que o padrão sente-se por 15 minutos com agitação delicada antes de fazer diluições. Prepare pontos padrão duplicados em série diluindo a solução conservada em estoque padrão (2000ng/L) 1:2 com o diluente padrão para produzir as soluções 1000ng/L, 500ng/L, 250ng/L e 125ng/L. O diluente padrão serve como o padrão zero (0 ng/L). Toda a solução restante deve ser congelada em -20°C e ser usada dentro de um mês. A diluição das soluções padrão sugeridas é como segue:
2000ng/L | Padrão No.5 | diluente original do padrão 120μl + do padrão 120μl |
1000ng/L | Padrão No.4 | padrão 120μl diluente do padrão No.5 + 120μl |
500ng/L | Padrão No.3 | padrão 120μl diluente do padrão No.4 + 120μl |
250ng/L | Padrão No.2 | padrão 120μl diluente do padrão No.3 + 120μl |
125ng/L | Padrão No.1 | padrão 120μl diluente do padrão No.2 + 120μl |
Concentração padrão | Padrão No.5 | Padrão No.4 | Padrão No.3 | Padrão No.2 | Padrão No.1 |
4000ng/L | 2000ng/L | 1000ng/L | 500ng/L | 250ng/L | 125ng/L |
Amortecedor 20ml diluído da lavagem do concentrado 25x do amortecedor da lavagem no deionized ou água destilada para render 500 ml do amortecedor da lavagem 1x. Se os cristais formaram no concentrado, mistura delicadamente até que os cristais se dissolverem completamente.
Precisão
A precisão do Intra-ensaio (precisão dentro de um ensaio) três amostras de concentração conhecida foi testada em uma placa para avaliar a precisão do intra-ensaio.
A precisão do Inter-ensaio (precisão entre ensaios) três amostras de concentração conhecida foi testada em ensaios separados para avaliar a precisão do inter-ensaio.
CV (%) = SD/mean x 100
Intra-ensaio: CV<8>
Inter-ensaio: CV<10>
Uso pretendido
Este jogo do sanduíche é para a detecção quantitativa exata da peroxidase 2 da glutatione da cabra (igualmente conhecida como GPX2) no soro, plasma, supernates da cultura celular, lysates da pilha, homogenates do tecido.
Reagente fornecido
Componentes | Quantidade |
Solução padrão (4000ng/L) | 0.5ml x1 |
Placa pré-revestida de ELISA | 12 * 8 tiras boas x1 |
Diluente padrão | 3ml x1 |
Streptavidin-HRP | 6ml x1 |
Pare a solução | 6ml x1 |
Solução A da carcaça | 6ml x1 |
Solução B da carcaça | 6ml x1 |
Concentrado do amortecedor da lavagem (25x) | 20ml x1 |
Anticorpo da cabra GPX2 de Biotinylated | 1ml x1 |
Instrução do usuário | 1 |
Aferidor da placa | pics 2 |
Saco do zíper | 1 PIC |
Sumário
1. Prepare todos os reagentes, amostras e padrões.
2. Adicione a amostra e o reagente de ELISA em cada um bem. Incube para 1 hora em 37°C.
3. Lave a placa 5 vezes.
4. Adicione a solução A e B. Incubação da carcaça por 10 minutos em 37°C.
5. Adicione param a solução e a cor torna-se.
6. Leia o valor do OD dentro de 10 minutos.
Cálculo de resultado
Construa uma curva padrão traçando o OD médio para cada padrão no vertical (Y) linha central contra a concentração no horizontal (X) a linha central e tira uma melhor curva do ajuste através dos pontos no gráfico. Estes cálculos podem melhor ser executados com o software por computador do curva-encaixe e a melhor linha do ajuste pode ser determinada pela análise de regressão.