Shanghai Korain Biotech Co., Ltd
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96 ser humano personalizado Wells Corticotropin que libera o jogo de CRH ELISA da hormona
Cat.No EHu1000
Escala padrão da curva: 1ng/ml - 40ng/ml
Sensibilidade: 0.53ng/ml
Tamanho: 96 poços
Armazenamento: Armazene os reagentes em 2-8°C. para um armazenamento de mais de 6 meses referem a data de validade mantêm-no em ciclos repetidos Avoid da aproximação amigável de -20°C. Se os reagentes individuais são abertos recomenda-se que o jogo esteja usado dentro de 1 mês.
Princípio do ensaio
Este jogo é um ensaio Enzima-ligado da imunoabsorção (ELISA). A placa foi pré-revestida com o anticorpo de CRH do ser humano. CRH apresenta na amostra é adicionado e liga aos anticorpos revestidos nos poços. E o anticorpo então biotinylated de CRH do ser humano é adicionado e liga a CRH na amostra. Então Streptavidin-HRP é adicionado e liga ao anticorpo de Biotinylated CRH. Após a incubação Streptavidin-HRP desatado é lavado afastado durante uma etapa de lavagem. A solução da carcaça é adicionada então e a cor torna-se em proporção à quantidade de ser humano CRH. A reação é terminada pela adição de ácido para a solução e a absorvência é medida em 450 nanômetro.
Reagente fornecido
| Componentes | Quantidade |
| Solução padrão (40ng/ml) | 0.5ml x1 |
| Placa pré-revestida de ELISA | 12 * 8 tiras boas x1 |
| Diluente padrão | 3ml x1 |
| Streptavidin-HRP | 6ml x1 |
| Pare a solução | 6ml x1 |
| Solução A da carcaça | 6ml x1 |
| Solução B da carcaça | 6ml x1 |
| Concentrado do amortecedor da lavagem (30x) | 20ml x1 |
| Anticorpo de CRH do ser humano de Biotinylated | 1ml x1 |
| Instrução do usuário | 1 |
| Aferidor da placa | pics 2 |
| Saco do zíper | 1 PIC |
Preparação do reagente
Todos os reagentes devem ser trazidos à temperatura ambiente antes de usar. O padrão reconstitui o 120μl do padrão (40ng/ml) com o 120μl do diluente padrão para gerar uma solução 20ng/ml conservada em estoque padrão. Permita que o padrão sente-se por 15 minutos com agitação delicada antes de fazer diluições. Prepare pontos padrão duplicados em série diluindo o 1:2 padrão da solução conservada em estoque (20ng/ml) com o diluente padrão para produzir as soluções 10ng/ml, 5ng/ml, 2.5ng/ml e 1.25ng/ml. O diluente padrão serve como o padrão zero (0 ng/ml). Toda a solução restante deve ser congelada em -20℃ e ser usada dentro de um mês. A diluição das soluções padrão sugeridas é como segue:
| 20ng/ml | Padrão No.5 | diluente original do padrão 120μl + do padrão 120μl |
| 10ng/ml | Padrão No.4 | padrão 120μl diluente do padrão No.5 + 120μl |
| 5ng/ml | Padrão No.3 | padrão 120μl diluente do padrão No.4 + 120μl |
| 2.5ng/ml | Padrão No.2 | padrão 120μl diluente do padrão No.3 + 120μl |
| 1.25ng/ml | Padrão No.1 | padrão 120μl diluente do padrão No.2 + 120μl |
| Concentração padrão | Padrão No.5 | Padrão No.4 | Padrão No.3 | Padrão No.2 | Padrão No.1 |
| 40ng/ml | 20ng/ml | 10ng/ml | 5ng/ml | 2.5ng/ml | 1.25ng/ml |
Amortecedor 20ml diluído da lavagem do concentrado 30x do amortecedor da lavagem no deionized ou água destilada para render 500 ml do amortecedor da lavagem 1x. Se os cristais formaram no concentrado, mistura delicadamente até que os cristais se dissolverem completamente.
Sumário
1. Prepare todos os reagentes, amostras e padrões.
2. Adicione a amostra e o reagente de ELISA em cada um bem. Incube para 1 hora em 37°C.
3. Lave a placa 5 vezes.
4. Adicione a solução A e B. Incubação da carcaça por 10 minutos em 37°C.
5. Adicione param a solução e a cor torna-se.
6. Leia o valor do OD dentro de 10 minutos.
Cálculo de resultado
Construa uma curva padrão traçando o OD médio para cada padrão no vertical (Y) linha central contra a concentração no horizontal (X) a linha central e tira uma melhor curva do ajuste através dos pontos no gráfico. Estes cálculos podem melhor ser executados com o software por computador do curva-encaixe e a melhor linha do ajuste pode ser determinada pela análise de regressão.