0.11ng/Ml elevada precisão do jogo ADAMTS19 do ensaio da sensibilidade ELISA para a pesquisa

Ser humano personalizado um Disintegrin e um Metalloproteinase com o jogo do ensaio dos motivos 19 ELISA de Thrombospondin
 
Cat.No E3489Hu
Escala padrão da curva: 0.2ng/ml - 60ng/ml
Sensibilidade: 0.11ng/ml
Tamanho: 96 poços
Armazenamento: Armazene os reagentes em 2-8°C. para um armazenamento de mais de 6 meses referem a data de validade mantêm-no em ciclos repetidos Avoid da aproximação amigável de -20°C. Se os reagentes individuais são abertos recomenda-se que o jogo esteja usado dentro de 1 mês.
o produto dos *This é para o uso da pesquisa somente, não para o uso em procedimentos do diagnóstico. É recomenda altamente ler inteiramente antes de usar esta instrução.
 
Reagente fornecido

 
Material exigido mas não fornecido

• Incubadora 37°C±0.5°C
• Papel absorvente
• Pipeta da precisão e pontas descartáveis da pipeta
• Limpe os tubos
• Deionized ou água destilada
• Leitor de Microplate com 450 o filtro do comprimento de onda do ± 10nm

 
Precisão
A precisão do Intra-ensaio (precisão dentro de um ensaio) três amostras de concentração conhecida foi testada em uma placa para avaliar a precisão do intra-ensaio.
A precisão do Inter-ensaio (precisão entre ensaios) três amostras de concentração conhecida foi testada em ensaios separados para avaliar a precisão do inter-ensaio.
CV (%) = SD/mean x 100
Intra-ensaio: Inter-ensaio<8> do CV: CV<10>  
Princípio do ensaio
Este jogo do ensaio do elisa é um ensaio Enzima-ligado da imunoabsorção (ELISA). A placa foi pré-revestida com o anticorpo ADAMTS19 humano. ADAMTS19 apresentam na amostra são adicionados e ligam aos anticorpos revestidos nos poços. E o anticorpo ADAMTS19 humano então biotinylated é adicionado e liga a ADAMTS19 na amostra. Então Streptavidin-HRP é adicionado e liga ao anticorpo de Biotinylated ADAMTS19. Após a incubação Streptavidin-HRP desatado é lavado afastado durante uma etapa de lavagem. A solução da carcaça é adicionada então e a cor torna-se em proporção à quantidade de ADAMTS19 humano. A reação é terminada pela adição de ácido para a solução e a absorvência é medida em 450 nanômetro.
 
Coleção de espécime
O soro permite que o soro coagule por 10-20 minutos na temperatura ambiente. Centrifugador em 2000-3000 RPM por 20 minutos.
 
O plasma recolhe o plasma usando o EDTA ou a heparina como um anticoagulante. Centrifugue amostras por 15 minutos em 2000-3000 RPM em 2 - 8°C dentro de 30 minutos da coleção.
 
A urina recolhe pelo tubo estéril. Centrifugador em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Ao recolher o líquido fluido e cerebrospinal pleuroperitoneal, siga por favor os procedimentos acima mencionados.
 
O Supernatant da cultura celular recolhe pelos tubos estéreis ao examinar segregue componentes. Centrifugue em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Recolha os supernatants com cuidado. Ao examinar os componentes dentro da pilha, use PBS (pH 7.2-7.4) para diluir a suspensão da pilha à concentração da pilha de aproximadamente 1 million/ml. Danifique pilhas através dos ciclos repetidos da gelo-aproximação amigável para deixar para fora os componentes internos. Centrifugue em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.
 
O tecido e outros líquidos de corpo enxáguam tecidos em PBS (pH 7,4) para remover completamente o sangue adicional e para pesá-lo antes da homogeneização. Triture tecidos e homogeneize-os em PBS (pH7.4) com um homogenizador de vidro no gelo. Aproximação amigável em 2-8°C ou gelo no centrifugador de -20°C. em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.
 
Nota

• As concentrações da amostra devem ser previstas antes de ser usada no ensaio. Se a concentração da amostra não está dentro da escala da curva padrão, os usuários devem contactar-nos para determinar a amostra ótima para suas experiências particulares.
• As amostras a ser usadas no prazo de 5 dias devem ser armazenadas nas amostras 2-8°C. devem ser aliquoted ou devem ser armazenadas em -20°C dentro de 1 mês ou em -80°C dentro de 6 meses. Avoid repetiu ciclos da aproximação amigável do gelo.
• As amostras devem ser trazidas à temperatura ambiente antes de começar o ensaio.
• Centrifugador para recolher antes de usar a amostra.
• As amostras que contêm NaN3 não podem ser testadas enquanto inibe a atividade da peroxidase (HRP) do rabanete de cavalo.
• Recolha os supernatants com cuidado. Quando os sedimentos ocorreram durante o armazenamento, a centrifugação deve ser executada outra vez.
• A hemólise pode extremamente impactar a validez dos resultados da análise. Ciao para minimizar a hemólise.

o *Sample não pode ser diluído com este jogo. Devido o ao material nós usamo-nos para preparar o jogo, a interferência de matriz da amostra pode falsamente comprimir a especificidade e a precisão do ensaio.
 
Sumário
1. prepare todos os reagentes, amostras e padrões.
2. adicione a amostra e o reagente de ELISA em cada um bem. Incube para 1 hora em 37°C.
3. lave a placa 5 vezes.
4. adicione a solução A e B. Incubação da carcaça por 10 minutos em 37°C.
5. adicione param a solução e a cor torna-se.
6. leia o valor do OD dentro de 10 minutos.
 
Cálculo de resultado
Construa uma curva padrão traçando o OD médio para cada padrão no vertical (Y) linha central contra a concentração no horizontal (X) a linha central e tira uma melhor curva do ajuste através dos pontos no gráfico. Estes cálculos podem melhor ser executados com o software por computador do curva-encaixe e a melhor linha do ajuste pode ser determinada pela análise de regressão.