Shanghai Korain Biotech Co., Ltd
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Personalize poços do jogo 96 do rato CRP ELISA
Uso pretendido
Este jogo do sanduíche é para a detecção quantitativa exata de proteína C-reativa do rato (igualmente conhecida como CRP) no soro, plasma, supernates da cultura celular, lysates da pilha, homogenates do tecido.
Princípio do ensaio
Este jogo é um ensaio Enzima-ligado da imunoabsorção (ELISA). A placa foi pré-revestida com o anticorpo do rato CRP. CRP apresentam na amostra são adicionados e ligam aos anticorpos revestidos nos poços. E o anticorpo então biotinylated do rato CRP é adicionado e liga a CRP na amostra. Então Streptavidin-HRP é adicionado e liga ao anticorpo de Biotinylated CRP. Após a incubação Streptavidin-HRP desatado é lavado afastado durante uma etapa de lavagem. A solução da carcaça é adicionada então e a cor torna-se em proporção à quantidade do rato CRP. A reação é terminada pela adição de ácido para a solução e a absorvência é medida em 450 nanômetro.
Reagente fornecido
| Componentes | Quantidade |
| Solução padrão (12.8mg/L) | 0.5ml x1 |
| Placa pré-revestida de ELISA | 12 * 8 tiras boas x1 |
| Diluente padrão | 3ml x1 |
| Streptavidin-HRP | 6ml x1 |
| Pare a solução | 6ml x1 |
| Solução A da carcaça | 6ml x1 |
| Solução B da carcaça | 6ml x1 |
| Concentrado do amortecedor da lavagem (30x) | 20ml x1 |
| Anticorpo do rato CRP de Biotinylated | 1ml x1 |
| Instrução do usuário | 1 |
| Aferidor da placa | pics 2 |
| Saco do zíper | 1 PIC |
Coleção de espécime
O soro permite que o soro coagule por 10-20 minutos na temperatura ambiente. Centrifugador em 2000-3000 RPM por 20 minutos.
O plasma recolhe o plasma usando o EDTA ou a heparina como um anticoagulante. Centrifugue amostras por 15 minutos em 2000-3000 RPM em 2 - 8°C dentro de 30 minutos da coleção.
A urina recolhe pelo tubo estéril. Centrifugador em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Ao recolher o líquido fluido e cerebrospinal pleuroperitoneal, siga por favor os procedimentos acima mencionados.
O Supernatant da cultura celular recolhe pelos tubos estéreis ao examinar segregue componentes. Centrifugue em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Recolha os supernatants com cuidado. Ao examinar os componentes dentro da pilha, use PBS (pH 7.2-7.4) para diluir a suspensão da pilha à concentração da pilha de aproximadamente 1 million/ml. Danifique pilhas através dos ciclos repetidos da gelo-aproximação amigável para deixar para fora os componentes internos. Centrifugue em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.
Tecidos da lavagem do tecido em PBS (pH 7,4) para remover completamente o sangue adicional e a pesá-lo antes da homogeneização. Triture tecidos e homogeneize-os em PBS (pH7.4) com um homogenizador de vidro no gelo. Aproximação amigável em 2-8°C ou gelo no centrifugador de -20°C. em 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.
Preparação do reagente
Todos os reagentes devem ser trazidos à temperatura ambiente antes de usar.
O padrão reconstitui o 120μl do padrão (12.8mg/L) com o 120μl do diluente padrão para gerar uma solução 6.4mg/L conservada em estoque padrão. Permita que o padrão sente-se por 15 minutos com agitação delicada antes de fazer diluições. Prepare pontos padrão duplicados em série diluindo a solução conservada em estoque padrão (6.4mg/L) 1:2 com o diluente padrão para produzir as soluções 3.2mg/L, 1.6mg/L, 0.8mg/L e 0.4mg/L. O diluente padrão serve como o padrão zero (0 mg/L). Toda a solução restante deve ser congelada em -20℃ e ser usada dentro de um mês. A diluição das soluções padrão sugeridas é como segue:
| 6.4mg/L | Padrão No.5 | diluente original do padrão 120μl + do padrão 120μl |
| 3.2mg/L | Padrão No.4 | padrão 120μl diluente do padrão No.5 + 120μl |
| 1.6mg/L | Padrão No.3 | padrão 120μl diluente do padrão No.4 + 120μl |
| 0.8mg/L | Padrão No.2 | padrão 120μl diluente do padrão No.3 + 120μl |
| 0.4mg/L | Padrão No.1 | padrão 120μl diluente do padrão No.2 + 120μl |
| Concentração padrão | Padrão No.5 | Padrão No.4 | Padrão No.3 | Padrão No.2 | Padrão No.1 |
| 12.8mg/L | 6.4mg/L | 3.2mg/L | 1.6mg/L | 0.8mg/L | 0.4mg/L |
Amortecedor 20ml diluído da lavagem do concentrado 30x do amortecedor da lavagem no deionized ou água destilada para render 500 ml do amortecedor da lavagem 1x. Se os cristais formaram no concentrado, mistura delicadamente até que os cristais se dissolverem completamente.
Cálculo de resultado
Construa uma curva padrão traçando o OD médio para cada padrão no vertical (Y) linha central contra a concentração no horizontal (X) a linha central e tira uma melhor curva do ajuste através dos pontos no gráfico. Estes cálculos podem melhor ser executados com o software por computador do curva-encaixe e a melhor linha do ajuste pode ser determinada pela análise de regressão.
Cat.No E0218Mo
Escala padrão da curva: 0.05mg/L - 10mg/L
Sensibilidade: 0.021mg/L
Tamanho: 96 poços
Armazenamento: Armazene os reagentes em 2-8°C. para um armazenamento de mais de 6 meses referem a data de validade mantêm-no em ciclos repetidos Avoid da aproximação amigável de -20°C. Se os reagentes individuais são abertos recomenda-se que o jogo esteja usado dentro de 1 mês.
* este produto é para o uso da pesquisa somente, não para o uso em procedimentos do diagnóstico. É recomenda altamente ler inteiramente antes de usar esta instrução.
Referências
Danenberg H.D., Szalai A.J., Swaminathan R.V., Peng L., Chen Z., Seifert P., W.P. Fay, Simon D.I., Edelman E.R.
Circulação 108:512- 515(2003)